目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-常量法>>糖代謝系列>> BC4940-50T/48S糖化血清蛋白含量檢測試劑盒 糖代謝
CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
---|---|---|---|
分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/48S |
貨號 | BC4940 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
主要用途 | 糖化血清蛋白含量檢測 |
糖化血清蛋白(GSP)含量檢測試劑盒(NBT法)說明書
可見分光光度法
貨號:BC4940
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品內(nèi)容:使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體2 mL×1瓶 | -20℃保存 |
試劑三 | 液體60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑四 | 液體5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品 | 粉劑×1支 | -20℃保存 |
溶液的配制:
標準品:臨用前加入0.8 mL試劑二,充分溶解,配制成10 mmol/L DMF標準液,2-8℃保存4周;再取40µL 10 mmol/L DMF標準液和60µL試劑二混合配制成成4 mmol/L標準溶液待測。
產(chǎn)品說明:
血清葡萄糖與白蛋白及其它血清蛋白分子N末端的氨基發(fā)生非酶促糖化反應(yīng),形成高分子酮胺結(jié)構(gòu),在堿性條件下與硝基四氯唑藍反應(yīng),生成紫紅色化合物甲臜。在530nm波長處比色,測定其OD值,與DMF標準比較,即可求得其含量。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、恒溫培養(yǎng)箱、低溫離心機、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、冰和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
血清(漿):收集血清(漿)到離心管內(nèi),按照血清(漿)體積(mL)∶試劑一體積(mL)= 10∶1的比例(建議吸取0.5 mL血清(漿)于EP管中,加入0.05 mL試劑一),充分混勻,于37℃保溫30 min。
二、測定步驟
1、 可見分光光度計預(yù)熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長至530 nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 標準溶液:按照標準溶液體積(mL):試劑一體積(mL)= 10∶1的比例(建議吸取0.5 mL 4 mmol/L標準溶液于EP管中,加入0.05 mL試劑一),充分混勻,于37℃保溫30 min。
3、 按下表步驟加樣:
試劑名稱(μL) | 測定管 | 空白管 | 標準管 | 標準空白管 |
樣本 | 50 | |||
蒸餾水 | 50 | |||
標準溶液 | 50 | |||
試劑二 | 50 | |||
試劑三 | 1000 | 1000 | 1000 | 1000 |
37℃顯色15min | ||||
試劑四 | 50 | 50 | 50 | 50 |
充分混勻,取1 mL于1 mL玻璃比色皿中,于530 nm處測定吸光度。分別記為A測定、A空白、A標準、A標準空白。ΔA測定=A測定-A空白,ΔA標準=A標準-A標準空白。 |
注:空白管和標準空白管均只需做1-2次。
三、糖化血清蛋白含量計算
糖化血清蛋白含量(mmol/L)=C×ΔA測定÷ΔA標準×F= 4×ΔA測定÷ΔA標準×F
C:標準溶液濃度,4 mmol/L;F:稀釋倍數(shù)。
注意事項:
1、顯色完成后,應(yīng)立即加入試劑四;建議一次性不要做太多樣本,防止試劑四加入不及時導(dǎo)致測定結(jié)果受到影響。
2、如果測定吸光值A(chǔ)>1.0或ΔA>0.8,建議稀釋樣本后再測定,計算公式中乘以稀釋倍數(shù);如果測定吸光值較低或接近空白OD值,建議增加操作表中的樣本量后再進行測定(空白管、標準管、標準空白管需要增加至相同體積量)。
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