直接膽*素（DBIL）含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
可見(jiàn)分光光度法 
貨號(hào)：BC5170
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品內(nèi)容：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

產(chǎn)品說(shuō)明：
直接膽*素（Direct bilirubin，DBil）又稱結(jié)合膽*素，是由間接膽*素進(jìn)入肝后受肝內(nèi)葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶的作用與葡萄糖醛酸結(jié)合生成的。直接膽*素增高對(duì)臨床診斷阻塞性黃疸、肝細(xì)胞性黃疸、肝癌、胰頭癌、膽石癥、膽管癌等有重要意義。直接膽*素能被氧化，生成膽綠素。通過(guò)檢測(cè)450nm下波長(zhǎng)變化，可計(jì)算出直接膽*素的含量。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、超聲波細(xì)胞破碎儀、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）
血清、血漿等液體樣本：直接測(cè)定。若有渾濁可離心后取上清進(jìn)行測(cè)定。
二、測(cè)定步驟

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm，蒸餾水調(diào)零。

2. 按下表步驟加樣（在EP管中加入下列試劑）：

三、DBIL含量計(jì)算

1. 計(jì)算公式

DBIL含量（μmol/L）=1099.7×（ΔA測(cè)定-ΔA空白）-10.73
注意事項(xiàng)：

1. 膽*素見(jiàn)光易分解，測(cè)定時(shí)要盡量避光。

2. 如果ΔA＜0或過(guò)低，建議增加樣本量后再進(jìn)行測(cè)定；如果ΔA＞0.5，建議稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 取非正常小鼠血清按照測(cè)定步驟操作，用1mL玻璃比色皿測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A1測(cè)定-A2測(cè)定=0.236-0.169= 0.067，ΔA空白=A1空白-A2空白=0.006-0.004=0.002，計(jì)算含量得：DBIL（μmol/L）= 1099.7×（ΔA測(cè)定-ΔA空白）-10.73=60.75 μmol/L。

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