目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> BC5175-100T/96S直接膽*素(DBIL)含量檢測試劑盒 微量法
CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
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分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/96S |
貨號 | BC5175 | 應用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
主要用途 | 直接膽*素(DBIL)含量檢測 |
直接膽*素(DBIL)含量檢測試劑盒說明書
微量法
貨號:BC5175
規(guī)格:100T/96S
產(chǎn)品內(nèi)容:使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體25mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體6mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
產(chǎn)品說明:
直接膽*素(Direct bilirubin,DBil)又稱結(jié)合膽*,是由間接膽紅*進入肝后受肝內(nèi)葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶的作用與葡萄糖醛酸結(jié)合生成的。直接膽*素增高對臨床診斷阻塞性黃疸、肝細胞性黃疸、肝癌、胰頭癌、膽石癥、膽管癌等有重要意義。直接膽*素能被亞*鈉氧化,生成膽綠素。通過檢測450nm下波長變化,可計算出直接膽*素的含量。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、低溫離心機、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、冰和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
血清、血漿等液體樣本:直接測定。若溶液渾濁,可以離心后取上清進行測定。
二、測定步驟
1、 分光光度計/酶標儀預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm,分光光度計用蒸餾水調(diào)零。
2、 按下表步驟加樣:(96孔板或者EP管中加入下列試劑)
試劑名稱(μL) | 測定管 | 空白管 |
樣本 | 8 | |
蒸餾水 | 8 | |
試劑一 | 192 | 192 |
充分混勻,置于37℃水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱中孵育5min,測定450nm處吸光度A,分別記為A1測定、A1空白 | ||
試劑二 | 48 | 48 |
充分混勻,置于37℃水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱中準確反應5min,測定450nm處吸光度A,分別記為A2測定、A2空白;計算ΔA測定=A1測定-A2測定;ΔA空白=A1空白-A2空白。空白管只需測1-2次。(使用比色皿反應時,第一步5min反應完成將液體倒入比色皿比色后,可直接在比色皿中加入試劑二混合均勻反應5min直接進行測定;使用96孔板反應時,可以將上述試劑直接加入96孔板中反應第一步的5min,之后直接加入試劑二進行第二步反應) |
三、DBIL含量計算
1、 計算公式
(1)使用96孔板:
DBIL含量(μmol/L)=1495.7×(ΔA測定-ΔA空白)-15.343
(2)使用微量比色皿:
DBIL含量(μmol/L)=1099.7×(ΔA測定-ΔA空白)-10.73
注意事項:
1、膽*素見光易分解,測定時要盡量避光。
2、如果ΔA<0或過低,建議增加樣本量后再進行測定;如果ΔA>0.5,建議稀釋樣本后再進行測定。
實驗實例:
1、 取非正常小鼠血清按照測定步驟操作,用96孔板測得計算ΔA測定=A1測定-A2測定=0.217-0.170=0.047,ΔA空白=A1空白-A2空白=0.044-0.044=0,計算含量得:
DBIL(μmol/L)= 1495.7×(ΔA測定-ΔA空白)-15.343=54.95 μmol/L。
相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC5180/BC5185 總膽*(TBIL)含量檢測試劑盒
直接膽*素(DBIL)含量檢測試劑盒 微量法 直接膽*素(DBIL)含量檢測試劑盒 微量法