山*醇脫氫酶（SDH）活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC2530
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑一：取10 mL試劑五加入1瓶試劑一粉劑中溶解，再加入一支試劑四，現(xiàn)用現(xiàn)配，24 h變質；

2. 標準品：臨用前加入1.4 mL蒸餾水，即10 μmol/mL NADH標準品。-20℃保存4周，避免反復凍融。

產(chǎn)品說明：
SDH（EC 1.1.1.14）催化山*醇脫氫生成果糖，是調控生物體內山*醇含量的關健酶之一。SDH催化山*醇脫氫生成果糖，同時還原NAD⁺生成NADH，生成的NADH能將電子傳遞給NBT生成紫色的甲臜，根據(jù)這一原理可以計算SDH活性。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調式移液器、超聲破碎儀，1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項：
1. ΔA大于0.7時，建議將樣本用提取液稀釋后測量，計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
2.測定過程中樣本和工作液在冰上放置，以免變性和失活。
3.比色皿中反應液的溫度必須保持37℃或25℃，取小燒杯一只裝入一定量的37℃或25℃蒸餾水，將此燒杯放入37℃或25℃水浴鍋中。在反應過程中把比色皿連同反應液放在此燒杯中。
參考文獻：
Aguayo M F, Ampuero D, Mandujano P, et al. Sorbitol dehydrogenase is a cytosolic protein required for sorbitol metabolism in Arabidopsis thaliana[J]. Plant science, 2013, 205: 63-75.
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