海藻糖酶（THL）活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC2510
規(guī)格：50T/24S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前取1支加入1.2mL試劑一，充分溶解待用，用不完的試劑2-8℃保存1周；

2. 標準品：含10mg無水*萄糖（干燥失重<0.2%），臨用前加入1mL蒸餾水溶解，配制成10mg/mL標準液待用，4℃可保存2周，或者用飽和苯甲酸溶液溶解，2-8℃保存4周；

產品說明：
THL（EC3.2.1.28）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中。海藻糖酶主要功能在于生物體分解海藻糖生成葡萄糖而直接用于能量供應
采用3,5－二硝基水楊酸法測定THL催化海藻糖產生的還原糖的含量。還原糖與3,5－二硝基水楊酸共熱生成棕紅色的氨基化合物，在一定范圍內還原糖的量和反應液的顏色深度成正比，由此判斷THL活性的高低。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、超聲破碎儀、低溫離心機、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
相關發(fā)表文獻：

1. YanP,WenC,ZhangS,etal.Atoxicological,metabonomicandtranscriptionalanalysistoinvestigatethepropertyofmulberry1-deoxynojirimycinagainstthegrowthofSamiacynthiaricini[J].Pesticidebiochemistryandphysiology,2018,152:45-54.

2. JingLi,YabingDuan,ChuanhongBian,etal.EffectsofvalidamycinincontrollingFusariumheadblightcausedbyFusariumgraminearum:InhibitionofDONbiosynthesisandinductionofhostresistance.PesticideBiochemistryandPhysiology.January2019;153:152-160.(IF2.87)

3. GoddijnOJM,VerwoerdTC,VoogdE,etal.Inhibitionoftrehalaseactivityenhancestrehaloseaccumulationintransgenicplants[J].Plantphysiology,1997,113(1):181-190.

4. KüenziMT,FiechterA.Changesincarbohydratecompositionandtrehalase-activityduringthebuddingcycleofSaccharomycescerevisiae[J].ArchivfürMikrobiologie,1969,64(4):396-407.

參考文獻：
[1]GoddijnOJM,VerwoerdTC,VoogdE,etal.Inhibitionoftrehalaseactivityenhancestrehaloseaccumulationintransgenicplants[J].Plantphysiology,1997,113(1):181-190.
[2]KüenziMT,FiechterA.Changesincarbohydratecompositionandtrehalase-activityduringthebuddingcycleofSaccharomycescerevisiae[J].ArchivfürMikrobiologie,1969,64(4):396-407.
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