目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> BC0065Na+k+ ——ATP酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
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更新時(shí)間:2024-08-01 15:13:25瀏覽次數(shù):1430評(píng)價(jià)
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CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
---|---|---|---|
分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100管/48樣 |
貨號(hào) | BC0065 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
主要用途 | 硝態(tài)氮是指硝酸鹽中所含有的氮元素,土壤中硝態(tài)氮是高等植物吸收氮的主要形式之一,其 |
Na+ K+-ATP酶活性檢測(cè)試劑盒說明書
微量法
貨號(hào):BC0065
規(guī)格:100T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體4 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三 | 粉劑×2支 | -20℃保存 |
試劑四 | 液體2 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑五 | 液體3mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑六 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑七 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑八 | 液體5 mL×1瓶 | 常溫保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 液體1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
試劑三:臨用前取1支加1 mL蒸餾水溶解,現(xiàn)用現(xiàn)配。用不完的試劑-20℃分裝保存一周。
試劑六:用時(shí)加入5 mL蒸餾水,溶解后2-8℃保存兩周。
試劑七:用時(shí)加入5 mL蒸餾水,溶解后2-8℃保存兩周。
標(biāo)準(zhǔn)品:10 μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)磷貯備液。將標(biāo)準(zhǔn)品20倍稀釋,即取 0.1 mL標(biāo)準(zhǔn)品加1.9 mL蒸餾水充分混勻,配成0.5 μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)磷應(yīng)用液,現(xiàn)用現(xiàn)配。
定磷劑的配制:按H2O:試劑六:試劑七:試劑八=2:1:1:1(體積比)的比例配制,配好的定磷劑應(yīng)為淺黃色。若無色則試劑失效,若是藍(lán)色則為磷污染,定磷劑根據(jù)實(shí)驗(yàn)用量現(xiàn)用現(xiàn)配。
注意:配試劑最好用新的燒杯、玻璃棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。
產(chǎn)品說明:
Na+K+- ATP酶廣泛分布于植物、動(dòng)物、微生物和細(xì)胞中,可催化ATP水解生成ADP和無機(jī)磷。
Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及無機(jī)磷,通過測(cè)定無機(jī)磷的量來確定ATP酶活性。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng):
1、由于每一個(gè)樣都必須做對(duì)照,本試劑盒100管保證測(cè) 48份Na+K+-ATP酶。
2、此法具有微量、靈敏、快速的特點(diǎn)。所以對(duì)測(cè)定所用試管要求嚴(yán)格無磷。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例:
取0.1g小鼠心臟加入1mL試劑一進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清置冰上,之后用96孔板按照測(cè)定步驟操作,測(cè)得計(jì)算A測(cè)定=0.741,A對(duì)照=0.509,A標(biāo)準(zhǔn)=0.280,A空白=0.043,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:
Na+K+-ATP酶活力(U/g 質(zhì)量)=7.5×(A測(cè)定-A對(duì)照)÷(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)÷W=73.42 U/g質(zhì)量。
取0.1g稗草加入1mL試劑一進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清置冰上,之后用96孔板按照測(cè)定步驟操作,測(cè)得計(jì)算A測(cè)定=0.275,A對(duì)照=0.239,A標(biāo)準(zhǔn)=0.280,A空白=0.043,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:
Na+K+-ATP酶活力(U/g質(zhì)量)=7.5×(A測(cè)定-A對(duì)照)÷(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)÷W=11.39 U/g質(zhì)量。
取100μL小鼠血漿檢測(cè),用96孔板測(cè)得A測(cè)定=1.114,A對(duì)照=1.054,A標(biāo)準(zhǔn)=0.280,A空白=0.043,按液體體積計(jì)算酶活得:
Na+K+-ATP酶活力(U/mL)=7.5×(A測(cè)定-A對(duì)照)÷(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)=1.90 U/mL。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn):
Fangzhou Chen,Ying Zhao,Huizhao Chen,et aL. MicroRNA-98 reduces amyLoid β-protein production and improves oxidative stress and mitochondriaL dysfunction through the Notch signaLing pathway via HEY2 in ALzheimer's disease mice. InternationaL JournaL of MoLecuLar Medicine. October 2018;(IF2.928)
[2] Wanxiu Cao,Jing Li,Yaoxian Chin,et aL. Transcriptomic anaLysis reveaLs effects of fucoxanthin on intestinal gLucose transport. JournaL of FunctionaL Foods. October 2018;(IF3.197)
[3] Li M, Jiang C, Zhang Y, et al. Activities of Amphioxus GH-like protein in osmoregulation: insight into origin of vertebrate GH family[J]. International journal of endocrinology, 2017, 2017.
參考文獻(xiàn):
[1] Luo L G, MacLean D B. Effects of thyroid hormone on food intake, hypothalamic Na/K ATPase activity and ATP content[J]. Brain research, 2003, 973(2): 233-239.
[2] Cornelius F. Modulation of Na, K-ATPase and Na-ATPase activity by phospholipids and cholesterol. I. Steady-state kinetics[J]. Biochemistry, 2001, 40(30): 8842-8851.
相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC0960/BC0965 Ca++Mg++-ATP酶活性檢測(cè)試劑盒
BC0300/BC0305 ATP含量檢測(cè)試劑盒
Na+k+ ——ATP酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法 Na+k+ ——ATP酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
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