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目錄:北京索萊寶科技有限公司>>蛋白質研究>>蛋白質提取>> BC3740胞漿蛋白提取試劑盒

胞漿蛋白提取試劑盒
  • 胞漿蛋白提取試劑盒
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
  • 型號 BC3740
  • 廠商性質 生產商
  • 所在地 北京市
屬性

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更新時間:2024-08-01 21:55:28瀏覽次數:1457評價

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供貨周期 現貨 貨號 BC3740
應用領域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),石油 主要用途 胞漿蛋白提取
胞漿蛋白提取試劑盒用于哺乳動物組織和細胞中提取胞質蛋白,試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑,作用較為溫和,可獲得蛋白,可用于免疫印跡實驗等基礎研究實驗,由于含有上述的酶抑制劑,不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品僅用于科研。

胞漿蛋白提取試劑盒

操作方法:

1、組織胞漿蛋白的提取

1) 在 1ml 的冷裂解液中各加入 10ul 的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和 PMSF;混勻,放置在冰上 備用;

2) 稱取 0.1g 的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然 后加入 0.5-1ml 的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;

3) 將組織勻漿液移入 1.5ml 的 EP 管中,4 ℃ 12000g 離心 30min;

4) 吸取上清新的管中;

5) 進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。 (提取好的蛋白建議保存于-80℃,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

2、細胞胞漿蛋白的提取

1) 裂解液的用量:107個細胞需要裂解液 1ml;

2) 貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的 PBS 洗兩次,棄去 PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰 上用細胞刮刀進行刮離細胞,將刮離的細胞裂解液移入 EP 管中,顛倒裂解 20-30min。

3) 懸浮細胞:4℃ 400g 離心收集細胞,用冷的 PBS 洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,渦旋 10s,放置冰上裂解 10min,重復 3-4 次;

4) 裂解完畢之后,將細胞裂解液 4 ℃12000g 離心 30min;

5) 將上清移入新的 EP 管中;進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。 (提取好的蛋白建議保存于-80℃,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:

1. 實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境。

2. PSMF(有毒)現用現加,因為 PMSF 在水溶液中會快速降解。

相關文獻:

《Proanthocyanidins Protect against β-Hydroxybutyrate-Induced Oxidative Damage in Bovine Endometrial Cells》 作者:Xi Cheng,Shuhua Yang,Chuang Xu, Lanzhi Li,Yi Zhang, Yang Guo, Cai Zhang, Peng Li, Miao Long,Jianbin He 期刊:Molecules. 影響因子:3.098 PMID:30678309
《Luteoloside attenuates neuroinflammation in focal cerebral ischemia in rats via regulation of the PPARγ/Nrf2/NF-κB signaling pathway》 作者:Qiaoling Li,Zixia Tian,Minghui Wang,Jiejian Kou,Chunli Wang,Xuli Rong,Jing Li,Xinmei Xie,Xiaobin Pang 期刊:International Immunopharmacology 影響因子:3.361 PMID:30502652
《β?elemene inhibits oxygen?induced retinal neovascularization via promoting miR?27a and reducing VEGF expression》 作者:Weilai Zhang, Lei Chen ,Jin Geng, Limin Liu, Li Xu 期刊:Molecular Medicine Reports 影響因子:1.851 PMID:30664207
 

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