RNA干擾RNAi基因干擾SiRNA實(shí)驗(yàn)服務(wù)
RNA干擾(RNA interfering, RNAI) 現(xiàn)象是指由與靶基因序列同源的雙鏈RNA(DsRNA)引|發(fā)的基因轉(zhuǎn)錄后的沉默過程,小于擾RNA特異性介導(dǎo)相同序列的mRNA降解,阻斷相應(yīng)基因表達(dá)。研謹(jǐn)生物提供的RAN干擾技術(shù)包括化學(xué)合成小RNA片段(SiRNA) 和構(gòu)建載體RNA (SnRNA)兩種形式。實(shí)驗(yàn)委托者只需提供干預(yù)基因名稱或基因序列ID,研謹(jǐn)生物免費(fèi)設(shè)計(jì)合適的干預(yù)位點(diǎn),保證至少有一對(duì)小RNA有效抑制目的基因表達(dá), 抑制效率不低于70%。
RNA干擾(SiRNA實(shí)驗(yàn))流程
第--步確定干擾基因,設(shè)計(jì)并合成合適的小干擾RNA (片段型或載體型小干擾RNA)。
第二步預(yù)轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn),進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),摸索轉(zhuǎn)染條件、時(shí)間并進(jìn)行必要的檢測(cè)(WB、PCR等) , 確定干預(yù)效果zui佳的一對(duì)小RNA。
第三步正式實(shí)驗(yàn),設(shè)置合理實(shí)驗(yàn)分組,進(jìn)行瞬時(shí)或穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。
第四步轉(zhuǎn)染后檢測(cè),根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選擇細(xì)胞生物學(xué)檢測(cè)、蛋白檢測(cè)、分子生物學(xué)檢測(cè)等。以研究小干擾RNA對(duì)于細(xì)胞、蛋白或基因功能的影響。
RNA干擾(SiRNA實(shí)驗(yàn))檢測(cè)(可根據(jù)委托者實(shí)驗(yàn)需求選擇做)
1.細(xì)胞檢測(cè):細(xì)胞增殖毒性MTT.細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期、細(xì)胞遷移、細(xì)胞侵襲;
2.蛋白檢測(cè):免疫印跡WB、免疫細(xì)胞化學(xué)ICC、免疫熒光IF、流式細(xì)胞術(shù)FCM.酶聯(lián)免疫ELSIA;
3.分子生物檢測(cè): RT-PCR. 實(shí)時(shí)熒光定量PCR、甲基化特異性PCR(MSP);
4.其他檢測(cè):生化檢測(cè)、酶類檢測(cè)、脂類檢測(cè)、糖類檢測(cè)。
其他實(shí)驗(yàn)代做服務(wù)
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