蔗糖磷酸化酶(SP)測(cè)試盒

蔗糖磷酸化酶(SP)測(cè)試盒

商品詳情：
測(cè)定意義：

SP(EC2.4.1.7)主要存在于微生物和植物中，裂解葡萄糖苷鍵，催化葡萄糖基轉(zhuǎn)移到果糖、木糖、半乳糖和鼠李糖等，合成相應(yīng)的葡萄糖基低聚糖。此外，SP還能催化合成熊果苷，具有的美白效果，在化妝品工業(yè)中具有重要應(yīng)用。

測(cè)定原理：

SP能夠以磷酸為受體，催化蔗糖產(chǎn)生1-磷酸葡萄糖，在葡萄糖磷酸變位酶催化下變位為6-磷酸葡萄糖，在6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用下還原NADP+生成NADPH，導(dǎo)致340nm光吸收值增加。測(cè)定340nm吸光度增加速率，即可計(jì)算SP活性。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：

天平、低溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
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1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來(lái)水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

3.血清等液體：直接檢測(cè)。

計(jì)算公式如下：

1、血清（漿）LAP活力的計(jì)算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬(wàn)。

肌糖εELISA試劑盒 SGCε免費(fèi)代測(cè)試劑

肌糖δELISA試劑盒 SGCδ免費(fèi)代測(cè)試劑

肌糖γELISA試劑盒 SGCγ免費(fèi)代測(cè)試劑

肌糖βELISA試劑盒 SGCβ免費(fèi)代測(cè)試劑

肌糖αELISA試劑盒 SGCα免費(fèi)代測(cè)試劑

肌肽酶2ELISA試劑盒 CNDP2免費(fèi)代測(cè)試劑

肌肽酶1ELISA試劑盒 CNDP1免費(fèi)代測(cè)試劑

肌轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ELISA試劑盒 CRT免費(fèi)代測(cè)試劑

肌收縮蛋白ELISA試劑盒 MYOT免費(fèi)代測(cè)試劑

肌神經(jīng)蛋白ELISA試劑盒 MYNN免費(fèi)代測(cè)試劑

肌球蛋白重鏈9ELISA試劑盒 MYH9免費(fèi)代測(cè)試劑

肌球蛋白重鏈7BELISA試劑盒 MYH7B免費(fèi)代測(cè)試劑

肌球蛋白重鏈11ELISA試劑盒 MYH11免費(fèi)代測(cè)試劑

肌球蛋白重鏈10ELISA試劑盒 MYH10免費(fèi)代測(cè)試劑

肌球蛋白輕鏈9ELISA試劑盒 MYL9免費(fèi)代測(cè)試劑
蔗糖磷酸化酶(SP)測(cè)試盒硫氧還蛋白過(guò)氧化物酶(TPX)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣

硫氧還蛋白過(guò)氧化物酶(TPX)測(cè)試盒/微量法100T/96S

硫氧還蛋白氧化還原酶(TrxR)測(cè)試盒/比色法50T/48樣

硫氧還蛋白氧化還原酶(TrxR)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣

硫氧還蛋白氧化還原酶(TrxR)測(cè)試盒/微量法100T/96S

濾紙酶測(cè)試盒/分光光度法50管/24樣

濾紙酶測(cè)試盒/微量法100T/48S

麥芽糖含量測(cè)試盒/分光光度法50管/24樣

麥芽糖含量測(cè)試盒/微量法100管/48樣
注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果測(cè)定的吸光值過(guò)高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰，因此，570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4．檢出限為100μmol/L。