磷脂酶A2(PLA2)測試盒
【簡單介紹】
品牌 | 其他品牌 | 貨號 | YSH3355 |
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規(guī)格 | 100管/48樣、50管/24樣 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
【詳細(xì)說明】
磷脂酶A2(PLA2)測試盒
商品詳情:
測定意義
磷脂酶A2(EC3.1.1.4)是磷脂sn-2位脂酰基水解酶,廣泛存在于動植物組織、細(xì)菌、細(xì)胞核分泌物中,參與脂肪消化,精子成熟、細(xì)胞信號傳遞、脂質(zhì)過氧化修復(fù)、宿主反應(yīng)等生理過程,在控制體內(nèi)磷脂類物質(zhì)平衡、調(diào)節(jié)機(jī)體新陳代謝、參與疾病的病理進(jìn)程等方面發(fā)揮著及其重要的作用。
貨號 | 規(guī)格 | 檢測方法 |
YSH3355 | 100管/48樣 | 微量法 |
YSH3355-1 | 50管/24樣 | 可見分光光度法 |
測定原理
磷脂酶A2作用于2-硫代十六酰乙基磷酸膽(HEPC)產(chǎn)生游離巰基,與DTNB反應(yīng)生成黃色物質(zhì),在412nm處有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器
天平、超速冷凍離心機(jī)、研缽、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿。
樣品中AA提?。?/span>
1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測。
2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3.血清等液體:直接檢測。
計算公式如下:
1、血清(漿)LAP活力的計算:
單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算:
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算:
單位的定義:每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬。
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總(TC)比色法檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
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游離(FC)比色法檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
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注意事項:
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。
2. 為保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個樣做預(yù)實驗,如果測定的吸光值過高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測定。
3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。
4.檢出限為100μmol/L。
請輸入產(chǎn)品關(guān)鍵字:
郵編:200000
聯(lián)系人:王小姐
電話:021-59989018
傳真:
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