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HPLC基線漂移的影響因素

時(shí)間:2022/4/6閱讀:900
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1.柱溫的影響


柱溫的影響對于部分檢測器,尤其是示差折光檢測器或者高靈敏度的紫外檢測器,對于柱溫模塊的影響,通常導(dǎo)致的是基線有規(guī)律的上升和下降;處理方法中有一條,在進(jìn)入檢測器前加上換熱器,不過換熱器是個(gè)什么東東,貌似并沒有用過。

2. 流動相不均勻 這個(gè)原因?qū)е碌幕€漂移通常是不規(guī)則的,與前一條柱溫的影響不同,流動相的污染或者不均勻會導(dǎo)致基線的升高,采用HPLC級別的溶劑或者高純度的鹽或添加劑,并對流動相進(jìn)行脫氣可以解決流動相不均勻?qū)е碌幕€漂移問題。

3. 檢測器流通池污染或有氣泡
檢測器流通池的污染之前好像提到過,今天重點(diǎn)說一下解決的方法,采用極性強(qiáng)的溶劑(比如甲醇)對檢測池進(jìn)行沖洗,如有必要,用1N濃度的稀硝酸進(jìn)行沖洗,特別需要提示的是,采用稀硝酸進(jìn)行沖洗的時(shí)候不要接PEEK接頭,也不要采用鹽酸進(jìn)行沖洗;

4. 檢測器出口管線擰得過緊,這會導(dǎo)致檢測池的背壓太高,導(dǎo)致檢測池可能產(chǎn)生裂紋,從而導(dǎo)致基線的升高,如果檢測池真的損壞了,只能考慮對檢測池進(jìn)行更換了;

5. 流動相混合的問題或流速的變化
流動相混合的問題及流速問題是在這幾天的分享中常見的問題了,解決方法之前也提到過,在遇到問題的時(shí)候需要特別注意輸液泵的工作狀態(tài);

6. 色譜柱平衡不充分,尤其是更換流動相的時(shí)候
對此指南給出的解決方法是采用中極性強(qiáng)度的溶液,在分析前對色譜柱進(jìn)行沖洗,沖洗的體積通常需要達(dá)到10-20倍的色譜柱體積

7. 流動相的污染,尤其是沒有采取高純度的試劑

8. 樣品物質(zhì)的強(qiáng)保留屬性,導(dǎo)致峰的嚴(yán)重展寬,從而表現(xiàn)為基線的抬升
注意這里的表述,表現(xiàn)為基線的抬升,實(shí)際上是被測組份的強(qiáng)保留,這里的基線漂移實(shí)際上是檢測組分的緩慢洗脫。

9. 檢測器設(shè)置錯(cuò)誤,這種錯(cuò)誤應(yīng)該不常見,有興趣有朋友可以自行查閱原文。




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