為什么要進行色譜柱平衡

一、為什么需要進行柱平衡？

· 置換色譜柱內(nèi)儲存的溶劑

· 在流動相和固定相之間建立平衡

· 濕潤固定相以實現(xiàn)分析物的分配

· 產(chǎn)生可靠的結(jié)果。

二、色譜柱沒有平衡好會產(chǎn)生何種影響？

·基線波動

·保留時間變化

·峰形變形

·分離度變差

·響應(yīng)異常

·產(chǎn)生鬼峰。

三、哪些因素影響色譜柱平衡？

- 固定相性質(zhì)：具有龐大基團或空間位阻的固定相（例如苯基柱）可能需要更長的柱平衡時間。

- 表面積：具有較低表面積的固定相有利于更快的柱平衡。

- 孔徑大小：具有較寬孔徑（因此表面積較低）的固定相有利于更快的柱平衡。

-流動相組成：具有較高濃度的緩沖鹽和離子對試劑的流動相需要更長的平衡時間。

-水相的比例：如果流動相中的水相含量較高，柱平衡時間可能較長。

-柱溫：較高的柱溫會加速柱平衡，因為分子運動加快（黏度降低）。

-梯度洗脫中的緩沖鹽濃度：通過在兩個流動相瓶中加入緩沖鹽溶液，以保持洗脫過程中緩沖鹽濃度的穩(wěn)定，有助于加快洗脫過程中的柱平衡速度。

注意：在平衡過程的開始階段應(yīng)避免使用緩沖鹽：有機相，而是使用比例相符的水：有機溶劑，然后再使用初始流動相平衡。