液相色譜系統(tǒng)的維護(hù)和保養(yǎng)方法: 一、液相色譜系統(tǒng)的流動相 保持貯液瓶清潔,定期清洗或更換;盡量使用HPLC級溶劑和試劑;含有緩沖鹽和非HPLC級的流動相一定要過濾;含有緩沖鹽的流動相應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配,防止微生物生長和組分改變。 1、更換流動相注意事項(xiàng): 液相色譜常用的流動相包括多種有機(jī)溶劑、水、各種緩沖溶液等,它們之間存在互溶性的問題,同時(shí)也存在緩沖溶液鹽析出的問題。 2、更換互溶性流動相將新流動相置于儲液瓶中: a. 打開放空閥,啟動泵使新的流動相從放空閥出口流出20mL左右。 b. 關(guān)閉放空閥,然后將進(jìn)樣閥與色譜柱相連接端卸開,用小容器放置于進(jìn)樣閥的出口處。 c. 啟動恒流泵,讓流動相從進(jìn)樣閥出口流出10mL左右。 d. 重新連接色譜柱,設(shè)定適當(dāng)流速,當(dāng)流動相流出約30倍于色譜柱體積,并且檢測器基線平衡后,流動相更換完畢。 3、更換非互溶性流動相: a. 用中介溶劑更換泵中的舊流動相(不要接色譜柱)。 b. 如果色譜柱中流動相也需要更換,用該溶劑沖洗色譜柱。 c. 用新流動相更換中介溶劑。 4、更換緩沖液流動相: a. 用5%~20%甲醇水更換色譜系統(tǒng)中緩沖液(包括色譜柱) 。(非常重要) b. 用新流動相更換過渡溶劑。 c. 由于一般緩沖液遇到甲醇、異丙醇等高含量有機(jī)溶劑混合液時(shí)容易將緩沖液中的鹽結(jié)晶出來,而結(jié)晶鹽對密封圈、柱塞桿以及進(jìn)樣閥內(nèi)部轉(zhuǎn)子和定子都有很大的損壞,也容易阻塞輸液管路,因此要特別仔細(xì)操作。 d. 用緩沖液作流動相或一段時(shí)間不使用泵,照以上步驟更換溶劑,然后用純甲醇或乙腈沖洗。 二、泵頭 泵的密封圈是泵較容易磨損的部件 1、泵的密封圈的維護(hù)保養(yǎng): 每天要把泵中的緩沖液沖洗干凈,防止鹽沉積;用HPLC級試劑;用燒結(jié)不銹鋼吸液過濾頭; 2、進(jìn)樣閥 較易磨損:轉(zhuǎn)子密封 3、保養(yǎng)事項(xiàng): a、樣品進(jìn)樣前要過濾; b、停機(jī)后要用溶劑沖洗干凈進(jìn)樣器內(nèi)殘留樣品和緩沖鹽; c、不要用氣相色譜用的尖頭針進(jìn)樣。 4. 檢測器 保持檢測器清潔,每天與色譜柱一同清洗; 用脫過氣的流動相,防止空氣卡在檢測池內(nèi); 檢測器燈有一定壽命,不用時(shí)不要打開燈。但也不能夠經(jīng)常開關(guān)燈。
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