染色架廠家解析微生物的染色技術(shù)
閱讀:414 發(fā)布時(shí)間:2018-9-25
染色架廠家解析微生物的染色技術(shù)
細(xì)菌可經(jīng)結(jié)晶紫初染染成藍(lán)色。革蘭氏染色陽(yáng)性菌(G+)細(xì)胞壁肽聚糖層數(shù)多,且肽聚糖為空間網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),再經(jīng)乙醇脫水,網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)更為致密,染料復(fù)合物不易從細(xì)胞內(nèi)漏出,仍為藍(lán)色。而革蘭氏染色陰性菌(G-)細(xì)胞壁脂類含量多,肽聚糖層數(shù)少,且肽聚糖為平面片層結(jié)構(gòu),易被乙醇溶解,使細(xì)胞壁通透性增高,結(jié)合的染料復(fù)合物容易泄漏,細(xì)菌被脫色為無(wú)色,再經(jīng)石炭酸復(fù)紅稀釋液復(fù)染成紅色。
染色架廠家分析可按涂片-干燥-固定-染色-鏡檢的順序進(jìn)行。
準(zhǔn)備載物玻片:用鑷子從載物片缸中取出經(jīng)3%鹽酸酒精脫脂的載物玻片,用擦片布擦凈,然后用特種鉛筆在玻片背面畫一個(gè)直徑為1.5-2.0cm的圓圈,做為涂膜的標(biāo)記范圍。
1.涂片:按無(wú)菌操作取材法進(jìn)行。
2.干燥:放空氣中自然干燥。如欲加速,也可把涂片置于火焰上部的熱氣層中烘烤,但切勿將涂膜烤焦。
3.固定:用染色夾子夾住涂片,在火焰的熱部分連續(xù)通過(guò)三次,以固定之。此時(shí)殺死大部分細(xì)菌,并使標(biāo)本固定于玻片上,以免在染色或水洗過(guò)程中被沖掉。
4.染色:
?、賹⒔Y(jié)晶紫染液加于涂膜上,染色(初染)1-2min。
②水洗后加蘆戈氏碘液處理(媒染)2-3min。
?、鬯春笥?5%酒精脫色,脫色時(shí)頻頻搖動(dòng)玻片,直至流下的液體無(wú)色為止(約需0.5min)。
④水洗后加石炭酸復(fù)紅稀釋液染色(復(fù)染)0.5min。
⑤水洗,用濾紙輕輕吸干,待標(biāo)本充分干燥后進(jìn)行鏡檢。染色過(guò)程中,水洗要用自來(lái)水的細(xì)流徐徐沖洗,沖洗涂膜的背面,勿使強(qiáng)水流直接沖到涂膜上。