shRNA表達(dá)克隆 返回列表頁

OmicsLink™ shRNA表達(dá)克隆的特性
所有shRNA靶點(diǎn)序列的選取均經(jīng)過準(zhǔn)確算法計算。根據(jù)基因的不同， shRNA其莖的長度在19到29堿基對之間。這些保證shRNA克隆表達(dá)后有很高的表達(dá)抑制效率和zui低的脫靶效應(yīng)（off target effect）。
克隆shRNA 所采用的載體有慢病毒載體和以哺乳動物細(xì)胞為宿主的載體，各類載體擁有不同的啟動子和跟蹤標(biāo)記基因可供選擇。
載體中所帶有的綠色熒光跟蹤標(biāo)記基因（ eGFP ）可以用于監(jiān)測質(zhì)粒載體的轉(zhuǎn)染效率和轉(zhuǎn)導(dǎo)病毒的感染效率。
載體結(jié)構(gòu)上帶有穩(wěn)定細(xì)胞株的篩選標(biāo)記（嘌呤霉素）和綠色熒光跟蹤標(biāo)記基因（EGFP ），這些特性使得該載體既能用于穩(wěn)定抑制效應(yīng)的研究，也可用于瞬時抑制效應(yīng)的研究。
使用慢病毒載體系統(tǒng)，可轉(zhuǎn)導(dǎo)shRNA進(jìn)入常規(guī)的分裂細(xì)胞，以及不分裂而難以轉(zhuǎn)染的目的細(xì)胞株。
載體的各部分序列已經(jīng)過測序，包括啟動子、編碼shRNA的正義和反義鏈、發(fā)夾結(jié)構(gòu)、終止子和其他接頭序列。

OmicsLink™ 的應(yīng)用
基因表達(dá)下調(diào) shRNA克隆對單個基因的基因表達(dá)抑制效應(yīng)可以通過和一個包含不規(guī)則序列的陰性對照克隆來比較研究。
信號通路研究 我公司的人類基因ORF克隆按照不同的信號傳導(dǎo)、代謝、疾病通路和相關(guān)性、基因家族等進(jìn)行了分類。將已知同一通路的shRNA克隆以96孔或384孔板的形式排列在一起，可一次研究一組基因在某一信號通路中的功能。目前我公司已可提供針對人類全部激酶基因的shRNA克隆，并已按照按不同激酶的功能進(jìn)行了分類。
ORF表達(dá)克隆確證 我公司已有shRNA相應(yīng)人類靶基因的ORF克隆，可裝在各種表達(dá)載體中，帶有不同的標(biāo)簽和跟蹤標(biāo)記基因。這些正常的ORF表達(dá)克隆和在shRNA靶序列帶有沉默突變的同樣的ORF表達(dá)克隆，可以用于shRNA確認(rèn)研究和基因功能拯救研究。

產(chǎn)品保證

的表達(dá)框已經(jīng)全長測序，包括啟動子、正義和反義靶序列、發(fā)夾結(jié)構(gòu)、終止信號及其他接頭序列。 對于構(gòu)建到psi-sH1載體中的人類激酶組shRNA克隆，我們每個基因提供1~3個克隆，所有克隆均已通過AP色度法確證其對靶基因的表達(dá)抑制水平達(dá)到70％以上。對于構(gòu)建到慢病毒和哺乳動物載體的shRNA克隆，我們每個基因提供4個克隆。我們保證至少有1個克隆達(dá)到在mRNA水平對靶基因的表達(dá)抑制水平達(dá)到70%以上，前提是用前面所提的檢測方法，并嚴(yán)格按照說明書所提供的操作流程和注意事項(xiàng)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。如果經(jīng)過我公司核實(shí)，的確4個中沒有1個有所期望的表達(dá)抑制水平的話，我公司承諾免費(fèi)更換1-4個shRNA克隆。


* 本產(chǎn)品僅供研究、不用于臨床診斷