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南京大學(xué)團隊實現(xiàn)單個活細胞內(nèi)低拷貝數(shù)蛋白質(zhì)的分析 | 前沿用戶報道
供稿：溫艷蓉
成果簡介
2021年6月，南京大學(xué)劉震教授團隊在Nature子刊Nature Protocols上發(fā)表了題為 “Probing low-copy-number proteins in single living cells using single-cell plasmonic immunosandwich assays"的論文，創(chuàng)新性地發(fā)展了單細胞等離激元免疫夾心法，成功實現(xiàn)了單個活細胞及活體動物內(nèi)多種低拷貝數(shù)蛋白質(zhì)的分析。
背景介紹
圖文導(dǎo)讀
1.將固定有親和配基的金基微萃取探針在顯微操作系統(tǒng)的控制下，準(zhǔn)確地插入單個活細胞內(nèi)特定部位進行目標(biāo)蛋白的富集。
2.萃取一定的時間后將微萃取探針從細胞內(nèi)拔出，經(jīng)過適當(dāng)?shù)那逑床襟E降低微萃取探針表面的非特異性吸附，再用親和配基功能化的銀基納米拉曼標(biāo)簽對富集到的目標(biāo)蛋白質(zhì)進行標(biāo)記，從而在微萃取探針表面形成類似三明治夾心結(jié)構(gòu)的微萃取探針-目標(biāo)蛋白質(zhì)-納米拉曼標(biāo)簽免疫復(fù)合物。
圖1. 單細胞等離激元免疫夾心法的工作示意圖
圖2. 拉曼光譜采集與分析
HORIBA XploRA INV多功能拉曼成像光譜儀集成研究級倒置顯微鏡，專為生命科學(xué)研究而設(shè)計。不僅具備通常的拉曼光譜測量功能，而且可以實現(xiàn)超快速拉曼光譜成像、熒光成像、超快速PL光譜成像等。
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文獻信息
Probing low-copy-number proteins in single living cells using single-cell plasmonic immunosandwich assays
文章署名作者：
Jia Liu, Hui He, Dan Xie, Yanrong Wen, Zhen Liu
劉震教授簡介
南京大學(xué)特聘教授，博士生導(dǎo)師，國家杰出青年基金獲得者。英國皇家化學(xué)會會士、中國化學(xué)會高級會員、美國化學(xué)會會員，兼任國際分子印跡學(xué)會理事會理事、中國質(zhì)譜學(xué)會常務(wù)理事、中國化學(xué)會質(zhì)譜專業(yè)委員會委員、中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)會蛋白質(zhì)組學(xué)專業(yè)委員會委員、《Analytica Methods》副主編、《Electrophoresis》、《Separation Science Plus》等雜志編委。主要從事分子識別、親和分離、疾病診斷、單細胞分析和癌癥納米治療等研究，主持國家重大科研儀器項目和基金委重點項目等國家級科研項目10余項，已在Chemical Society Review，Accounts of Chemical Research，Angewandte Chemie International Edition，Nature Protocols，Chemical Science等期刊上發(fā)表論文150余篇，目前h因子49（谷歌學(xué)術(shù)），主編及合著著作2部，出版專章7章，獲授權(quán)專利15項。