堿性磷酸酶放大系統(tǒng)

1.堿性磷酸酶放大系統(tǒng)

堿性磷酸酶廣大系統(tǒng)包含多種放大機(jī)制:堿性磷酸酶不直接催化底物生成有色產(chǎn)物而是催化生成輔酶I（NAD+）,輔酶I激活下一輪氧化還原反應(yīng),輔酶I啟動的反應(yīng)為底物的顏色化學(xué)轉(zhuǎn)變提供條件.在供氫體的作用下,底物氧化/還原發(fā)生顏色變化.

2.微粒放大系統(tǒng)

每個適當(dāng)?shù)奈⒘１砻婵梢酝瑫r結(jié)合（或吸附）大量的標(biāo)記酶和抗體分子.在包含微粒放大系統(tǒng)的夾心ELISA法中,微粒通過結(jié)合于其上的第二抗體結(jié)合于*抗體.同時微粒上又結(jié)合著標(biāo)記酶,其數(shù)量大大多于第二抗體能結(jié)合的標(biāo)記酶,從而得以放大.

3.催化的顯示劑沉積

催化的顯示劑沉積（Catalyzed reporter deposition,簡稱CARD）.CARD依次使用三套顯示劑:*套顯示劑是聯(lián)在抗體上的HRP,它通過抗體與待測抗原的反應(yīng)結(jié)合于固相表面;第二套顯示劑是標(biāo)有生物素的苯酚,它受到*顯示劑的氧化催化后沉積于固相表面;第三套顯示劑是標(biāo)在鏈霉親和素（Streptavidin）上的AP,可被固相上的生物素捕獲,放大效果非常大.