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生研診斷血清,生研副溶血血清,日本生研血清,志賀氏血清,軍團(tuán)菌診斷血清

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酶聯(lián)免疫法磺胺多殘留試劑盒使用說明

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  • 廣州健侖生物科技有限公司
  • 2018-08-22 11:26:52
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【簡單介紹】

品牌 其他品牌 規(guī)格 96t/盒
供貨周期 現(xiàn)貨 主要用途 檢測組織、血清、蜂蜜、牛奶、尿液、雞蛋等樣本中的磺胺類藥物(Sulfonamid
酶聯(lián)免疫法磺胺多殘留試劑盒使用說明;本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測組織、血清、蜂蜜、牛奶、尿液、雞蛋等樣本中的磺胺類藥物(Sulfonamides,SAs),試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。

【詳細(xì)說明】

QQ③?①②⑧①⑧⑥⑥② 洪小姐 致電:①③⑧?②⑤②⑤②⑦⑧ 楊永漢

廣州健侖生物同時(shí)核心代理Panbio、FOCUS、Qiagen、IBL、CORTEZ、Fuller、INOVA、Inbios、BixNOW、LumuQuick、日本富士等集團(tuán)品牌長期為廣大疾控預(yù)防中心、檢疫檢驗(yàn)局、國際旅行、商檢單位提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品

酶聯(lián)免疫法磺胺多殘留試劑盒使用說明

廣州健侖生物科技有限公司

 

酶聯(lián)免疫法磺胺多殘留試劑盒使用說明(檢測樣本步驟)

組織樣本(低檢測限)處理方法

1)稱2.0±0.05g 均質(zhì)組織樣本于離心管中;加入8ml 0.02M PB緩沖液,震蕩2min,4000r/min以上離心10min;

2)取50µl液體用于分析。

 樣本稀釋倍數(shù): 5  檢測下限:2.5ppb  

血清樣本處理方法

1)將血樣本于室溫放置30min,于4000r/min以上離心10min,分離出血清或過濾血清;

2)取1ml血清,加入3ml 0.02 M PB緩沖液混合,混合30s;

3)取50µl用于分析。  

 樣本稀釋倍數(shù):4  檢測下限:2ppb  

 蜂蜜樣本處理方法

1)稱取1±0.05g蜂蜜樣本于50ml離心管中,加入1ml 0.5M鹽酸置于37℃環(huán)境中30min;

2)加入2.5ml 0.2M 氫氧化鈉 (將PH值調(diào)至5左右)再加入4ml乙酸乙脂振蕩5min,4000r/min以上室溫離心10min;

3)取2ml上層液體于50-60℃下氮?dú)獯蹈?,?.5ml 已稀釋好的復(fù)溶液復(fù)溶,混合30s;

4)取50µl用于分析。  

樣本稀釋倍數(shù):1  檢測下限:0.5ppb

尿樣本處理方法

1)用3ml 0.02 M PB緩沖液與1ml經(jīng)離心后的清亮尿樣本混合,混合30s;

2)取50µl液體用于分析。  

樣本稀釋倍數(shù): 4  檢測下限:2ppb 

5.3.6牛奶樣本處理方法

1)將牛奶樣本用0.02 M PB緩沖液20倍稀釋(如20µl牛奶+380µl 0.02  M PB緩沖液),混合30s;

2)取50µl用于分析。

樣本稀釋倍數(shù):20  檢測下限:10ppb   

水樣處理方法

1)取水樣200ul加入200ul 2X復(fù)溶液,混合30s;

2)取50µl用于分析。

樣本稀釋倍數(shù):2  檢測下限:1ppb   

雞蛋樣本處理方法

1)用均質(zhì)器均質(zhì)雞蛋樣本,使蛋清和蛋黃充分混合;

2)稱取2.0±0.05g均質(zhì)后的雞蛋樣本(蛋粉1g加3ml去離子水混勻后取2ml相當(dāng)于2g鮮雞蛋)至50ml離心管中,加入8ml乙腈,立即用振蕩器振蕩10min,室溫4000r/min以上離心5min;

3)移取1ml上清液至10ml潔凈干燥玻璃試管中于,在50-60℃氮?dú)饣蚩諝獯蹈桑?/span>

4)加入1ml正己烷,用渦旋儀渦動30s溶解干燥的殘留物,再加入1ml復(fù)溶工作液,用渦旋儀渦動1min,室溫4000r/min以上離心5min;

5)去上層有機(jī)相,取下層水相50ul用于分析。

樣本稀釋倍數(shù): 4  檢測下限:2ppb

酶聯(lián)免疫試驗(yàn)步驟

 將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出,置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時(shí)可能會有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解,每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。

6.1 編    號:將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號,每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。

6.2 加樣反應(yīng):加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50µl/孔到各自的微孔中,然后加酶標(biāo)記物50µl/孔,再加入50µl/孔的抗體工作液,用蓋板膜封板,輕輕振蕩5秒混勻,25℃反應(yīng)45分鐘。

6.3 洗    滌:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用工作洗滌液250µl/孔充分洗滌5次,每次間隔30秒,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。

6.4 顯    色:每孔加入底物液A 50µl,再加底物液B 50µl,輕輕振蕩5秒混勻,25℃避光顯色15分鐘若藍(lán)色過淺,可適當(dāng)延長反應(yīng)時(shí)間)。

6.5 終    止:每孔加入終止液50µl,輕輕振蕩混勻,終止反應(yīng)。

6.6 測吸光值:用酶標(biāo)儀于450nm處測定每孔吸光度值(建議用雙波長450/630nm)。測定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成。

結(jié)果分析

7.1 百分吸光率的計(jì)算

    標(biāo)準(zhǔn)液或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)液或樣本的百分吸光度值的平均值(雙孔)除以*個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液(0ppb)的吸光度值,再乘以100%,即

 百分吸光度值(%)=

A

×100%

A0

A—標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值

A0—0ppb標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值

7.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計(jì)算

以標(biāo)準(zhǔn)液百分吸光率為縱坐標(biāo),對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)液濃度(ppb)的對數(shù)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)液的半對數(shù)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對應(yīng)的濃度,乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中待測物的實(shí)際濃度。 若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計(jì)算,更便于大量樣本的準(zhǔn)確、快速分析。

注意事項(xiàng)

8.1 室溫低于25℃或試劑及樣本沒有回到室溫(25℃)會導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。

8.2 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。

8.3 混合要均勻,洗板要*,在ELISA分析中的再現(xiàn)性,很大程度上取決于洗板的*性。

8.4 在所有孵育過程中,用蓋板膜封住微孔板,避免光線照射。

8.5 不要使用過了有效期的試劑盒,不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。

8.6 顯色液若有任何顏色表明變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值小于0.5個(gè)單位(A450nm< 0.5 )時(shí),表示試劑可能變質(zhì)。

8.7 反應(yīng)終止液有腐蝕性,避免接觸皮膚。

 

    
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