食品基因組DNA提取試劑盒
【簡單介紹】
品牌 | Qiagen/凱杰 | 供貨周期 | 一周 |
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英文名稱:DNeasy mericon Food Kit
中文名稱:食品基因組DNA提取試劑盒
從富集微生物的培養(yǎng)基、食物原材料或成品中提取高品質(zhì)DNA
改良了CTAB方法,可更快的處理樣本
從食物成品中高效的純化DNA片段
快速、高效的裂解革蘭氏陰性和陽性細菌
處理復雜食物樣本時不會殘留PCR抑制劑
【詳細說明】
食品基因組DNA提取試劑盒
食品基因組DNA提取試劑盒mericon Sample Preparation Kits適用于從多種初始材料中提純高品質(zhì)核酸,如經(jīng)富集的培養(yǎng)基(mericon DNA Bacteria和 Bacteria Plus Kits)及多種食物原材料與成品(DNeasy mericon Food Kit)等。這些復雜食物樣本的純化產(chǎn)物中所含PCR抑制劑的水平達到最低。純化獲得的DNA適用于各種下游應用,如應用mericon PCR Assays Kits進行real-time PCR成分鑒定、病原體檢測;或GMO DNA定量檢測。
特點 | 參數(shù) |
應用 | PCR, real-time, genotyping |
洗脫體積 | 100 µl (mericon DNA Bacteria and DNA Bacteria Plus Kit), 150 µl (DNeasy mericon Food Kit) |
規(guī)格 | spin columns (DNeasy mericon food Kit), microcentrifuge tube (DNA Bacteria Kit), icrocentrifuge tube with glass beads (DNA Bacteria Plus Kit) |
主要樣本類型 | fod, e.g. chocolate, ketchup, cereals (DNeasy mericon Food Kit), bacterial culture from food (DNA Bacteria Kit and DNA Bacteria Plus Kt) |
處理 | manual |
純化總RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 | DNA |
樣本量 | 1 ml culture (DNA Bacteria and Bacteria Plus Kit), 2 g (DNeasy mericon Food Kit) |
技術 | silica technology (DNeasy mericon food Kit), boiling lysis (DNA Bacteria Kit), disruption with glass beads (DNA Bacteria Plus Kit) |
每次運行或制備時間 | 20 minutes - 1 hour (DNeasy mericon Food Kit) |
產(chǎn)量 | depends on DNA contents of the sample |
性能
DNeasy mericon Food Kit
生產(chǎn)過程中,食物容易受到熱、高壓和pH值變化的影響,這些會導致DNA降解和片段化。DNeasy mericon Food Kit中的優(yōu)化試劑專為回收短的DNA片段(100 bp)而設計,確保高度片段化的DNA可被有效分離,并在PCR反應中進行擴增。憑借這些優(yōu)勢,DNeasy mericon Food Kit是*個可廣泛應用于從強抑制性、多脂、酸性、有很高或很低DNA含量的加工食物中純化核酸的試劑盒,結果可靠,而且可得到純化效果(參見High yields of DNA with minimal inhibitor carryover)。
mericon DNA Bacteria和DNA Bacteria Plus Kits
熱裂解操作需使用mericon DNA Bacteria Kit,機械裂解需使用mericon DNA Bacteria Plus Kit,兩種試劑盒從革蘭氏陰性細菌中提取DNA的效率相同。但是,如果從革蘭氏陽性細菌中提取DNA,機械裂解更加有效(參見Efficient bacterial DNA extraction)。
原理
DNeasy mericon Food Kit
該試劑盒采用改良的CTAB純化細胞內(nèi)核酸。CTAB是非離子去污劑,廣泛用于從多種類型的組織樣本中高效提純細胞內(nèi)核酸。與鹽濃度相關,CTAB可能與細胞內(nèi)核酸結合(低鹽濃度);也可與細胞內(nèi)的抑制劑結合,如多糖、蛋白質(zhì)和植物代謝產(chǎn)物(高鹽濃度,如在Food Lysis Buffer中)。
這種提純方法的步驟少于傳統(tǒng)CTAB 操作方法,應用DNeasy mericon Food Kit可在2.5個小時內(nèi)可處理多達30個樣本(參見Efficient and rapid DNA extraction)。
經(jīng)優(yōu)化的方案,采用CTAB和蛋白酶K初步消化緊密組織,然后同時沉淀蛋白質(zhì)和其他細胞內(nèi)和來自于食品本身的抑制劑。
離心后抑制劑沉淀下來,而提純的DNA保留在溶液中。然后進行l(wèi)v仿抽提,所有剩余的、未沉淀CTAB結合蛋白、CTAB結合雜質(zhì)或 CTAB 結合多糖都將與其他脂溶性抑制劑一起被抽提入lv仿層。水層中含有DNA和極少的抑制劑,將進一步處理。在水相中加入結合緩沖液(調(diào)節(jié)結合條件),將其上樣到QIAquick Spin Column。純化后得到的DNA可即用于下游的mericon real-time PCR分析。
mericon DNA Bacteria Kit和mericon DNA Bacteria Plus Kit
到目前為止,檢測食品病原體的主要方法是通過培養(yǎng)基和/或ELISA分析法。分子檢測方法,尤其是real-time PCR,經(jīng)常作為這些常用方法的補充。
熱裂解使用mericon DNA Bacteria Kit,適用于多數(shù)易于裂解的革蘭氏陰性細菌(如沙門氏菌Salmonella spp.、彎曲桿菌Campylobacter spp. 和阪崎氏腸桿菌Cronobacter spp.)。機械裂解需使用mericon DNA Bacteria Plus Kit,適用于革蘭氏陽性細菌,如單增李斯特菌Listeria spp.。
mericon DNA Bacteria Kit和mericon DNA Bacteria Plus Kit中的化學試劑可較高程度上提高裂解效率,穩(wěn)定提純的DNA,并去除可能干擾下游應用的抑制劑。
操作流程
DNeasy mericon Food Kit
使用簡單的操作方法,從勻質(zhì)的食物樣本中提純DNA,獲得的純DNA適用于各種下游應用,如real-time PCR成份分析或GMO檢測。
mericon DNA Bacteria Kit和mericon DNA Bacteria Plus Kit
使用機械裂解(鋼珠)和熱裂解(煮)的操作方法,從病原體富集的培養(yǎng)基中提純細菌DNA。兩種操作方法都需轉(zhuǎn)移細菌 DNA懸浮液,以適用于real-time PCR病原體檢測。
應用
應用DNeasy mericon Food Kit從食物原材料或成品中純化的DNA適用于各種下游應用,如成份鑒定。
mericon Bacteria和Bacteria Plus Kits用于從經(jīng)過增菌富集培養(yǎng)基中純化細菌DNA。
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