上海巴玖講解7500熒光定量PCR儀常見問題

打怪升級(jí)的不敗經(jīng)驗(yàn)在于“儲(chǔ)備”，儲(chǔ)備技能和能量，從容應(yīng)對(duì)每一個(gè)遇到的挑戰(zhàn)。

就像解決熒光定量PCR儀常規(guī)問題一樣，學(xué)幾招，也許在某一刻就是你需要的，先儲(chǔ)備起來吧！

Q ：7500快速定量PCR儀可以使用0.2ml PCR反應(yīng)管或者96孔板嗎？

A：不可以，7500 快速定量PCR儀只支持0.1ml PCR反應(yīng)管或者96孔板

Q ：如何監(jiān)控反應(yīng)體系是否有蒸發(fā)？

A：查看Rox信號(hào)是否在整個(gè)PCR過程中保持一致。在多組分圖譜界面，選擇單孔，如果Rox信號(hào)逐漸增高，代表樣品孔中有蒸發(fā)。如下圖所示：

Q ：內(nèi)參基因與目標(biāo)基因是否需要在相同的反應(yīng)板上運(yùn)行相對(duì)定量？

A：是，內(nèi)參基因必須和目標(biāo)基因在相同的反應(yīng)板上。軟件可以根據(jù)在相同反應(yīng)板上的內(nèi)參基因和目標(biāo)基因自動(dòng)進(jìn)行相對(duì)定量計(jì)算，并計(jì)算估值區(qū)間。

Q ：定量PCR系統(tǒng)支持的熒光染料有哪些？

A：下面是實(shí)時(shí)定量PCR儀器能夠檢測(cè)染料的表：

Q ：用戶是否可以添加自定義染料？

A：可以，可以添加自定義染料，但染料的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)必須與儀器的濾光片設(shè)置兼容。

Q ：常用熒光染料的發(fā)射波長(zhǎng)為多少？

A：

Q ：ABI各種型號(hào)的定量PCR儀有什么特點(diǎn)？

A：

◆ 7300、7500、7500 快速系統(tǒng)是用鹵鎢燈作為激發(fā)光源，并利用濾光片檢測(cè)激發(fā)熒光

◆ 7300是一個(gè)激發(fā)光和四色濾光片

◆ 7500和7500快速有五個(gè)激發(fā)光和五個(gè)濾光片，所以可以檢測(cè)遠(yuǎn)紅外。

◆ 7900HT系統(tǒng)是用氬離子激光作為激發(fā)光源，可以掃描500nm -650nm所有波長(zhǎng)的熒光

◆ 7900HT系統(tǒng)可以提供更高通量，如 384孔板和低密度芯片升級(jí)，以及自動(dòng)手臂來裝載反應(yīng)板設(shè)備

Q ：BHQ作為探針的淬滅基團(tuán)，在ABI定量PCR系統(tǒng)如何設(shè)定？

A：淬滅基團(tuán)設(shè)為none。

Q ：7300/7500/7900HT定量PCR系統(tǒng)軟件生成的文件有哪些？

A：針對(duì)7300 v1.4及以下版本軟件，7500 v1.4 及以下版本軟件，7900HT軟件生成的文件，包含擴(kuò)增曲線的為數(shù)據(jù)文件，以 sds為文件后綴。相對(duì)定量分析產(chǎn)生以sdm為后綴文件，設(shè)置模板以 sdt為后綴。

針對(duì)7500 v2.0版本軟件，包含擴(kuò)增曲線的為數(shù)據(jù)文件，以 eds為文件后綴。相對(duì)定量分析產(chǎn)生以edm為后綴文件，設(shè)置模板以 edt為后綴。