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 大腸菌群和三種致病菌檢測試劑盒  使用說明書

1.適用范圍：適用于各類食品、純凈水等樣品中大腸菌群數(shù)檢測，致病菌（沙門氏菌、志賀菌、金黃色葡萄球菌）的快速篩查或進一步檢測。

2.方法原理：與國標法相同。事先將濃縮乳糖膽鹽培養(yǎng)基、亞（空白）硒酸鹽胱氨酸增菌液、GN增菌液、7.5%氯化鈉培養(yǎng)基、包被在試劑盒中，隨時取用。

3.試劑盒的組成：試劑盒由三個大發(fā)酵培養(yǎng)基管（孔）（1、2、3）、七個小發(fā)酵培養(yǎng)基管（孔）（4、5、6、7、8、9、10）和三個致病菌增菌培養(yǎng)基管（孔）（A、B、C）組成。1-10孔包被濃縮乳糖膽鹽培養(yǎng)基，設(shè)有集氣窗代替倒管觀察產(chǎn)酸產(chǎn)氣情況。A孔包被濃縮亞（空白）硒酸鹽胱氨酸增菌液、B孔包被濃縮GN增菌液、C孔包被濃縮7.5%氯化鈉培養(yǎng)基。A孔為沙門菌增菌，B孔為志賀菌增菌，C孔為金黃色葡萄球菌增菌。

4.操作方法：

4.1 樣品處理：按《食品衛(wèi)生微生物學檢驗》GB/T4789.3.4.5.10-2003。

4.2 加樣：將試劑盒放在臺面上，打開盒蓋，用無菌吸管吸取3個1：10稀釋液10mL分別加入試劑盒3個大發(fā)酵培養(yǎng)基孔內(nèi)，用無菌吸管吸取3個1mL分別加入試劑盒3小發(fā)酵培養(yǎng)基孔內(nèi)。另用無菌吸管取1：10稀釋后的樣品1mL注入到9mL滅菌生理鹽水中（1：100）取此管3個1mL稀釋液加入到試劑盒另3個小發(fā)酵培養(yǎng)基孔內(nèi)。另用無菌吸管吸取稀釋后的樣品3個4mL分別加入致病菌增菌管（孔）（A、B、C）孔內(nèi)。

4.3 排氣泡: 加樣后集氣窗內(nèi)如有氣泡存在，可將試劑盒以30～45度角傾斜，（圖1）必要時可輕輕用力在桌面敲擊數(shù)下即可排出集氣窗內(nèi)氣泡。

4.4 培養(yǎng)：將加樣后的試劑盒置36℃± 1℃溫箱中，培養(yǎng)18～24h。

4.5 觀察結(jié)果：樣液變?yōu)辄S色為產(chǎn)酸、集氣窗中有氣泡為產(chǎn)氣，既產(chǎn)酸產(chǎn)氣的樣品為陽性結(jié)果，見圖2、圖3。根據(jù)試劑盒的陽性管數(shù)，參照國標GB/T4789.3-2003的方法查MPN檢索表報告結(jié)果。如致病菌增菌培養(yǎng)基管（孔）有渾濁現(xiàn)象時，即預(yù)示著有對應(yīng)致病菌的存在，可將渾濁樣液接種對應(yīng)培養(yǎng)基按GB/T4789.4.5.10進一步檢測。

5. 注意事項：

5.1加入樣品后不需搖勻，平拿平放。

5.2 加樣時可用一次性無菌塑料吸管，將樣品稀釋液加至試劑盒所標刻度處。

5.3 在培養(yǎng)箱中取試劑盒時應(yīng)平托出來，不要傾斜以免由于試劑盒的傾斜將陽性管集氣窗中的氣泡排出而影響結(jié)果。

5.4 試劑盒為一次性無菌用品，供一次性使用。