常見微生物的滅菌方法

常用滅菌法

1）干熱滅菌法 常見的有火焰、燒灼、干烤和紅外線滅菌等。

①火焰、燒灼：通常用于實驗室無菌操作中金屬或其它耐火材料制成的器具的滅菌。

②干烤和紅外線：利用干熱空氣或熱輻射進行滅菌。一般135~145℃需3~5h，160~170℃需2h以

上，170~180℃需1h以上，180~200℃需0.5~1h。除熱原則需250℃30min，或

200℃45min180℃2h。空氣傳熱慢，穿透力不強，故干熱滅菌時間長。干熱滅菌時烤箱內(nèi)裝入物

品應留有空隙，以利空氣流動，否則使箱內(nèi)溫度不均，部分物品滅菌不*。

2）濕熱滅菌法 通過熱蒸汽或沸水使蛋白質(zhì)變性而殺滅微生物的方法。濕熱穿透

力強，滅菌效果較干熱好。

①煮沸或流通蒸汽滅菌：常壓下沸水和蒸汽的溫度是100℃，一般處理30~60min可殺死細菌繁體，但不能*殺滅芽孢。此法適用于不能高壓蒸汽滅菌的物品。

②低溫間隙滅菌（巴斯德滅菌法）：將物品先用60~80℃加熱（或煮沸）1h，然后置20~25℃保

存24h（或常溫過），使其中殘存的芽孢萌發(fā)成繁殖體，再用以上條件滅菌，如此反復三次。

本法適用于不耐高溫或高溫下易變質(zhì)的物品，但很費時。

③高壓蒸汽滅菌（熱壓滅菌法）：超過一個大氣壓時，水的沸點高于100℃，反之亦然.高壓蒸

汽滅菌就是通過加壓提高蒸汽溫度，滅菌效果。它簡便、經(jīng)濟、可靠、無毒，是zui可靠、

應用zui廣泛的滅菌法。此法適用于耐高溫和潮濕的物品。

常用條件為：

115.5℃         30min

121.5℃         20min

126.5℃         15min

注意事項：

a. 必須*排出滅菌器內(nèi)的空氣。否則會影響滅菌器內(nèi)溫度達到規(guī)定的要求。

b. 注意被滅菌物品的溫度。滅菌器內(nèi)溫度與被滅菌物品的溫度一般是一致的，但在蒸汽輸入過

快時，后者可能低于前者，所以升溫時要有一定的預熱時間。另外，降溫過快易引起玻璃炸

裂。因此，對于一種滅菌產(chǎn)品應制定一固定的滅菌曲線（象凍干曲線一樣）。

c. 定期檢查滅菌器內(nèi)溫度的準確性。

3）化學滅菌法 利用化學試劑形成的氣體來殺滅微生物的方法。

常用的滅菌劑為環(huán)氧乙烷（又稱氧化乙烯）。環(huán)氧乙烷是廣譜殺菌劑，能殺滅細菌、芽孢和多

種病毒，還能殺死昆蟲及蟲卵。但由于環(huán)氧乙烷易燃易爆且有毒（有致變異性），用于藥品方

面極有限，多用于醫(yī)療器械、塑料制品等滅菌。（不能用于橡膠和乳膠手套，能將其溶解。）

4）濾過除菌法 利用細菌不能通過致密具孔濾材的原理，除去對熱不穩(wěn)定的藥品溶液或液體

物質(zhì)中的細菌的方法。過濾法一般只能除菌，不能除去支原體和病毒。過濾除菌的效果與濾膜

的性能、孔徑的大小、密度、濾膜的厚度等因素有關(guān)。

濾過除菌法要求zui終過濾的濾膜孔徑為0.22μm。由于各廠家生產(chǎn)的相同規(guī)格的濾膜質(zhì)量并不一

致，為了保證除菌效果，在使用前后應檢查濾器的完好性（如壓力維持試驗或起泡點試驗）。

一個過濾器的使用時間應根據(jù)品種驗證后確定，一般不應超過8小時。

5）輻射滅菌法 輻射有兩種類型：一種是電磁波輻射，如紫外線、紅外線、微波；一種是電

離輻射，如可引起被照射物電離的X射線、γ射線。

①紫外線：紫外光波長在136~390nm之間，其中260nm左右能破壞核酸，殺菌作用zui強。另外，

空氣中的氧受紫外線照射后，可微量轉(zhuǎn)變?yōu)槌粞豕餐饸⒕饔?。紫外線消毒的效果與光源的

功率、光源與被照射物的距離、照射時間、溫度和濕度等因素有關(guān)。我國規(guī)定紫外燈照射強度

在距離1m處不低于70μW/cm2（以紫外線測強儀測定）。在操作面上要求強度達40μW/cm2以

上。一般每10m2裝30W燈管1支，工作前開30~60min。

紫外燈的輸出功率隨使用時間增加而降低。國產(chǎn)紫外燈的平均壽命（點到70%額定功率的時間）

一般為2000h，超過平均壽命時，就達不到預期效果，必須更換。

紫外線的穿透力很弱，不能穿透一般包裝材料，如玻璃、塑料薄膜、紙等。玻璃能強烈吸收小

于350nm的紫外線，石英玻璃能吸收小于200nm的紫外線。因此，它主要用于空氣和物體表面消

毒，特制的紫外燈裝置也可用于水的消毒。紫外線對眼、皮膚有損壞，照射過程中產(chǎn)生的臭氧

對眼、鼻腔有刺激，臭氧過多時使人頭暈、胸悶、血壓下降。

②紅外線：通過加熱碳化硅板產(chǎn)生的輻射熱能，由空氣傳導加熱滅菌。如紅外線烤箱，溫度可

達180℃左右。熱效應特點是由表及里。

③微波：微波滅菌主要是因其熱效應。微波加熱升溫快，溫度高且均勻，殺菌作用強。熱效應

特點是由里及表。不同性質(zhì)的物品吸收微波的能力不同，其熱效應和消毒效果也不同。微波有

一定穿透力，但不強。微波對人體有害，要注意防護。

④60Co滅菌：放射性同位素60Co（或137Cs）衰變時可放射出γ射線，γ射線的能量高、穿透力

強，可使細胞內(nèi)各種活性物質(zhì)發(fā)生化學變化，從而使細菌損傷或死亡。

經(jīng)60Co輻射滅菌的物品溫度升高很少，一般僅約5℃，故又稱“冷滅菌”。60Co輻射存在兩個方

面的安全問題：一是輻射的直接作用。γ射線對人體細胞同樣有害；二是經(jīng)過輻射的食品、藥

品的安全性。1984年美國農(nóng)業(yè)部食品安全實驗室用輻射處理的雞肉喂飼小鼠，發(fā)現(xiàn)患**腫瘤增

加，包括加重癌病損害。因此60Co輻射用于食品和藥品都應經(jīng)過安全試驗，進行科學的、全面

的評價