NCI-H520 (人肺鱗癌細胞)是由A.F. Gazdar等在1982年從一名肺鱗狀細胞癌患者的肺標本中提取的,呈上皮細胞樣,為貼壁細胞。
細胞培養(yǎng)信息:
細胞名稱:NCI-H520 (人肺鱗癌細胞)
細胞別稱:H520; H-520; NCI-HUT-520; NCIH520
細胞來源:肺癌
生長特性: 貼壁細胞、上皮細胞樣
培養(yǎng)條件: 1640+10%FBS
培養(yǎng)環(huán)境: 空氣,95%;二氧化碳 (CO2),5%
細胞含量:>1×10? 細胞數(shù)
細胞規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
細胞用途:僅供科研使用。
NCI-H520細胞培養(yǎng)注意事項:
① 該細胞呈島狀聚集生長,控制消化時間尤為重要:消化時間過短時,細胞不易從瓶(皿)壁脫落,吹打過度會導致細胞碎裂增多,吹散不開的細胞團塊也會導致細胞堆積影響生長;消化時間過長也可能導致細胞傳代后漂浮增多;建議每隔一分鐘顯微鏡下觀察細胞消化狀態(tài),確認細胞與細胞間明顯分離有間隙時再終止消化,使細胞盡量分散,避免聚團。
② 消化傳代時,吹打細胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免造成細胞碎裂增多;
③ 該細胞生長過程中,培養(yǎng)基中始終有少量漂浮的細胞碎片,背景中可看到少量黑點,換液可暫時改善,但繼續(xù)培養(yǎng)仍會出現(xiàn)無法避免。以上都是常見現(xiàn)象,不影響細胞增殖和實驗;
④ 細胞生長偏慢時,可以提高5~10%血清濃度(血清總濃度不超過 20%)培養(yǎng)一段時間,待細胞狀態(tài)和生長速度恢復正常后換回正常血清濃度。
⑤ 該細胞貼壁展開較慢,復蘇24 h后,大部分細胞呈不規(guī)則多邊形或圓形,細胞形態(tài)未完Q展開,48 h后可見細胞開始成片聚集生長;新復蘇培養(yǎng)細胞,可見較多漂浮,復蘇48 h內(nèi)可先不換液,保留漂浮細胞繼續(xù)貼壁;
⑥ 該細胞生長速度中等,細胞匯合度達到80%以上時即可傳代,1:2傳代約2~3天可再次傳代,1:3傳代約3~4天可再次傳代;
運輸和保存:
1、1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
2、T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。