BEAS-2B(人支氣管上皮細胞)從一位非癌個體的正常人支氣管上皮病理切片分離出上皮細胞。這些細胞用腺病毒12-SV40病毒雜交病毒感染并克隆。BEAS-2B細胞保留了對血清反應(yīng)進行鱗關(guān)分化的能力,并有用于篩選誘導或影響分化及致癌的化學或生物制劑。細胞角蛋白及SV40抗原染色陽性。該細胞引種自ATCC CRL-9609 ,又名人正常肺上皮細胞。
細胞培養(yǎng)信息:
細胞名稱:BEAS-2B(人支氣管上皮細胞)
細胞別稱:Beas-2B; BEAS 2B; BEAS2B; Beas2B; Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B
生長特性: 貼壁
培養(yǎng)條件: DMEM-H+10% FBS
培養(yǎng)環(huán)境: 空氣,95%;二氧化碳 (CO2),5%
細胞檢測:
實驗室分離的人支氣管上皮細胞(BEAS-2B)細胞經(jīng)鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
BEAS-2B細胞培養(yǎng)注意事項
● 消化條件:無鈣、鎂離子的PBS清洗細胞后,加1mL胰酉每,胰酉每潤洗細胞表面3-4次后,吸走胰酉每,放入37℃培養(yǎng)箱消化2分鐘左右。(具體消化時間請在拿到細胞前2次傳代時,及時觀察,以實際情況為主。)
● 終止消化時,用1mL胰蛋白酉每抑制劑(2.5mg/mL)終止,離心去上清,然后用3mL PBS再次清洗細胞,離心收集后,用新的培養(yǎng)基重懸后鋪板。(消化過程中,不要拍瓶身,振蕩可促使細胞聚團。)
● 注意:80%左右匯合度時傳代,完Q匯合會使細胞末端分化。
● 剛復蘇要使用提前用包被液包被過的培養(yǎng)器皿(包被液配方:0.01mg/mL黏連蛋白、0.03mg/mL Ⅰ型膠原和0.01mg/mL BSA),以增加細胞貼附。培養(yǎng)器皿提前使用包被液處理,包被時間至少4小時,建議過夜。
● 包被液使用方法:加2-3mL到T25培養(yǎng)瓶(3-4mL到10cm培養(yǎng)皿),放無菌環(huán)境中,擰上蓋子,自然風干。
● 復蘇后的傳代培養(yǎng)過程中可不做包被處理,細胞可正常貼壁。