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關鍵詞:Stratedigm
簡介:我公司全國總代理,華東地區(qū)代理Stratedigm專業(yè)經營進口胎牛血清、細胞因子、ELISA試劑盒、細胞、抗體、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗、其產品吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高,代做ELISA實驗等。
全國總代理,華東地區(qū)代理產品涉及分子生物學、細胞生物學、細菌學、遺傳學、免疫學、生物化學、蛋白質學、細胞療、臨床應用等領域。全國總代理,華東地區(qū)代理范圍內免費運輸,如出現運輸質量問題,我們可以包退換貨。完善的庫存及供應體系以及高效穩(wěn)定的純化技術,保證產品均能現貨供應和產品質量的穩(wěn)定性。
品牌名稱:
測序實驗流程:
分子克隆的相關載體:DNA段的克隆需要合適的載體,載體或是質粒,或是噬菌體,或是病毒,通常大多經過人工改造。作為載體必須具備兩條件:一是該載體在細胞內必須能自主復制,即必須具備復制原點;二是該載體必須具備適合的酶切位點,且這些酶切位點不在復制原點區(qū)域內。以上兩條,保證了載體的可繁殖性和可利用性。為了便于獲得陽隆克隆,載體上常有篩選標記,如對抗菌素的抗性,某些基因產物的顯色反應等。
服務要求:
1、請以等形式告知我們服務的主要目的及具體要求。
2、提供外源DNA的來源及背景資料。DNA來源包括:PCR擴增產物;RT-PCR擴增產物;從其它質粒上酶切得到的DNA段等。
3、提供DNA段的電泳照片,并請標明Marker有濃度。
4、提供載體來源與背景資料。
5、注明克隆使用的酶切位點以及是否需要平端連接等。
相關材料說明:
1、對于實驗材料中涉及病原體等危險材料不接受。
2、實驗中涉及的堿基序列請以的形式發(fā)到我中心。
3、實驗中的使用載體要盡量提供背景資料:(質粒大小,抗性,拷貝數,多克隆位點等)如果是商品化載體,請您提供生產廠家及標準名稱;如果所提供載體是您自己構建的請注明大體結構情況。
4、我中心可以提供常用的如(氨芐青霉素,氯霉素,卡那霉素)以外的抗生素需您提供。
5、您自己提供的引物如果為干品,請您標注具體的OD數,如果是液體態(tài),請您標明濃度。
6、可以用甘油菌和穿刺菌形式郵寄菌體。(同時提供相應的質粒);如果提供質粒,則質粒的量在4ug以上;如果提供的是PCR產物,則PCR產物量在5u以上(附上電泳圖)
7、用于提取RNA/DNA的材料要新鮮。采樣時應首先在液氮中速凍,保存在-80度的冰箱中,使用干冰運輸。
載體DNA的選擇
分子克隆載體
①質粒:質粒是細菌染色體外遺傳因子,DNA呈環(huán)狀,大小為1-200千堿基對(kb)。在細胞中以游離超螺旋狀存在,很容易制備。質粒DNA可通過轉化引入寄主菌。在細胞中有兩種狀態(tài),一是"緊密型";二是"松弛型"。此外還應具有分子量小,易轉化,有一至多個選擇標記的特點。質粒型載體一般只能攜帶10kb以下的DNA段,適用于構建原核生物基因文庫,cDNA庫和次級克隆。
②噬菌體DNA:常用的λ噬菌體的DNA是雙鏈,長約49kb,約含50個基因,其中50%的基因對噬菌體的生長和裂解寄主菌是必需的,分布在噬菌體DNA兩端。中間是非必需區(qū),進行改造后組建一系列具有不同特點的載體分子。λ載體系統(tǒng)zui適用于構建真核生物基因文庫和cDNA庫。
M13噬菌體是一種*的載體系統(tǒng),它只能侵襲具有F基因的大腸桿菌,但不裂解寄主菌。M13DNA(RF)在寄主菌內是雙鏈環(huán)狀分子,象質粒一樣自主復制,制備方法同質粒。寄主菌可分泌含單鏈DNA的M13噬菌體,又能方便地制備單鏈DNA,用于DNA順序分析、定點突變和核酸雜交。
③柯斯(Cos)質粒:是一類帶有噬菌體DNA粘性末端順序的質粒DNA分子。是噬菌體-質?;旌衔?。此類載體分子容量大,可攜帶45kb的外源DNA段。也能象一般質粒一樣攜帶小片段DNA,直接轉化寄主菌。這類載體常被用來構建高等生物基因文庫。
【生物分子】 抗生素/抗真菌素 維生素 氨基酸 核苷酸 脂 糖類 白三烯 前列腺素 藥物結合物 抗氧化劑 藥理活性化合物 類固醇激素結合物 半抗原反應 半抗原載體結合物 放射性核素 血小板活化素 tRNA 活性染料和化合物 親和素/鏈霉親和素
【蛋白質/抗原/多肽】 免疫球蛋白 封閉肽 人蛋白和抗原 小鼠蛋白和抗原 細菌蛋白和抗原 病毒蛋白和抗原 植物蛋白和抗原 其它蛋白和抗原 細胞質蛋白 總蛋白 膜蛋白 核蛋白 細胞裂解和提取物 線粒體蛋白 細胞裂解 組織提取 重組細胞因子
【常用生化試劑】EDTA DTT Tris SDS MOPS HEPES 水 分子生物學緩沖液 蛋白生化緩沖液 去垢劑 染色試劑 溶劑 酸堿 化學試劑 其它生化試劑
【PCR/RT-PCR/qPCR】PCR試劑 PCR對照 特異性PCR試劑盒 PCR克隆試劑盒 RNA 載體及構建 PCR克隆載體 M13克隆載體 細菌克隆載體 文庫及構建 cDNA文庫 基因組文庫 噬菌體展示文庫
【酶】限制性內切酶 蛋白酶 核酸酶 激酶 聚合酶 連接酶
【cDNA及合成純化】cDNA全長基因 RNA cDNA合成 cDNA相關試劑
【核酸/蛋白合成】Oligo純化 核酸合成柱 核酸合成試劑
【克隆與表達】克隆基因 克隆試劑盒 克隆篩選
【表達分析】 Northern印跡分析 分支DNA和mRNA定量
【蛋白分析】 PAGE凝膠制備 蛋白電泳試劑 預制蛋白凝膠
【核酸純化】 DNA凝膠純化 DNA提取純化 PCR產物純化
【RNAi技術】 siRNA 反義寡核苷酸 RNAi定量 RNAi文庫
【蛋白檢測】 Western印跡 報告基因檢測 蛋白檢測試劑盒
【實驗動物】 轉基因動物 小鼠 大鼠 模式動物
【臨床檢測試劑】 生化檢測 遺傳學檢測 血液檢測
相關檢驗