hiPSC人誘導多功能干細胞來源于ATCC,是將健康男性新生兒包皮細胞誘導成hiPSC,貼壁生長,呈克隆狀,可在hESC/iPSC完Q培養(yǎng)基中快速增殖,而邊緣分化的細胞則在該培養(yǎng)基中生長較慢,從而選擇性擴增并獲得高純度人多能干細胞。
細胞培養(yǎng)信息:
細胞名稱:hiPSC人誘導多功能干細胞
細胞別稱:hiPSC;人類誘導多能干細胞;人多能干細胞
細胞來源:肝癌
生長特性: 貼壁生長
培養(yǎng)條件: mTeSR™1
細胞含量:1×10?
細胞規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
細胞用途:僅供科研使用。
hiPSC細胞培養(yǎng)注意事項:
1、不同品牌胰酉每消化時間差別較大,注意嚴格控制消化時間
2、消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,不要產生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)
3、凍存液現(xiàn)用先配
運輸和保存:
1、1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
2、T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞到貨須知
1. 請客戶收到本公司原代細胞產品后,立即對物品包裝、細胞培養(yǎng)瓶等拍照,如有疑問或問題,須在24小時內通知本公司,提供照片和書面說明??蛻羰盏椒莾龃嬖毎螅?5%酒精擦拭瓶身,再將原裝的原代細胞瓶放入細胞培養(yǎng)箱內培養(yǎng),1-4小時后再使用,吸取瓶中培養(yǎng)液,換6ml完Q培養(yǎng)液。注意觀察細胞情況,待貼壁率達到90%以上再按傳代說明操作。請客戶使用T25細胞瓶傳代,一瓶傳二瓶。
2. 謹記:培養(yǎng)原代細胞前三天,需對原代細胞生長狀態(tài)進行拍照并注明和標記時間。若原代細胞培養(yǎng)生長存在質量問題,需向本公司提供原代細胞培養(yǎng)生長的照片和書面說明。請客戶使用原代細胞第3代以內。原代細胞培養(yǎng)傳代過多,可能造成原代細胞的質量問題。
細胞培養(yǎng)
1.顧客收到T25瓶裝的細胞如果沒長滿,建議先放培養(yǎng)箱2-4小時
2.吸去培養(yǎng)液,取部分放入50ml離心管,放置于培養(yǎng)箱(放2-3天,觀察是否有污染)
3.加PBS清洗1-2遍,去PBS。加6ml完Q培養(yǎng)基放培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。1-2天換一次液(如果培養(yǎng)液變黃,必須盡快換液)
細胞傳代
1.細胞密度到達90%,可以進行傳代。
2.吸去培養(yǎng)液,加PBS清洗1-2遍,去PBS。加入0.25%胰酉每1.5ml潤洗10秒,
3.加12ml完 Q培養(yǎng)基,吹打均勻,即可分到2個T25培養(yǎng)瓶里。(原代細胞1傳2,若顧客使用培養(yǎng)皿或培養(yǎng)孔板,建議先包被)
細胞凍存
1.選擇指數(shù)生長期的細胞,吸去培養(yǎng)液,加PBS清洗1-2遍。去PBS,加入0.25%胰酉每1.5ml潤洗10秒,去胰酉每。將培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱,靠殘余胰酉每繼續(xù)消化細胞直至細胞變圓,拍打瓶側使細胞脫落。
2.加1-1.5ml成品凍存液(本公司有賣的,無血清低DMSO,無需程序凍存),分裝至2ml凍存管里,放-80度冰箱過夜。第二天再轉至液氮
細胞復蘇
1.從液氮罐取凍存管,凍存管放置37度水浴鍋1min,至凍存液融解。
2.在超凈臺將凍存液吸取至T25培養(yǎng)瓶,再加入10-15ml完Q培養(yǎng)基
3.第二天換6ml完Q培養(yǎng)液即可