百里酚藍(lán)

生化試劑的一些概要：百里酚藍(lán)
生化試劑又叫生化藥品，簡(jiǎn)稱試劑。它是工農(nóng)業(yè)、文教衛(wèi)生、科學(xué)研究以及國(guó)防建設(shè)等多方面進(jìn)行化驗(yàn)分析的重要藥劑。生化試劑是指具有一定純度標(biāo)準(zhǔn)的各種單質(zhì)和化合物（也可以是混合物。要進(jìn)行任何實(shí)驗(yàn)都離不了試劑，試劑不僅有各種狀態(tài)，而且不同的試劑其性能差異很大。有的常溫非常安定、有的通常就很活潑，有的受高溫也不變質(zhì)、有的卻易燃易爆：有的香氣濃烈，有的則劇毒……。只有對(duì)生化試劑的有關(guān)知識(shí)深入了解，才能安全、順利進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。既可保證達(dá)到預(yù)期實(shí)驗(yàn)?zāi)康模挚上龑?duì)環(huán)境的污染。因此，首先要知道試劑的分類情況。然后掌握各類試劑的存放和使用。
下面是公司生化試劑產(chǎn)品：百里酚藍(lán)
半乳糖氧化酶，Galactose oxidase 高純，30u，mg 150u 9028-79-9 保存：-20℃
1KU
α-甘油磷酸脫氫酶，3-磷酸甘油脫氫酶，α-Glycerophosphate dehydrogenase BR，100-300u，mg 1KU 9075-65-4 2～8℃
蘋果酸脫氫酶，Malate dehydrogenase，MDH 超純，1200u，mg，液體 25KU 9001-64-3 2～8℃
BR，200u，mg，粉末 25KU
肌激酶，Myokinase BR，1500-3000u，mg 1ku 9013-2-9 2～8℃
神經(jīng)氨酸酶（梭菌），神經(jīng)氨酸苷酶，唾液酸苷酶，神經(jīng)氨糖酸苷酶，神經(jīng)氨酶，神經(jīng)酰氨酶，受體破壞酶，Neuraminidase BR，0.5u，mg 2.5U 9001-67-6 保存：-20℃
10U
多酚氧化酶（菌菇），酪氨酸酶，酥氨基酸酶，多聚苯酚氧化酶，兒茶酚氧化酶，Polyphenol oxidase BR，500u，mg 25KU 9002-10-2 保存：-20℃
100KU
丙酮酸激酶，丙酮酸磷轉(zhuǎn)稱酶，磷酸丙酮酸激酶，PK BR，300u，mg，粉末 5KU 9001-59-6 保存：-20℃
精制級(jí)，350-600u，mg，粉末 1KU
生物技術(shù)級(jí)，200u，mg，液體 50毫克 2～8℃
酪氨酸脫羧酶，Tyrosine decarboxylase USP級(jí)，0.1u，mg 25u CAS:9002-09-9 保存：-20℃
BR，0.1u，mg 250毫克
尿酸酶，脲酸酶，尿酸氧化酶，UAO 生物技術(shù)級(jí)，10u，mg 1KU 9002-12-4 保存：-20℃
尿激酶，雅激酶，尿活素，U-血纖維蛋白溶酶原激活劑，Urokinase BR，500u，mg 10毫克 9039-53-6 保存：-20℃
人纖溶酶，人纖維蛋白溶酶，F(xiàn)ibrinolysin BR，2u，mg 150ug 9001-90-5 保存：-20℃
500ug
幾丁質(zhì)酶，殼多糖酶，Chitinase BR，200u，g 5U CAS:9001-06-3 保存：-20℃
25U
3α羥基類固醇脫氫酶，羥基甾族化合物氧化還原酶，羥固醇，HSD BR，50u，mg 500U 9028-56-2 保存：-20℃
1KU
肌氨酸氧化酶，SAO，Sarcosine Oxidase BR，5-10u，mg 1KU 9029-22-5 保存：-20℃
肌酐酶，CAH，Creatininase amidohydrolase BR，100-300u，mg 1KU 9025-13-2 保存：-20℃
肌酸酶，肌氨酸酶，CRH BR，10-20u，mg 500U 37340-58-2 保存：-20℃
S-腺苷高半胱氨酸水解酶，SAHH BR，700U，mg 1毫克 9025-54-1 保存：-20℃
嘌呤核苷磷酸化酶，PNP，Purine-nucleoside phosphorylase BR，100-200u，mg 500U 9030-21-1 保存：-20℃
1KU
腺苷脫氨酶，腺甙脫氨酶，腺苷脫氨基酶，ADA BR，150-250u，mg 250U 9026-93-1 2～8℃
1KU
甘油醛-3-磷酸脫氫酶，3- 磷酸甘油醛脫氫酶，GAPDH B，75u，mg 500U 9001-50-7 保存：-20℃
1KU
5KU
3-磷酸甘油酸激酶，3-Phosphoglyceric Phosphokinase BR，1000u，mg 2KU 9001-83-6 2～8℃
5KU
漆酶，Laccase from Rhus vernificera BR，0.5u，mg 1克 80498-15-3 保存：-20℃
精制級(jí)，50u，mg 10KU
異檸檬酸脫氫酶，ICDH，Isocitrate dehydrogenase BR，3-20u，mg，液體 25毫克 9028-48-2 2～8℃
100毫克
BR，0.5-3u，mg，粉末 500毫克 保存：-20℃
麥芽糖酶，Maltase dehydrogenase，γ-MDH BR 10KU 保存：-20℃
乳酸過(guò)氧化物酶，Lactoperoxidase from bovine milk 層析純，35u，mg 10毫克 9003-99-0 保存：-20℃
普魯蘭酶，聚麥芽三糖酶，普魯藍(lán)酶，茁霉多糖酶，Pullulanase BR，5u，mg 500毫克 9075-68-7 2～8℃
乙醛脫氫酶，Aldehyde Dehydrogenase, potassium-activated BR，2u，mg 25U 9028-88-0 保存-20℃
生物技術(shù)級(jí)，1u，mg 25毫克
甘油激酶，GK，Glycerokinase 生物技術(shù)級(jí),150u，mg 5KU 9030-66-4 保存-20℃
D-乳酸脫氫酶，D-LDH BR，250u，mg 5KU 9028-36-8 保存-20℃
脂肪氧化酶，不飽和脂肪酸氧化還原酶，Lipoxidase from soybean BR, 500000u，mg 100毫克 9029-60-1 2～8℃
1克
磷酸丙糖異構(gòu)酶，丙糖磷酸異構(gòu)酶，磷酸甘油醛異構(gòu)酶，TPI，TIM BR，3500u，mg 1毫克 9023-78-3 保存-20℃
5毫克
蔗糖磷酸化酶，SP，Sucrose Phosphorylase BR，100u，mg 100U 9074-06-0 保存-20℃
500U
常用生化試劑作用：
1、蛋白酶K：能水解消化蛋白質(zhì)，特別是與DNA結(jié)合的組蛋白，在尿素和SDS中穩(wěn)定。一般工作濃度是50—100μg/ml，推薦反應(yīng)緩沖液：50mM Tris-HCl （pH7.5）,10mM CaCl2。
2、SDS：十二烷基硫酸鈉，溶解細(xì)胞膜上的脂類與蛋白質(zhì)，因而溶解膜蛋白而破壞細(xì)胞膜，并解離細(xì)胞中的核蛋白，SDS 還能與蛋白質(zhì)結(jié)合而沉淀。
3、IPTG：異丙基-β-D-硫代半乳糖苷， 常用于藍(lán)白斑篩選及IPTG誘導(dǎo)的細(xì)菌內(nèi)的蛋白表達(dá)等。IPTG和乳糖的結(jié)構(gòu)相似，所以它和乳糖一樣，可以與乳糖操縱元的阻遏蛋白結(jié)合，使阻遏蛋白的空間構(gòu)像變化，四聚體解聚成單體，失去與操縱子特異性結(jié)合的能力，從而解除了阻遏蛋白的作用，使其后的基因得以轉(zhuǎn)錄合成利用乳糖的酶類。與乳糖不同的是，IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解。常與X-GAL一起用于藍(lán)白斑篩選。作用*的誘導(dǎo)劑，不被細(xì)菌代謝而十分穩(wěn)定。
4、X-gal：5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷，是IPTG的顯色試劑，在IPTG的催化下顯藍(lán)色。常跟IPTG一起用與藍(lán)白斑篩選。
5、G418：一種抗生素，對(duì)幾乎所有的細(xì)胞都有毒性，是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染zui常用的選擇試劑。當(dāng)neo基因被整合進(jìn)真核細(xì)胞基因組合適的地方后，則能啟動(dòng)neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為mRNA，從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的高效表達(dá)，使細(xì)胞獲得抗性而能在含有Ｇ418的選擇性培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。Ｇ418的這一選擇特性 ，已在基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等方面得以廣泛應(yīng)用。
6、DMSO：二甲基亞砜。實(shí)驗(yàn)室常用于作液體層析溶劑，同時(shí)用作測(cè)試物質(zhì)紫外消光值上時(shí)用作參照物。能溶于所有烷烴和烯烴。
7、曲拉通X-100：TritonX-100，用的細(xì)胞裂解液成分之一，在保護(hù)蛋白活性方面有一定作用， 能力介于NP40和SDS之間，偏向于NP40。
8、NP-40：很溫和的去垢劑，1%濃度的基本可以破壞掉胞膜，而對(duì)核膜破壞的作用弱，結(jié)合特定的buffer可以獲得胞漿蛋白。
9、BSA：牛血清白蛋白， 主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營(yíng)養(yǎng)作用。在動(dòng)物細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)中，添加白蛋白可起到生理和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用。常用于蛋白定量中的內(nèi)參和抗體稀釋液。
10、甲酰胺： 甲酰胺被用作凝膠電泳中RNA的穩(wěn)定劑，也用于穩(wěn)定毛細(xì)管電泳中的變性單股DNA。
11、TEMED：四甲基乙二胺。促凝劑。在中性及堿性pH條件下，加入TEMED可加速凝膠聚合。
12、巰基乙醇：一種強(qiáng)還原劑。可還原蛋白二硫鍵，從而使蛋白保持溶解狀態(tài)，有利于與SDS的結(jié)合。使蛋白解離成單個(gè)亞基。
13、甲叉雙丙烯酰胺：N，N'-甲叉雙丙烯酰胺，別名MBA，又叫亞甲基雙丙烯酰胺，次甲基雙丙烯酰胺，N，N'-甲撐雙丙烯酰胺。作交聯(lián)劑與丙烯酰胺聚合而制備聚丙烯酰胺凝膠。
14、過(guò)硫酸銨：過(guò)硫酸銨（APS）的作用主要是提供自由基，然后在促凝劑TEMED的作用下使丙烯酰胺及甲叉丙烯酰胺聚合。
15、B27：一種添加劑，用于神經(jīng)肝細(xì)胞培養(yǎng)，被認(rèn)為具有抑制膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。
16、DTT：二硫蘇糖醇，常用還原劑，既有抗氧化作用。它能保護(hù)酶分子上的還原性基團(tuán)，維持還原性環(huán)境，穩(wěn)定酶的活性。又是一種蛋白質(zhì)變性劑，破壞二硫鍵，濃度不同，起到的作用也不同。
17、弗氏不*佐劑和弗氏*佐劑：弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液，含結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁成分。佐劑活性來(lái)自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放，并刺激局部免疫反應(yīng)。弗氏不*佐劑用于初次免疫刺激。為了減少副作用，不含結(jié)核分枝桿菌成分的弗氏不*佐劑用于加強(qiáng)弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液，能夠非常有效的誘導(dǎo)產(chǎn)生高滴度的抗體。弗氏*佐劑含結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁成分，可以加強(qiáng)對(duì)抗原的抗體反應(yīng)。佐劑活性來(lái)自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放，并刺激局部免疫反應(yīng)。
18、吐溫 20：Tween-20 ，常用的非離子去垢劑。
19、吐溫 80：weenum 80 ，除作乳化劑外，也用作某些水中難溶藥物的增溶劑。
20.、十二烷基肌氨酸鈉 ：脫細(xì)胞試劑，制備脫細(xì)胞組織工程支架材料。21.PVPP：PVPP對(duì)片劑具有崩解作用，能和各種不溶于水的藥物共容，能穩(wěn)定化各種懸浮劑，又具有形成絡(luò)合物的能力以及吸附作用等，因而可用作醫(yī)藥助劑。也用于除去啤酒中的多酚。22、PIPES：哌嗪-N，N'-二（2-乙磺酸）,實(shí)驗(yàn)室做緩沖劑用。全名是哌嗪-N,N-二（2-乙磺酸），pKa是6.80。不參與也不干擾生物化學(xué)反應(yīng)，價(jià)格比較貴。常用在免疫和細(xì)胞類的實(shí)驗(yàn)中，PIPES有時(shí)還被用來(lái)制備大腸桿菌感受態(tài)。23、CTAB：十六烷基三乙基溴化銨，一種去污劑，可溶解細(xì)胞膜，它能與核酸形成復(fù)合物，在高鹽溶液中（（0.7 mol/L NaCl）是可溶的，當(dāng)降低溶液鹽濃度到一定程度（0.3 mol/L NaCl）時(shí)，從溶液中沉淀，通過(guò)離心就可將CTAB-核酸的復(fù)合物與蛋白，多糖類物質(zhì)分開。zui后通過(guò)乙醇或異丙醇沉淀DNA，而CTAB溶于乙醇或異丙醇而除去。CTAB法是現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室zui常用的一種提取核酸的手段。24、HEPES：羥乙基哌秦乙硫磺酸，一種弱酸緩沖劑，主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變化。在開放式培養(yǎng)條件下，培養(yǎng)基脫離了5%CO2的環(huán)境，CO2氣體迅速逸出，pH迅速升高，若加了HEPES，此時(shí)可以維持pH7.0左右。一般在進(jìn)行克隆化培養(yǎng)時(shí)要添加HEPES。
25、MOPS：一種緩沖液，有抑制RNA酶的作用，一般和甲醛（用于變形RNA）用于RNA變性電泳。26、鹽酸胍：鹽酸胍等可使蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中的氫鍵發(fā)生斷裂，這增加了非極性分子包括氨基酸側(cè)鏈的溶解度，減少了疏水相互作用。27、PMSF：Phenylmethanesulfonyl fluoride，中文名為苯甲基磺酰氟。用于抑制蛋白酶. PMSF嚴(yán)重?fù)p害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚，吸入、吞進(jìn)或通過(guò)皮膚吸收后有致命危險(xiǎn)。一旦眼睛或皮膚接觸了PMSF，應(yīng)立即用大量水沖洗之。凡被PMSF污染的衣物應(yīng)予丟棄。PMSF在水溶液中不穩(wěn)定。應(yīng)在使用前從貯存液中現(xiàn)用現(xiàn)加于裂解緩沖液中。PMSF在水溶液中的活性喪失速率隨pH值的升高而加快，且25℃的失活速率高于4℃。pH值為8.0時(shí)，20μmmol/l PMSF水溶液的半壽期大約為85min，這表明將PMSF溶液調(diào)節(jié)為堿性（pH>8.6）并在室溫放置數(shù)小時(shí)后，可安全地予以丟棄。
28、溴酚藍(lán)：pH指示劑，pH=3.0時(shí)呈黃色，pH=4.6時(shí)呈藍(lán)紫色。酸堿指示劑；非水滴定用指示劑，蛋白電泳染色；病毒化驗(yàn)等。29、臺(tái)盼蘭：臺(tái)盼藍(lán)（Trypan Blue）或稱臺(tái)盼蘭，是細(xì)胞活性染料，常用于檢測(cè)細(xì)胞膜的完整性。30、二甲苯青FF：用于瓊脂糖聚丙烯酰胺凝膠電泳的示蹤染料， 易溶于水和醇，可與溴芬藍(lán)按照一定比例配置loading buffer。31、吖啶橙：是一種熒光色素，與細(xì)胞中DNA和RNA結(jié)合量存在差別，可發(fā)出不同顏色的熒光，與DNA結(jié)合量少發(fā)綠色熒光，與RNA結(jié)合量多發(fā)桔黃色或桔紅色熒光。該染料具有膜通透性，能透過(guò)細(xì)胞膜，使核DNA和RNA染色。在熒光顯微鏡下觀察，吖啶橙可透過(guò)正常細(xì)胞膜，使細(xì)胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光；而在凋亡細(xì)胞中，因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷，形成凋亡小體。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光，或黃綠色碎片顆粒；而壞死細(xì)胞黃熒光減弱甚至消失。吖啶橙AO常與溴化乙啶EB合用雙染，因EB只染死細(xì)胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光，由此可區(qū)分出正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞.它還可以用作移碼突變的誘變劑，能鑲嵌于兩個(gè)相鄰的堿基對(duì)之間，這樣在DNA復(fù)制過(guò)程中，會(huì)使DNA鏈增加或缺失一個(gè)堿基，造成移碼突變。吖啶橙染液有毒，操作時(shí)要戴手套，需避光。32、EDTA和EGTA：EDTA--乙二胺四乙酸EDTA是螯合劑的代表性物質(zhì)。能和堿金屬、稀土元素和過(guò)渡金屬等形成穩(wěn)定的水溶性絡(luò)合物。此外EDTA也可用來(lái)使有害放射性金屬?gòu)娜梭w中迅速排泄起到解毒作用。也是水的處理劑。EGTA--乙二醇雙（2-氨基乙基）四乙酸在Mg2+存在下測(cè)定Ca2+時(shí)，可用EGTA直接滴定,滴定誤差小于0.3% ，比用EDTA滴定提高了選擇性。此外它與金屬離子形成的配合物的穩(wěn)定性普遍比相應(yīng)的EDTA配合物差。33、TRICINE：N-[三（羥甲基）甲基]甘氨酸， 常見的電泳系統(tǒng)是Tris－甘氨酸系統(tǒng)；Tris－Tricine電泳則用于分子量小于10kDa的多肽和蛋白的電泳，能夠獲得較好的分離效果?？梢杂们罢叽妗?4、PVP40：PVP40 中的CO - N = 有很強(qiáng)的結(jié)合酚類化合物的能力，與其形成穩(wěn)定的復(fù)合物，常用于提取RNA時(shí)除去酚類。35、脫氧膽酸鈉：離子型去垢劑，作用有：1、裂解細(xì)胞；2、溶解蛋白，尤其是可以溶解一些難溶于水的蛋白，如膜蛋白等；3、很適合做WB，但在Co-IP中使用，需要謹(jǐn)慎。36、6-BA：細(xì)胞培養(yǎng)中用到，細(xì)胞分裂素。37、碘代乙酰胺：也叫作碘乙酰胺，2-碘乙酰胺。用于有機(jī)合成，在蛋白組學(xué)中組氨酸和半胱氨酸的烷基化試劑，用于多肽測(cè)序以及酶抑制劑等，蛋白組學(xué)級(jí)試劑。38、萘乙酸：NAA，為廣譜性植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。可促進(jìn)細(xì)胞分裂，誘導(dǎo)形成不定根，改變雌雄花比例，增加坐果率等39。番紅O與藏紅T：氧化還原指示劑、生物染色、酸堿指示劑，滴定分析亞硝酸鹽。40。TTC：2，3，5-三苯基氯化四氮唑（紅四氮唑），多用于藥物分析和瓊脂糖添加劑，在計(jì)數(shù)瓊脂中加入適量的TTC（0.5% TTC 1ML加到100ML瓊脂中），細(xì)菌菌落長(zhǎng)成紅顏色，對(duì)去除食品本底顆粒物干擾非常有意義。