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生化試劑的一些概要:甲基百里酚藍
生化試劑又叫生化藥品,簡稱試劑。它是工農(nóng)業(yè)、文教衛(wèi)生、科學(xué)研究以及國防建設(shè)等多方面進行化驗分析的重要藥劑。生化試劑是指具有一定純度標(biāo)準(zhǔn)的各種單質(zhì)和化合物(也可以是混合物。要進行任何實驗都離不了試劑,試劑不僅有各種狀態(tài),而且不同的試劑其性能差異很大。有的常溫非常安定、有的通常就很活潑,有的受高溫也不變質(zhì)、有的卻易燃易爆:有的香氣濃烈,有的則劇毒……。只有對生化試劑的有關(guān)知識深入了解,才能安全、順利進行各項實驗。既可保證達到預(yù)期實驗?zāi)康模挚上龑Νh(huán)境的污染。因此,首先要知道試劑的分類情況。然后掌握各類試劑的存放和使用。
下面是公司生化試劑產(chǎn)品:甲基百里酚藍
5-碘-2-脫氧尿苷,5-碘代-2'-脫氧尿嘧啶核苷,碘苷,5-IDU 超純,99% 1克 54-42-2 保存:-20℃
2,2′-脫水尿苷,2,2-環(huán)尿苷,2,2'-脫水尿甙,2,2′-O-Cyclouridine 高純,98% 5克 3736-77-4 RT
25克
2′-溴脫氧尿苷,2'-溴-2'-脫氧尿苷,2′-BrdU 高純,98% 100毫克 72218-68-9 2~8℃
1克
2′-甲氧基尿苷,2'-O-甲基尿苷,2′-O-Methyl-Uridine 高純,98% 1克 2140-76-3 2~8℃
5克
2′-疊氮脫氧尿苷,2'-疊氮-2'-脫氧尿苷,2′-Azido-2′-deoxyuridine 高純,98% 5毫克 26929-65-7 2~8℃
2′-氟脫氧尿苷,2'-脫氧-2'-氟尿苷,2'-氟-2'-脫氧尿苷,DMT保護性-2‘-氟脫氧尿苷,2-FDU 高純,98% 1克 784-71-4 2~8℃
5克
2′-氟脫氧胞苷,2'-脫氧-2-氟胞苷,2-FDC 高純,98% 1克 10212-20-1 2~8℃
阿糖腺苷,阿糖腺嘌吟,腺嘌吟阿拉伯糖苷,9-β-D-阿拉伯呋喃糖基腺嘌呤,Ara-A 超純,99% 100毫克 5536-17-4 保存:-20℃
1克
單磷酸阿糖腺苷,阿糖腺苷單磷酸,9-(β-D-阿拉伯呋喃糖)腺膘呤 5'-單磷酸酯,Vidarabine Monophosphate 高純,98% 1克 29984-33-6 保存:-20℃
5克
阿糖胞苷,胞嘧啶-β-D-呋喃阿拉伯糖苷,1-β-D-阿拉伯呋喃糖基-4-氨基-2(1H)-嘧啶酮,阿拉伯糖胞嘧啶,胞嘧啶阿拉伯糖苷,阿拉伯呋喃糖基胞嘧啶,阿拉伯糖基胞嘧啶,Ara-C 超純,98% 1克 147-94-4 2~8℃
5克
25克
阿糖尿苷,Uracil 1-β-D-arabinofuranoside 高純 ,98% 1克 3083-77-0 保存:-20℃
5克
25克
阿糖胸苷,1-β-D-阿拉伯呋喃糖苷胸腺嘧啶,1-β-D-Arabinofuranosylthymine 高純 ,98% 100毫克 605-23-2 保存:-20℃
1克
曲氟胸苷,曲氟胸甙,三氟胸苷,三氟胸腺嘧啶核苷,三氟甲基尿嘧啶去氧核苷,Trifluorothymidine 高純,97% 100毫克 70-00-8 保存:-20℃
鹽酸環(huán)胞苷,鹽酸環(huán)胞啶,鹽酸環(huán)胞甙,安西他濱鹽酸鹽,Cyclo-C 高純,98% 5克 10212-25-6 RT
核糖核酸(酵母),核酸,RNA BR,90% 5克 63231-63-0 2~8℃
25克
100克
1公斤
轉(zhuǎn)移核糖核酸(酵母),t-RNA BR,15~20A260單位,mg 100毫克 9014-25-9 2~8℃
核糖核酸鈉鹽(酵母),核酸鈉鹽,RNA鈉,RNA-Na BR,90% 5克 CAS:9010-05-3 2~8℃
25克
100克
1公斤
脫氧核糖核酸(魚精),DNA(魚精),DNA BR,85% 1克 2~8℃
10克
25克
100克
BR,50mg,ml 5毫升 保存:-20℃
脫氧核糖核酸(鯡魚精),DNA(鯡魚精),DNA BR,85% 5克 2~8℃
25克
100克
BR,50mg,ml 5毫升 保存:-20℃
脫氧核糖核酸(鮭魚精),DNA(鮭魚精),脫氧核糖核酸鈉(鮭魚精)DNA,DNA Na 高純,90% 1克 9007-49-2 2~8℃
5克
25克
脫氧核糖核酸(小牛胸腺),DNA(小牛胸腺),脫氧核糖核酸鈉(小牛胸腺)DNA,DNA Na BR,90% 100毫克 73049-39-5 2~8℃
500毫克
1克
脫氧核糖核酸緩沖液,DNA Buffer BR,20mg,ml 5毫升 保存:-20℃
25毫升
生物技術(shù)級,5mg,ml 10毫升
50毫升
4-氯苯氧乙酸,對氯苯氧乙酸,對氯苯氧醋酸,促生靈,番茄通,p-氯苯氧乙酸,防落素,防落壯果劑,4-CPA,IUPAC CP,99% 100克 122-88-3 RT
500克
4-氯苯氧乙酸鈉,對氯苯氧乙酸鈉,4-Chlorophenoxyacetic acid sodium salt CP,99% 100克 13730-98-8 RT
500克
2,4-二氯苯氧乙酸,2,4-滴,2,4-D酸,2,4-二氯苯氧基乙酸,2,4-D CP,98% 100克 94-75-7 RT
500克
2,4-二氯苯氧乙酸鈉,2,4-滴鈉,2,4-D鈉,(2,4-二氯苯氧基)乙酸鈉鹽,2,4-D sodium salt 試劑級,98% 100克 2702-72-9 RT
500克
氯吡苯脲,氯吡脲,調(diào)吡脲,吡效隆醇,吡效隆,1-(2-氯-4-吡啶基)-3-苯基脲,KT-30,CPPU,4PU-30,CN-11-3183 試劑級,98% 5克 68157-60-8 RT
25克
100克
毛地黃皂苷,洋地黃皂苷,毛地黃皂甙,毛地黃葉苷,地芰脫皂苷,Digitonin BR,50% 100毫克 11024-24-1 RT
1克
6-甲基香豆素,6-甲基苯并吡喃酮,6-甲基氧雜萘鄰?fù)?-甲基-2H-1-苯并吡喃-2-酮,6-Methylcoumarin 高純,99% 25克 92-48-8 RT
100克
7-羥基-4-甲基香豆素,4-甲基傘形酮,羥甲香豆素,膽通,4-甲基傘形花內(nèi)酯,β-甲基傘形花精,β-甲基傘形花內(nèi)酯,4-MU BR,98% 25克 90-33-5 RT
100克
500克
縮節(jié)胺,助壯素,N,N-二甲基哌啶氯化物,甲哌啶,調(diào)節(jié)啶,壯棉素,皮克斯,1,1-二甲基氮雜環(huán)己基氯化物,Mepiquat chloride 高純,96% 100克 24307-26-4 RT
500克
噻苯隆,脫葉靈,脫葉脲,脫落寶,N-苯基-N-1,2,3-噻二唑-5-脲,賽苯隆,1-苯基-3-(1,2,3-噻二唑-5-基)脲,TDZ 高純,95% 25克 51707-55-2 2~8℃
100克
常用生化試劑作用:
1、蛋白酶K:能水解消化蛋白質(zhì),特別是與DNA結(jié)合的組蛋白,在尿素和SDS中穩(wěn)定。一般工作濃度是50—100μg/ml,推薦反應(yīng)緩沖液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。
2、SDS:十二烷基硫酸鈉,溶解細胞膜上的脂類與蛋白質(zhì),因而溶解膜蛋白而破壞細胞膜,并解離細胞中的核蛋白,SDS 還能與蛋白質(zhì)結(jié)合而沉淀。
3、IPTG:異丙基-β-D-硫代半乳糖苷, 常用于藍白斑篩選及IPTG誘導(dǎo)的細菌內(nèi)的蛋白表達等。IPTG和乳糖的結(jié)構(gòu)相似,所以它和乳糖一樣,可以與乳糖操縱元的阻遏蛋白結(jié)合,使阻遏蛋白的空間構(gòu)像變化,四聚體解聚成單體,失去與操縱子特異性結(jié)合的能力,從而解除了阻遏蛋白的作用,使其后的基因得以轉(zhuǎn)錄合成利用乳糖的酶類。與乳糖不同的是,IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解。常與X-GAL一起用于藍白斑篩選。作用*的誘導(dǎo)劑,不被細菌代謝而十分穩(wěn)定。
4、X-gal:5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,是IPTG的顯色試劑,在IPTG的催化下顯藍色。常跟IPTG一起用與藍白斑篩選。
5、G418:一種抗生素,對幾乎所有的細胞都有毒性,是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染zui常用的選擇試劑。當(dāng)neo基因被整合進真核細胞基因組合適的地方后,則能啟動neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為mRNA,從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的高效表達,使細胞獲得抗性而能在含有G418的選擇性培養(yǎng)基中生長。G418的這一選擇特性 ,已在基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動物等方面得以廣泛應(yīng)用。
6、DMSO:二甲基亞砜。實驗室常用于作液體層析溶劑,同時用作測試物質(zhì)紫外消光值上時用作參照物。能溶于所有烷烴和烯烴。
7、曲拉通X-100:TritonX-100,用的細胞裂解液成分之一,在保護蛋白活性方面有一定作用, 能力介于NP40和SDS之間,偏向于NP40。
8、NP-40:很溫和的去垢劑,1%濃度的基本可以破壞掉胞膜,而對核膜破壞的作用弱,結(jié)合特定的buffer可以獲得胞漿蛋白。
9、BSA:牛血清白蛋白, 主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養(yǎng)作用。在動物細胞無血清培養(yǎng)中,添加白蛋白可起到生理和機械保護作用和載體作用。常用于蛋白定量中的內(nèi)參和抗體稀釋液。
10、甲酰胺: 甲酰胺被用作凝膠電泳中RNA的穩(wěn)定劑,也用于穩(wěn)定毛細管電泳中的變性單股DNA。
11、TEMED:四甲基乙二胺。促凝劑。在中性及堿性pH條件下,加入TEMED可加速凝膠聚合。
12、巰基乙醇:一種強還原劑??蛇€原蛋白二硫鍵,從而使蛋白保持溶解狀態(tài),有利于與SDS的結(jié)合。使蛋白解離成單個亞基。
13、甲叉雙丙烯酰胺:N,N'-甲叉雙丙烯酰胺,別名MBA,又叫亞甲基雙丙烯酰胺,次甲基雙丙烯酰胺,N,N'-甲撐雙丙烯酰胺。作交聯(lián)劑與丙烯酰胺聚合而制備聚丙烯酰胺凝膠。
14、過硫酸銨:過硫酸銨(APS)的作用主要是提供自由基,然后在促凝劑TEMED的作用下使丙烯酰胺及甲叉丙烯酰胺聚合。
15、B27:一種添加劑,用于神經(jīng)肝細胞培養(yǎng),被認為具有抑制膠質(zhì)細胞生長的作用。
16、DTT:二硫蘇糖醇,常用還原劑,既有抗氧化作用。它能保護酶分子上的還原性基團,維持還原性環(huán)境,穩(wěn)定酶的活性。又是一種蛋白質(zhì)變性劑,破壞二硫鍵,濃度不同,起到的作用也不同。
17、弗氏不*佐劑和弗氏*佐劑:弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,含結(jié)核分枝桿菌的細胞壁成分。佐劑活性來自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,并刺激局部免疫反應(yīng)。弗氏不*佐劑用于初次免疫刺激。為了減少副作用,不含結(jié)核分枝桿菌成分的弗氏不*佐劑用于加強弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,能夠非常有效的誘導(dǎo)產(chǎn)生高滴度的抗體。弗氏*佐劑含結(jié)核分枝桿菌的細胞壁成分,可以加強對抗原的抗體反應(yīng)。佐劑活性來自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,并刺激局部免疫反應(yīng)。
18、吐溫 20:Tween-20 ,常用的非離子去垢劑。
19、吐溫 80:weenum 80 ,除作乳化劑外,也用作某些水中難溶藥物的增溶劑。
20.、十二烷基肌氨酸鈉 :脫細胞試劑,制備脫細胞組織工程支架材料。21.PVPP:PVPP對片劑具有崩解作用,能和各種不溶于水的藥物共容,能穩(wěn)定化各種懸浮劑,又具有形成絡(luò)合物的能力以及吸附作用等,因而可用作醫(yī)藥助劑。也用于除去啤酒中的多酚。22、PIPES:哌嗪-N,N'-二(2-乙磺酸),實驗室做緩沖劑用。全名是哌嗪-N,N-二(2-乙磺酸),pKa是6.80。不參與也不干擾生物化學(xué)反應(yīng),價格比較貴。常用在免疫和細胞類的實驗中,PIPES有時還被用來制備大腸桿菌感受態(tài)。23、CTAB:十六烷基三乙基溴化銨,一種去污劑,可溶解細胞膜,它能與核酸形成復(fù)合物,在高鹽溶液中((0.7 mol/L NaCl)是可溶的,當(dāng)降低溶液鹽濃度到一定程度(0.3 mol/L NaCl)時,從溶液中沉淀,通過離心就可將CTAB-核酸的復(fù)合物與蛋白,多糖類物質(zhì)分開。zui后通過乙醇或異丙醇沉淀DNA,而CTAB溶于乙醇或異丙醇而除去。CTAB法是現(xiàn)在實驗室zui常用的一種提取核酸的手段。24、HEPES:羥乙基哌秦乙硫磺酸,一種弱酸緩沖劑,主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變化。在開放式培養(yǎng)條件下,培養(yǎng)基脫離了5%CO2的環(huán)境,CO2氣體迅速逸出,pH迅速升高,若加了HEPES,此時可以維持pH7.0左右。一般在進行克隆化培養(yǎng)時要添加HEPES。
25、MOPS:一種緩沖液,有抑制RNA酶的作用,一般和甲醛(用于變形RNA)用于RNA變性電泳。26、鹽酸胍:鹽酸胍等可使蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中的氫鍵發(fā)生斷裂,這增加了非極性分子包括氨基酸側(cè)鏈的溶解度,減少了疏水相互作用。27、PMSF:Phenylmethanesulfonyl fluoride,中文名為苯甲基磺酰氟。用于抑制蛋白酶. PMSF嚴(yán)重損害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚,吸入、吞進或通過皮膚吸收后有致命危險。一旦眼睛或皮膚接觸了PMSF,應(yīng)立即用大量水沖洗之。凡被PMSF污染的衣物應(yīng)予丟棄。PMSF在水溶液中不穩(wěn)定。應(yīng)在使用前從貯存液中現(xiàn)用現(xiàn)加于裂解緩沖液中。PMSF在水溶液中的活性喪失速率隨pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。pH值為8.0時,20μmmol/l PMSF水溶液的半壽期大約為85min,這表明將PMSF溶液調(diào)節(jié)為堿性(pH>8.6)并在室溫放置數(shù)小時后,可安全地予以丟棄。
28、溴酚藍:pH指示劑,pH=3.0時呈黃色,pH=4.6時呈藍紫色。酸堿指示劑;非水滴定用指示劑,蛋白電泳染色;病毒化驗等。29、臺盼蘭:臺盼藍(Trypan Blue)或稱臺盼蘭,是細胞活性染料,常用于檢測細胞膜的完整性。30、二甲苯青FF:用于瓊脂糖聚丙烯酰胺凝膠電泳的示蹤染料, 易溶于水和醇,可與溴芬藍按照一定比例配置loading buffer。31、吖啶橙:是一種熒光色素,與細胞中DNA和RNA結(jié)合量存在差別,可發(fā)出不同顏色的熒光,與DNA結(jié)合量少發(fā)綠色熒光,與RNA結(jié)合量多發(fā)桔黃色或桔紅色熒光。該染料具有膜通透性,能透過細胞膜,使核DNA和RNA染色。在熒光顯微鏡下觀察,吖啶橙可透過正常細胞膜,使細胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光;而在凋亡細胞中,因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷,形成凋亡小體。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光,或黃綠色碎片顆粒;而壞死細胞黃熒光減弱甚至消失。吖啶橙AO常與溴化乙啶EB合用雙染,因EB只染死細胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光,由此可區(qū)分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞.它還可以用作移碼突變的誘變劑,能鑲嵌于兩個相鄰的堿基對之間,這樣在DNA復(fù)制過程中,會使DNA鏈增加或缺失一個堿基,造成移碼突變。吖啶橙染液有毒,操作時要戴手套,需避光。32、EDTA和EGTA:EDTA--乙二胺四乙酸EDTA是螯合劑的代表性物質(zhì)。能和堿金屬、稀土元素和過渡金屬等形成穩(wěn)定的水溶性絡(luò)合物。此外EDTA也可用來使有害放射性金屬從人體中迅速排泄起到解毒作用。也是水的處理劑。EGTA--乙二醇雙(2-氨基乙基)四乙酸在Mg2+存在下測定Ca2+時,可用EGTA直接滴定,滴定誤差小于0.3% ,比用EDTA滴定提高了選擇性。此外它與金屬離子形成的配合物的穩(wěn)定性普遍比相應(yīng)的EDTA配合物差。33、TRICINE:N-[三(羥甲基)甲基]甘氨酸, 常見的電泳系統(tǒng)是Tris-甘氨酸系統(tǒng);Tris-Tricine電泳則用于分子量小于10kDa的多肽和蛋白的電泳,能夠獲得較好的分離效果。可以用前者代替。34、PVP40:PVP40 中的CO - N = 有很強的結(jié)合酚類化合物的能力,與其形成穩(wěn)定的復(fù)合物,常用于提取RNA時除去酚類。35、脫氧膽酸鈉:離子型去垢劑,作用有:1、裂解細胞;2、溶解蛋白,尤其是可以溶解一些難溶于水的蛋白,如膜蛋白等;3、很適合做WB,但在Co-IP中使用,需要謹慎。36、6-BA:細胞培養(yǎng)中用到,細胞分裂素。37、碘代乙酰胺:也叫作碘乙酰胺,2-碘乙酰胺。用于有機合成,在蛋白組學(xué)中組氨酸和半胱氨酸的烷基化試劑,用于多肽測序以及酶抑制劑等,蛋白組學(xué)級試劑。38、萘乙酸:NAA,為廣譜性植物生長調(diào)節(jié)劑。可促進細胞分裂,誘導(dǎo)形成不定根,改變雌雄花比例,增加坐果率等39。番紅O與藏紅T:氧化還原指示劑、生物染色、酸堿指示劑,滴定分析亞硝酸鹽。40。TTC:2,3,5-三苯基氯化四氮唑(紅四氮唑),多用于藥物分析和瓊脂糖添加劑,在計數(shù)瓊脂中加入適量的TTC(0.5% TTC 1ML加到100ML瓊脂中),細菌菌落長成紅顏色,對去除食品本底顆粒物干擾非常有意義。