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生化試劑的一些概要:碘化丙啶
生化試劑又叫生化藥品,簡稱試劑。它是工農(nóng)業(yè)、文教衛(wèi)生、科學(xué)研究以及國防建設(shè)等多方面進行化驗分析的重要藥劑。生化試劑是指具有一定純度標(biāo)準(zhǔn)的各種單質(zhì)和化合物(也可以是混合物。要進行任何實驗都離不了試劑,試劑不僅有各種狀態(tài),而且不同的試劑其性能差異很大。有的常溫非常安定、有的通常就很活潑,有的受高溫也不變質(zhì)、有的卻易燃易爆:有的香氣濃烈,有的則劇毒……。只有對生化試劑的有關(guān)知識深入了解,才能安全、順利進行各項實驗。既可保證達到預(yù)期實驗?zāi)康?,又可消除對環(huán)境的污染。因此,首先要知道試劑的分類情況。然后掌握各類試劑的存放和使用。
下面是公司生化試劑產(chǎn)品:碘化丙啶
6-重氮-5-氧代-L-正白氨酸,6-重氮-5-氧代-L-正亮氨酸,DON BR,98% 5毫克 157-03-9 保存:-20℃
25毫克
L(+)硒代蛋氨酸,硒代蛋氨酸,L-(+)-硒代甲硫氨酸,(S)-(+)-2-氨基-4-(甲基硒)丁酸,硒基-L-甲硫氨酸,L-(+)-Selenomethionine BR,98% 1克 3211-76-5 保存:-20℃
5克
DL-硒代蛋氨酸,甲硒丁氨酸,硒代蛋氨酸,DL-硒代甲硫氨酸,硒基-DL-甲硫氨酸,Selenomethionine BR,98% 25毫克 1464-42-2 保存:-20℃
100毫克
S-腺苷蛋氨酸,S-腺甘基蛋氨酸,腺苷蛋氨酸,S-腺苷甲硫胺酸,S-腺苷甲硫氨酸對甲苯磺酸鹽,S-腺甙甲硫氨酸對甲苯磺酸鹽,S-腺苷蛋氨酸對甲苯磺酸鹽,S-腺苷L-蛋氨酸對甲苯磺酸鹽,AdoMet BR,80% 100毫克 17176-17-9 保存:-20℃
500毫克
L-類胱氨酸,L-同型胱氨酸,L-4,4'-二硫雙(2-氨基丁酸),L-高胱氨酸,L-同型半胱氨酸,L-Homocystine BR,98% 1克 626-72-2 RT
5克
L-胱硫醚,(R)-S-(2-氨基-2-羧乙基)-L-半胱氨酸,L-Cystathionine BR,90% 10毫克 56-88-2 保存:-20℃
50毫克
半胱氨酰甘氨酸,H-半胱氨酸-甘氨酸-OH,半胱-甘氨酸,L-半胱氨酸-甘氨酸,Cys-Gly BR,98% 100毫克 19246-18-5 保存:-20℃
500毫克
1克
ε-聚賴氨酸,聚賴氨酸,ε-PL BR,95% 1克 RT
DL-高半胱氨酸硫酸內(nèi)酯鹽酸鹽,DL-高半胱氨酸硫內(nèi)脂鹽酸鹽,DL-高半胱氨酸硫內(nèi)酯鹽酸鹽,混旋-高胱氨酸硫羥乙酮,高半胱氨酸硫內(nèi)酯鹽酸鹽,DL-高半胱氨酸硫醇內(nèi)酯鹽酸鹽,DL-Homocysteine thiolactone hydrochloride BR,98% 25克 6038-19-3 RT
100克
500克
DL-高胱氨酸,DL-4,4ˊ-二硫雙(2-氨基丁酸),DL-類胱氨酸,DL-同型胱氨酸,類硫氨酸,DL-4,4'-二硫二(2-氨基丁酸),DL-Homocystine BR,98% 10克 870-93-9 RT
25克
100克
胰凝乳蛋白酶(牛),α-糜蛋白酶,α-胰凝乳蛋白酶,凝胰朊酶,凝胰蛋白酶,Chymotrypsin(bovine), α-Chymotrypsin(bovine) USP級,1500USP u,mg 1克 CAS:9004-07-3 保存:-20℃
10克
α-淀粉酶(枯草桿菌),中溫淀粉酶,液化型淀粉酶,液化酶,α-1,4糊精酶,細菌性淀粉酶,α-淀粉酵素,糊精化酶 BR,4000u,g 250克 9000-90-2 2~8°C
生物技術(shù)級,50u,mg 1克
高峰α-淀粉酶,高峰淀粉酶,高溫淀粉酶,耐熱α-淀粉酶,淀粉糖化酶,他卡淀粉酶糖化素,α-Amylase from Aspergillus oryzae BR,4000u,g 250克 9001-19-8 2~8°C
生物技術(shù)級,30u,mg 10克
β-淀粉酶,1,4-α-D-葡聚糖麥芽水解酶,糖原酶,糖化淀粉酶,β-Amylase 生物技術(shù)級,17u,mg 25克 9000-91-3 2~8°C
BR,50u,mg 25克
果膠酶,粘膠質(zhì)酶,果膠甲脂酶,聚半乳糖醛酸酶,Pectinase BR,500u,mg 25克 9032-75-1 2~8°C
100克
1公斤
生物技術(shù)級,1u,mg 10克
果膠酶Y-23,Pectolyase Y-23 BR,99% 100毫克 9032-75-1 2~8°C
1克
菠蘿蛋白酶,菠蘿酶,風(fēng)梨酶,菠蘿朊酶,Bromelaine BR,300u,mg 25克 37189-34-7 RT
100克 或9001-00-7
1公斤
生物技術(shù)級,600u,mg 25克
100克
1公斤
木瓜蛋白酶,番木瓜酶,木瓜朊酶,番瓜酵素,木瓜酶,Papain BR,800u,mg 25克 9001-73-4 RT
100克
1公斤
生物技術(shù)級,6000u,mg 100克 2~8°C
酸性蛋白酶,Acidic Protease BR,50u,mg 250克 9025-49-4 2~8°C
中性蛋白酶,分散酶,Neutral protease,Dispase BR,50u,mg 250克 9068-59-1 2~8°C
鏈霉蛋白酶,鏈絲菌蛋白酶,鏈霉菌蛋白酶,Pronase E BR,4000u,mg 250毫克 9036-06-0 保存:-20℃
抗蛋白酶,抗痛素二鹽酸鹽,Antipain dihydrochloride 超純 5毫克 37682-72-7 2~8℃
膽固醇酯酶(豬胰),膽甾醇酯酶(豬胰),Cholesterol esterase 生物技術(shù)級,300u,mg 100u 9026-00-0 保存:-20℃
糖化酶,糖化淀粉酶,淀粉葡萄糖苷酶,葡萄糖淀粉酶,γ-淀粉酶,α-1,4-葡萄糖水解酶,淀粉脫脂酶,Amyloglucosidase from aspergillus niger 10萬u,g 250克 9032-08-0 2~8℃
乙酰輔酶A,乙酰輔酶A鈉鹽,Acetyl CoA BR,93% 5毫克 102029-73-2 保存:-20℃
10毫克
50毫克
葡萄糖氧化酶,GOX,GOD,Glucose oxidase BR,100-250u,mg 10ku 9001-37-0 保存:-20℃
50ku
250ku
D-α-氨基氧化酶,D-氨基酸氧化酶,D-AAO 生物技術(shù)級,0.5u,mg 100毫克 9000-88-8 2~8°C
L-氨基酸氧化酶,L-AAO,TM-LAO,L-amino acid oxidase BR,類型IV,4u,mg 2毫克 9000-89-9 保存:-20℃
5毫克
BR,類型VI,0.2u,mg 100毫克
250毫克
500毫克
己糖激酶,己糖磷酸激酶,HK,Hexokinase from Saccharomyces cerevisiae BR,類型F-300,130u,mg 500u 9001-51-8 保存:-20℃
2500u
BR,類型III,25u,mg 250毫克
1克
胃蛋白酶(豬胃粘膜),胃液素,胃朊酶,蛋白酵素,酸腈酶,百布圣,Pepsin(porcine stomach mucose) USP級,1:30000 25克 9001-75-6 2~8℃
100克
500克
1公斤
高純,1:15000 25克
100克
1公斤
高純,1:10000 25克
100克
1公斤
USP級,1:3000 25克
100克
500克
常用生化試劑作用:
1、蛋白酶K:能水解消化蛋白質(zhì),特別是與DNA結(jié)合的組蛋白,在尿素和SDS中穩(wěn)定。一般工作濃度是50—100μg/ml,推薦反應(yīng)緩沖液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。
2、SDS:十二烷基硫酸鈉,溶解細胞膜上的脂類與蛋白質(zhì),因而溶解膜蛋白而破壞細胞膜,并解離細胞中的核蛋白,SDS 還能與蛋白質(zhì)結(jié)合而沉淀。
3、IPTG:異丙基-β-D-硫代半乳糖苷, 常用于藍白斑篩選及IPTG誘導(dǎo)的細菌內(nèi)的蛋白表達等。IPTG和乳糖的結(jié)構(gòu)相似,所以它和乳糖一樣,可以與乳糖操縱元的阻遏蛋白結(jié)合,使阻遏蛋白的空間構(gòu)像變化,四聚體解聚成單體,失去與操縱子特異性結(jié)合的能力,從而解除了阻遏蛋白的作用,使其后的基因得以轉(zhuǎn)錄合成利用乳糖的酶類。與乳糖不同的是,IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解。常與X-GAL一起用于藍白斑篩選。作用*的誘導(dǎo)劑,不被細菌代謝而十分穩(wěn)定。
4、X-gal:5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,是IPTG的顯色試劑,在IPTG的催化下顯藍色。常跟IPTG一起用與藍白斑篩選。
5、G418:一種抗生素,對幾乎所有的細胞都有毒性,是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染zui常用的選擇試劑。當(dāng)neo基因被整合進真核細胞基因組合適的地方后,則能啟動neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為mRNA,從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的高效表達,使細胞獲得抗性而能在含有G418的選擇性培養(yǎng)基中生長。G418的這一選擇特性 ,已在基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動物等方面得以廣泛應(yīng)用。
6、DMSO:二甲基亞砜。實驗室常用于作液體層析溶劑,同時用作測試物質(zhì)紫外消光值上時用作參照物。能溶于所有烷烴和烯烴。
7、曲拉通X-100:TritonX-100,用的細胞裂解液成分之一,在保護蛋白活性方面有一定作用, 能力介于NP40和SDS之間,偏向于NP40。
8、NP-40:很溫和的去垢劑,1%濃度的基本可以破壞掉胞膜,而對核膜破壞的作用弱,結(jié)合特定的buffer可以獲得胞漿蛋白。
9、BSA:牛血清白蛋白, 主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養(yǎng)作用。在動物細胞無血清培養(yǎng)中,添加白蛋白可起到生理和機械保護作用和載體作用。常用于蛋白定量中的內(nèi)參和抗體稀釋液。
10、甲酰胺: 甲酰胺被用作凝膠電泳中RNA的穩(wěn)定劑,也用于穩(wěn)定毛細管電泳中的變性單股DNA。
11、TEMED:四甲基乙二胺。促凝劑。在中性及堿性pH條件下,加入TEMED可加速凝膠聚合。
12、巰基乙醇:一種強還原劑??蛇€原蛋白二硫鍵,從而使蛋白保持溶解狀態(tài),有利于與SDS的結(jié)合。使蛋白解離成單個亞基。
13、甲叉雙丙烯酰胺:N,N'-甲叉雙丙烯酰胺,別名MBA,又叫亞甲基雙丙烯酰胺,次甲基雙丙烯酰胺,N,N'-甲撐雙丙烯酰胺。作交聯(lián)劑與丙烯酰胺聚合而制備聚丙烯酰胺凝膠。
14、過硫酸銨:過硫酸銨(APS)的作用主要是提供自由基,然后在促凝劑TEMED的作用下使丙烯酰胺及甲叉丙烯酰胺聚合。
15、B27:一種添加劑,用于神經(jīng)肝細胞培養(yǎng),被認(rèn)為具有抑制膠質(zhì)細胞生長的作用。
16、DTT:二硫蘇糖醇,常用還原劑,既有抗氧化作用。它能保護酶分子上的還原性基團,維持還原性環(huán)境,穩(wěn)定酶的活性。又是一種蛋白質(zhì)變性劑,破壞二硫鍵,濃度不同,起到的作用也不同。
17、弗氏不*佐劑和弗氏*佐劑:弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,含結(jié)核分枝桿菌的細胞壁成分。佐劑活性來自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,并刺激局部免疫反應(yīng)。弗氏不*佐劑用于初次免疫刺激。為了減少副作用,不含結(jié)核分枝桿菌成分的弗氏不*佐劑用于加強弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,能夠非常有效的誘導(dǎo)產(chǎn)生高滴度的抗體。弗氏*佐劑含結(jié)核分枝桿菌的細胞壁成分,可以加強對抗原的抗體反應(yīng)。佐劑活性來自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,并刺激局部免疫反應(yīng)。
18、吐溫 20:Tween-20 ,常用的非離子去垢劑。
19、吐溫 80:weenum 80 ,除作乳化劑外,也用作某些水中難溶藥物的增溶劑。
20.、十二烷基肌氨酸鈉 :脫細胞試劑,制備脫細胞組織工程支架材料。21.PVPP:PVPP對片劑具有崩解作用,能和各種不溶于水的藥物共容,能穩(wěn)定化各種懸浮劑,又具有形成絡(luò)合物的能力以及吸附作用等,因而可用作醫(yī)藥助劑。也用于除去啤酒中的多酚。22、PIPES:哌嗪-N,N'-二(2-乙磺酸),實驗室做緩沖劑用。全名是哌嗪-N,N-二(2-乙磺酸),pKa是6.80。不參與也不干擾生物化學(xué)反應(yīng),價格比較貴。常用在免疫和細胞類的實驗中,PIPES有時還被用來制備大腸桿菌感受態(tài)。23、CTAB:十六烷基三乙基溴化銨,一種去污劑,可溶解細胞膜,它能與核酸形成復(fù)合物,在高鹽溶液中((0.7 mol/L NaCl)是可溶的,當(dāng)降低溶液鹽濃度到一定程度(0.3 mol/L NaCl)時,從溶液中沉淀,通過離心就可將CTAB-核酸的復(fù)合物與蛋白,多糖類物質(zhì)分開。zui后通過乙醇或異丙醇沉淀DNA,而CTAB溶于乙醇或異丙醇而除去。CTAB法是現(xiàn)在實驗室zui常用的一種提取核酸的手段。24、HEPES:羥乙基哌秦乙硫磺酸,一種弱酸緩沖劑,主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變化。在開放式培養(yǎng)條件下,培養(yǎng)基脫離了5%CO2的環(huán)境,CO2氣體迅速逸出,pH迅速升高,若加了HEPES,此時可以維持pH7.0左右。一般在進行克隆化培養(yǎng)時要添加HEPES。
25、MOPS:一種緩沖液,有抑制RNA酶的作用,一般和甲醛(用于變形RNA)用于RNA變性電泳。26、鹽酸胍:鹽酸胍等可使蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中的氫鍵發(fā)生斷裂,這增加了非極性分子包括氨基酸側(cè)鏈的溶解度,減少了疏水相互作用。27、PMSF:Phenylmethanesulfonyl fluoride,中文名為苯甲基磺酰氟。用于抑制蛋白酶. PMSF嚴(yán)重?fù)p害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚,吸入、吞進或通過皮膚吸收后有致命危險。一旦眼睛或皮膚接觸了PMSF,應(yīng)立即用大量水沖洗之。凡被PMSF污染的衣物應(yīng)予丟棄。PMSF在水溶液中不穩(wěn)定。應(yīng)在使用前從貯存液中現(xiàn)用現(xiàn)加于裂解緩沖液中。PMSF在水溶液中的活性喪失速率隨pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。pH值為8.0時,20μmmol/l PMSF水溶液的半壽期大約為85min,這表明將PMSF溶液調(diào)節(jié)為堿性(pH>8.6)并在室溫放置數(shù)小時后,可安全地予以丟棄。
28、溴酚藍:pH指示劑,pH=3.0時呈黃色,pH=4.6時呈藍紫色。酸堿指示劑;非水滴定用指示劑,蛋白電泳染色;病毒化驗等。29、臺盼蘭:臺盼藍(Trypan Blue)或稱臺盼蘭,是細胞活性染料,常用于檢測細胞膜的完整性。30、二甲苯青FF:用于瓊脂糖聚丙烯酰胺凝膠電泳的示蹤染料, 易溶于水和醇,可與溴芬藍按照一定比例配置loading buffer。31、吖啶橙:是一種熒光色素,與細胞中DNA和RNA結(jié)合量存在差別,可發(fā)出不同顏色的熒光,與DNA結(jié)合量少發(fā)綠色熒光,與RNA結(jié)合量多發(fā)桔黃色或桔紅色熒光。該染料具有膜通透性,能透過細胞膜,使核DNA和RNA染色。在熒光顯微鏡下觀察,吖啶橙可透過正常細胞膜,使細胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光;而在凋亡細胞中,因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷,形成凋亡小體。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光,或黃綠色碎片顆粒;而壞死細胞黃熒光減弱甚至消失。吖啶橙AO常與溴化乙啶EB合用雙染,因EB只染死細胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光,由此可區(qū)分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞.它還可以用作移碼突變的誘變劑,能鑲嵌于兩個相鄰的堿基對之間,這樣在DNA復(fù)制過程中,會使DNA鏈增加或缺失一個堿基,造成移碼突變。吖啶橙染液有毒,操作時要戴手套,需避光。32、EDTA和EGTA:EDTA--乙二胺四乙酸EDTA是螯合劑的代表性物質(zhì)。能和堿金屬、稀土元素和過渡金屬等形成穩(wěn)定的水溶性絡(luò)合物。此外EDTA也可用來使有害放射性金屬從人體中迅速排泄起到解毒作用。也是水的處理劑。EGTA--乙二醇雙(2-氨基乙基)四乙酸在Mg2+存在下測定Ca2+時,可用EGTA直接滴定,滴定誤差小于0.3% ,比用EDTA滴定提高了選擇性。此外它與金屬離子形成的配合物的穩(wěn)定性普遍比相應(yīng)的EDTA配合物差。33、TRICINE:N-[三(羥甲基)甲基]甘氨酸, 常見的電泳系統(tǒng)是Tris-甘氨酸系統(tǒng);Tris-Tricine電泳則用于分子量小于10kDa的多肽和蛋白的電泳,能夠獲得較好的分離效果??梢杂们罢叽?。34、PVP40:PVP40 中的CO - N = 有很強的結(jié)合酚類化合物的能力,與其形成穩(wěn)定的復(fù)合物,常用于提取RNA時除去酚類。35、脫氧膽酸鈉:離子型去垢劑,作用有:1、裂解細胞;2、溶解蛋白,尤其是可以溶解一些難溶于水的蛋白,如膜蛋白等;3、很適合做WB,但在Co-IP中使用,需要謹(jǐn)慎。36、6-BA:細胞培養(yǎng)中用到,細胞分裂素。37、碘代乙酰胺:也叫作碘乙酰胺,2-碘乙酰胺。用于有機合成,在蛋白組學(xué)中組氨酸和半胱氨酸的烷基化試劑,用于多肽測序以及酶抑制劑等,蛋白組學(xué)級試劑。38、萘乙酸:NAA,為廣譜性植物生長調(diào)節(jié)劑??纱龠M細胞分裂,誘導(dǎo)形成不定根,改變雌雄花比例,增加坐果率等39。番紅O與藏紅T:氧化還原指示劑、生物染色、酸堿指示劑,滴定分析亞硝酸鹽。40。TTC:2,3,5-三苯基氯化四氮唑(紅四氮唑),多用于藥物分析和瓊脂糖添加劑,在計數(shù)瓊脂中加入適量的TTC(0.5% TTC 1ML加到100ML瓊脂中),細菌菌落長成紅顏色,對去除食品本底顆粒物干擾非常有意義。