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生化試劑的一些概要:鈣指示劑
生化試劑又叫生化藥品,簡(jiǎn)稱試劑。它是工農(nóng)業(yè)、文教衛(wèi)生、科學(xué)研究以及國(guó)防建設(shè)等多方面進(jìn)行化驗(yàn)分析的重要藥劑。生化試劑是指具有一定純度標(biāo)準(zhǔn)的各種單質(zhì)和化合物(也可以是混合物。要進(jìn)行任何實(shí)驗(yàn)都離不了試劑,試劑不僅有各種狀態(tài),而且不同的試劑其性能差異很大。有的常溫非常安定、有的通常就很活潑,有的受高溫也不變質(zhì)、有的卻易燃易爆:有的香氣濃烈,有的則劇毒……。只有對(duì)生化試劑的有關(guān)知識(shí)深入了解,才能安全、順利進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。既可保證達(dá)到預(yù)期實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,又可消除?duì)環(huán)境的污染。因此,首先要知道試劑的分類情況。然后掌握各類試劑的存放和使用。
下面是公司生化試劑產(chǎn)品:鈣指示劑
黑色素(水溶),酸性黑2,水溶苯胺灰,水溶尼格洛辛,酸性粒子元,酸性粒子元NBL,酸性皮元NL,酸性粒子元青,二氫吲哚黑,水溶性苯胺黑,Nigrosine water soluble BS 25克 CAS:8005-03-6 RT
黑色素(醇溶),酒精元,油溶黑5,醇溶尼格洛辛,精元,胺黑,醇溶黑,醇黑,醇溶苯胺黑,油溶苯胺黑,醇溶黑色素,Nigrosine alcohol soluble BS 25克 CAS:8005-02-5 RT
變色素2R,變色酸2R,苯偶氮變色酸鈉,鉻變藍(lán)2R,酸性紅29,鉻變酸2R,鉻變素2R,Chromotrope 2R AR 5克 CAS:4197-07-3 RT,避光
變色酸,鉻變酸,1,8-二羥基萘-3,6-二磺酸,4,5-二羥基-2,7-萘二磺酸,比色酸,Chromotropic acid CP 25克 148-25-4 RT,避光
變色酸二鈉鹽,變色酸鈉,1,8-二羥基萘-3,6-二磺酸鈉二水物,4,5-二羥基萘-2,7-二磺酸二鈉鹽二水物,鉻變酸二鈉,Chromotropic acid disodium salt dihydrate 高純,98% 25克 5808-22-0 RT,避光
100克
派洛寧Y,派洛寧G,焦寧Y,吡羅紅Y,吡羅紅G,二苯氧雜已胺G,Pyronin Y 超純 1克 92-32-0 RT
5克
25克
派洛寧B,吡羅紅B,焦寧B,哌羅寧B,氯化-3,6-雙(二乙氨基)呫噸,二苯癢雜芑胺B,二苯氧雜杞胺,派若寧B ,Pyronin B FMP,50% 5克 2150-48-3 RT
25克
高純 5克
25克
地衣紅,苔紅素,苔蘚紅素,地衣素,奧而辛,Orcein FMP 1克 1400-62-0 RT
5克
25克
藏紅T,藏紅O,番紅花紅T,沙黃,堿性藏花紅,藏花紅T,藍(lán)光藏花紅,鹽基桃紅,堿性藏紅T,番紅花紅O,3,7-二氨基-2,8-二甲基-5-苯基酚嗪翁氯化物,3,7-二氨基-2,8-二甲基-5-氯化苯吩嗪,藏花紅O,番紅O,堿性紅2,Safranine T BS 25克 477-73-6 RT
500克
高純,80% 25克
100克
酚紅,苯酚紅,苯酚磺酰酞,苯酚磺酞,3,3-二(對(duì)羥苯基)-3H-2,1-苯并氧硫雜環(huán)戊烷-1,1-二氧化物,酚磺酞,酚酞紅,Phenol red IND 25克 143-74-8 RT
100克
500克
ACS級(jí) 25克
苯酚紅鈉鹽,酚紅鈉,水溶性酚紅鈉鹽,苯酚磺鈦鈉,Phenol red sodium salt 高純 25克 34487-61-1 RT
100克
胭脂紅,蟲(chóng)紅,洋紅,卡紅,胭脂蟲(chóng)紅,7-β-D-吡喃葡萄糖基-3,5,6,8-四羥基-1-甲基-9,10-二氧代-蒽-2-羧酸,胭脂蟲(chóng)粉,洋紅色淀,洋紅酸色淀,Carmine FMP 10克 1390-65-4 RT,避光
固紅TR,固紅-萘磺酸TR,快紅,固紅,快紅TR,4-氯-2-甲基重氮苯 1,5-萘二磺酸鹽,4-氯鄰甲苯胺鹽酸鹽,耐曬紅TR鹽,固紅TR重氮鹽,F(xiàn)ast red TR 高純 1克 51503-28-7 保存:-20℃
5克
固紅片劑,固紅-萘磺酸TR片劑,快紅片劑,快紅TR片劑,F(xiàn)ast red TR Tablets 高純,5,100mg 5片 51503-28-7 2~8℃
25片
固紅RC,固紅RC鹽,耐曬紅RC鹽,F(xiàn)ast red RC salt 色固 25克 68025-25-2 RT,避光
固紅GG鹽,堅(jiān)牢紅鹽,對(duì)硝基苯重氮氟硼酸鹽,對(duì)硝基苯四氟硼酸重氮鹽,4-硝基重氮苯四氟硼酸鹽,F(xiàn)ast red GG salt 色固 10克 456-27-9 2~8℃,避光
BR,4% 50毫升
四氮唑紫,四唑紫,2,5-二苯基-3-(1-萘基)-2H-四唑鎓氯化物,2,5-二苯基-3-(1-萘基)-2H-四唑氯化物,TV 高純,98% 1克 1719-71-7 RT
5克
四氮唑藍(lán),四唑藍(lán),藍(lán)四氮唑,四氮唑蘭,藍(lán)四唑,氯化四唑藍(lán),氯化藍(lán)四氮唑,3,3'-[3,3'-二甲氧基-1,1'-聯(lián)苯-4,4'-二基]-雙(2,5-二苯基-2H-四唑)氯化物,氯化四氮唑蘭,氯化3,3′-[3,3′-甲氧基-(1,1′-二苯基)-4,4′-diyl]-bis(2.5-二苯基-2H-四氮唑),四唑蘭,BTC,BT 高純,95% 1克 1871-22-3 RT,避光
5克
中性紅,堿性紅5,2-甲基-3-氨基-6-二甲氨基二氮雜蒽鹽酸鹽,3-氨基-6-二甲氨基-2-甲基吩嗪鹽酸鹽, N8-3-*基-2,8-吩嗪二胺單鹽酸鹽,奎諾二甲基丁烷,3-氨基-7-二甲基氨基-2-甲基吩嗪鹽酸鹽,Neutral red BS 25克 553-24-2 RT
IND 25克
ACS,50% 25克
100克
甲基紅,甲紅,烷紅,甲烷紅,對(duì)二甲氨基偶氮苯鄰羧酸,酸性紅2,2-[[4-(二甲基氨基)苯基]偶氮基]苯甲酸,MR IND 25克 493-52-7 RT,避光
1公斤
AR 25克
BR 20毫升
甲基紅鈉,甲基紅鈉鹽,2-[4-(二甲基氨基)苯基偶氮]苯甲酸鈉鹽,水溶性甲基紅,對(duì)二甲氨基偶氮苯鄰羧酸鈉,4-二甲氨基偶氮苯-2' -羧酸鈉鹽,Methyl red sodium salt 高純 25克 845-10-3 RT,避光
100克
1公斤
BR,0.02% 100毫升
500毫升
剛果紅,直接剛果紅,煮大紅,棉紅,直接朱紅,直接大紅,二苯基-4,4′-二[(偶氮2)-1-氨基萘-4-磺酸鈉],直接紅28,3,3'-[[1,1'-聯(lián)苯]-4,4'-基雙(偶氮)]雙(4-氨基萘-1-磺酸)二鈉,風(fēng)果紅,直接大紅4B ,Congo red IND 25克 573-58-0 RT
500克
AR,75% 25克
100克
剛果紅試紙,Congo red test paper 100s,盒 5盒 RT
虎紅,玫瑰紅,四氯四碘熒光素,孟加拉紅,孟加拉玫瑰紅B,酸性紅94,Rose Bengal BR,90% 10克 632-69-9 RT,避光
25克
虎紅鈉鹽,四氯四碘熒光素二鈉,孟加拉玫瑰紅B鈉鹽,Rose Bengal Na salt BR,90% 10克 632-69-9 RT,避光
100克
天狼星紅BB,天狼星玫紅BB, 5,5’-[羥基雙[亞氨(2-磺基-4,1-亞苯基)偶氮]]雙(6-氨基-4-羥基)-2-萘磺酸四鈉,直接紅2B,直接紅75,氯唑耐曬桃紅,天狼猩紅BB,Sirius Rose BB AR,30% 5克 2829-43-8 RT,避光
25克
曙紅B,伊紅B,藍(lán)光曙紅,二溴二硝基熒光素二鈉,4',5'-二溴-3',6'-二羥 基-2',7'-二硝基螺(異苯并呋喃-1(3H),9'-(9H)占噸)-3-酮二鈉鹽,酸性紅91,Eosin B BS,85% 25克 548-24-3 RT
常用生化試劑作用:
1、蛋白酶K:能水解消化蛋白質(zhì),特別是與DNA結(jié)合的組蛋白,在尿素和SDS中穩(wěn)定。一般工作濃度是50—100μg/ml,推薦反應(yīng)緩沖液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。
2、SDS:十二烷基硫酸鈉,溶解細(xì)胞膜上的脂類與蛋白質(zhì),因而溶解膜蛋白而破壞細(xì)胞膜,并解離細(xì)胞中的核蛋白,SDS 還能與蛋白質(zhì)結(jié)合而沉淀。
3、IPTG:異丙基-β-D-硫代半乳糖苷, 常用于藍(lán)白斑篩選及IPTG誘導(dǎo)的細(xì)菌內(nèi)的蛋白表達(dá)等。IPTG和乳糖的結(jié)構(gòu)相似,所以它和乳糖一樣,可以與乳糖操縱元的阻遏蛋白結(jié)合,使阻遏蛋白的空間構(gòu)像變化,四聚體解聚成單體,失去與操縱子特異性結(jié)合的能力,從而解除了阻遏蛋白的作用,使其后的基因得以轉(zhuǎn)錄合成利用乳糖的酶類。與乳糖不同的是,IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解。常與X-GAL一起用于藍(lán)白斑篩選。作用*的誘導(dǎo)劑,不被細(xì)菌代謝而十分穩(wěn)定。
4、X-gal:5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,是IPTG的顯色試劑,在IPTG的催化下顯藍(lán)色。常跟IPTG一起用與藍(lán)白斑篩選。
5、G418:一種抗生素,對(duì)幾乎所有的細(xì)胞都有毒性,是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染zui常用的選擇試劑。當(dāng)neo基因被整合進(jìn)真核細(xì)胞基因組合適的地方后,則能啟動(dòng)neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為mRNA,從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的高效表達(dá),使細(xì)胞獲得抗性而能在含有G418的選擇性培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。G418的這一選擇特性 ,已在基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等方面得以廣泛應(yīng)用。
6、DMSO:二甲基亞砜。實(shí)驗(yàn)室常用于作液體層析溶劑,同時(shí)用作測(cè)試物質(zhì)紫外消光值上時(shí)用作參照物。能溶于所有烷烴和烯烴。
7、曲拉通X-100:TritonX-100,用的細(xì)胞裂解液成分之一,在保護(hù)蛋白活性方面有一定作用, 能力介于NP40和SDS之間,偏向于NP40。
8、NP-40:很溫和的去垢劑,1%濃度的基本可以破壞掉胞膜,而對(duì)核膜破壞的作用弱,結(jié)合特定的buffer可以獲得胞漿蛋白。
9、BSA:牛血清白蛋白, 主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營(yíng)養(yǎng)作用。在動(dòng)物細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)中,添加白蛋白可起到生理和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用。常用于蛋白定量中的內(nèi)參和抗體稀釋液。
10、甲酰胺: 甲酰胺被用作凝膠電泳中RNA的穩(wěn)定劑,也用于穩(wěn)定毛細(xì)管電泳中的變性單股DNA。
11、TEMED:四甲基乙二胺。促凝劑。在中性及堿性pH條件下,加入TEMED可加速凝膠聚合。
12、巰基乙醇:一種強(qiáng)還原劑??蛇€原蛋白二硫鍵,從而使蛋白保持溶解狀態(tài),有利于與SDS的結(jié)合。使蛋白解離成單個(gè)亞基。
13、甲叉雙丙烯酰胺:N,N'-甲叉雙丙烯酰胺,別名MBA,又叫亞甲基雙丙烯酰胺,次甲基雙丙烯酰胺,N,N'-甲撐雙丙烯酰胺。作交聯(lián)劑與丙烯酰胺聚合而制備聚丙烯酰胺凝膠。
14、過(guò)硫酸銨:過(guò)硫酸銨(APS)的作用主要是提供自由基,然后在促凝劑TEMED的作用下使丙烯酰胺及甲叉丙烯酰胺聚合。
15、B27:一種添加劑,用于神經(jīng)肝細(xì)胞培養(yǎng),被認(rèn)為具有抑制膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。
16、DTT:二硫蘇糖醇,常用還原劑,既有抗氧化作用。它能保護(hù)酶分子上的還原性基團(tuán),維持還原性環(huán)境,穩(wěn)定酶的活性。又是一種蛋白質(zhì)變性劑,破壞二硫鍵,濃度不同,起到的作用也不同。
17、弗氏不*佐劑和弗氏*佐劑:弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,含結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁成分。佐劑活性來(lái)自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,并刺激局部免疫反應(yīng)。弗氏不*佐劑用于初次免疫刺激。為了減少副作用,不含結(jié)核分枝桿菌成分的弗氏不*佐劑用于加強(qiáng)弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,能夠非常有效的誘導(dǎo)產(chǎn)生高滴度的抗體。弗氏*佐劑含結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁成分,可以加強(qiáng)對(duì)抗原的抗體反應(yīng)。佐劑活性來(lái)自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,并刺激局部免疫反應(yīng)。
18、吐溫 20:Tween-20 ,常用的非離子去垢劑。
19、吐溫 80:weenum 80 ,除作乳化劑外,也用作某些水中難溶藥物的增溶劑。
20.、十二烷基肌氨酸鈉 :脫細(xì)胞試劑,制備脫細(xì)胞組織工程支架材料。21.PVPP:PVPP對(duì)片劑具有崩解作用,能和各種不溶于水的藥物共容,能穩(wěn)定化各種懸浮劑,又具有形成絡(luò)合物的能力以及吸附作用等,因而可用作醫(yī)藥助劑。也用于除去啤酒中的多酚。22、PIPES:哌嗪-N,N'-二(2-乙磺酸),實(shí)驗(yàn)室做緩沖劑用。全名是哌嗪-N,N-二(2-乙磺酸),pKa是6.80。不參與也不干擾生物化學(xué)反應(yīng),價(jià)格比較貴。常用在免疫和細(xì)胞類的實(shí)驗(yàn)中,PIPES有時(shí)還被用來(lái)制備大腸桿菌感受態(tài)。23、CTAB:十六烷基三乙基溴化銨,一種去污劑,可溶解細(xì)胞膜,它能與核酸形成復(fù)合物,在高鹽溶液中((0.7 mol/L NaCl)是可溶的,當(dāng)降低溶液鹽濃度到一定程度(0.3 mol/L NaCl)時(shí),從溶液中沉淀,通過(guò)離心就可將CTAB-核酸的復(fù)合物與蛋白,多糖類物質(zhì)分開(kāi)。zui后通過(guò)乙醇或異丙醇沉淀DNA,而CTAB溶于乙醇或異丙醇而除去。CTAB法是現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室zui常用的一種提取核酸的手段。24、HEPES:羥乙基哌秦乙硫磺酸,一種弱酸緩沖劑,主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變化。在開(kāi)放式培養(yǎng)條件下,培養(yǎng)基脫離了5%CO2的環(huán)境,CO2氣體迅速逸出,pH迅速升高,若加了HEPES,此時(shí)可以維持pH7.0左右。一般在進(jìn)行克隆化培養(yǎng)時(shí)要添加HEPES。
25、MOPS:一種緩沖液,有抑制RNA酶的作用,一般和甲醛(用于變形RNA)用于RNA變性電泳。26、鹽酸胍:鹽酸胍等可使蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中的氫鍵發(fā)生斷裂,這增加了非極性分子包括氨基酸側(cè)鏈的溶解度,減少了疏水相互作用。27、PMSF:Phenylmethanesulfonyl fluoride,中文名為苯甲基磺酰氟。用于抑制蛋白酶. PMSF嚴(yán)重?fù)p害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚,吸入、吞進(jìn)或通過(guò)皮膚吸收后有致命危險(xiǎn)。一旦眼睛或皮膚接觸了PMSF,應(yīng)立即用大量水沖洗之。凡被PMSF污染的衣物應(yīng)予丟棄。PMSF在水溶液中不穩(wěn)定。應(yīng)在使用前從貯存液中現(xiàn)用現(xiàn)加于裂解緩沖液中。PMSF在水溶液中的活性喪失速率隨pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。pH值為8.0時(shí),20μmmol/l PMSF水溶液的半壽期大約為85min,這表明將PMSF溶液調(diào)節(jié)為堿性(pH>8.6)并在室溫放置數(shù)小時(shí)后,可安全地予以丟棄。
28、溴酚藍(lán):pH指示劑,pH=3.0時(shí)呈黃色,pH=4.6時(shí)呈藍(lán)紫色。酸堿指示劑;非水滴定用指示劑,蛋白電泳染色;病毒化驗(yàn)等。29、臺(tái)盼蘭:臺(tái)盼藍(lán)(Trypan Blue)或稱臺(tái)盼蘭,是細(xì)胞活性染料,常用于檢測(cè)細(xì)胞膜的完整性。30、二甲苯青FF:用于瓊脂糖聚丙烯酰胺凝膠電泳的示蹤染料, 易溶于水和醇,可與溴芬藍(lán)按照一定比例配置loading buffer。31、吖啶橙:是一種熒光色素,與細(xì)胞中DNA和RNA結(jié)合量存在差別,可發(fā)出不同顏色的熒光,與DNA結(jié)合量少發(fā)綠色熒光,與RNA結(jié)合量多發(fā)桔黃色或桔紅色熒光。該染料具有膜通透性,能透過(guò)細(xì)胞膜,使核DNA和RNA染色。在熒光顯微鏡下觀察,吖啶橙可透過(guò)正常細(xì)胞膜,使細(xì)胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光;而在凋亡細(xì)胞中,因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷,形成凋亡小體。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光,或黃綠色碎片顆粒;而壞死細(xì)胞黃熒光減弱甚至消失。吖啶橙AO常與溴化乙啶EB合用雙染,因EB只染死細(xì)胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光,由此可區(qū)分出正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞.它還可以用作移碼突變的誘變劑,能鑲嵌于兩個(gè)相鄰的堿基對(duì)之間,這樣在DNA復(fù)制過(guò)程中,會(huì)使DNA鏈增加或缺失一個(gè)堿基,造成移碼突變。吖啶橙染液有毒,操作時(shí)要戴手套,需避光。32、EDTA和EGTA:EDTA--乙二胺四乙酸EDTA是螯合劑的代表性物質(zhì)。能和堿金屬、稀土元素和過(guò)渡金屬等形成穩(wěn)定的水溶性絡(luò)合物。此外EDTA也可用來(lái)使有害放射性金屬?gòu)娜梭w中迅速排泄起到解毒作用。也是水的處理劑。EGTA--乙二醇雙(2-氨基乙基)四乙酸在Mg2+存在下測(cè)定Ca2+時(shí),可用EGTA直接滴定,滴定誤差小于0.3% ,比用EDTA滴定提高了選擇性。此外它與金屬離子形成的配合物的穩(wěn)定性普遍比相應(yīng)的EDTA配合物差。33、TRICINE:N-[三(羥甲基)甲基]甘氨酸, 常見(jiàn)的電泳系統(tǒng)是Tris-甘氨酸系統(tǒng);Tris-Tricine電泳則用于分子量小于10kDa的多肽和蛋白的電泳,能夠獲得較好的分離效果??梢杂们罢叽?。34、PVP40:PVP40 中的CO - N = 有很強(qiáng)的結(jié)合酚類化合物的能力,與其形成穩(wěn)定的復(fù)合物,常用于提取RNA時(shí)除去酚類。35、脫氧膽酸鈉:離子型去垢劑,作用有:1、裂解細(xì)胞;2、溶解蛋白,尤其是可以溶解一些難溶于水的蛋白,如膜蛋白等;3、很適合做WB,但在Co-IP中使用,需要謹(jǐn)慎。36、6-BA:細(xì)胞培養(yǎng)中用到,細(xì)胞分裂素。37、碘代乙酰胺:也叫作碘乙酰胺,2-碘乙酰胺。用于有機(jī)合成,在蛋白組學(xué)中組氨酸和半胱氨酸的烷基化試劑,用于多肽測(cè)序以及酶抑制劑等,蛋白組學(xué)級(jí)試劑。38、萘乙酸:NAA,為廣譜性植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑??纱龠M(jìn)細(xì)胞分裂,誘導(dǎo)形成不定根,改變雌雄花比例,增加坐果率等39。番紅O與藏紅T:氧化還原指示劑、生物染色、酸堿指示劑,滴定分析亞硝酸鹽。40。TTC:2,3,5-三苯基氯化四氮唑(紅四氮唑),多用于藥物分析和瓊脂糖添加劑,在計(jì)數(shù)瓊脂中加入適量的TTC(0.5% TTC 1ML加到100ML瓊脂中),細(xì)菌菌落長(zhǎng)成紅顏色,對(duì)去除食品本底顆粒物干擾非常有意義。