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生化試劑的一些概要:甲酚紅
生化試劑又叫生化藥品,簡(jiǎn)稱(chēng)試劑。它是工農(nóng)業(yè)、文教衛(wèi)生、科學(xué)研究以及國(guó)防建設(shè)等多方面進(jìn)行化驗(yàn)分析的重要藥劑。生化試劑是指具有一定純度標(biāo)準(zhǔn)的各種單質(zhì)和化合物(也可以是混合物。要進(jìn)行任何實(shí)驗(yàn)都離不了試劑,試劑不僅有各種狀態(tài),而且不同的試劑其性能差異很大。有的常溫非常安定、有的通常就很活潑,有的受高溫也不變質(zhì)、有的卻易燃易爆:有的香氣濃烈,有的則劇毒……。只有對(duì)生化試劑的有關(guān)知識(shí)深入了解,才能安全、順利進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。既可保證達(dá)到預(yù)期實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,又可消除?duì)環(huán)境的污染。因此,首先要知道試劑的分類(lèi)情況。然后掌握各類(lèi)試劑的存放和使用。
下面是公司生化試劑產(chǎn)品:甲酚紅
溴百里酚藍(lán)鈉鹽,溴百里香酚藍(lán)鈉,溴百里香酚蘭鈉,溴麝香草酚藍(lán)鈉鹽,3,3′-二溴麝香草酚磺酰酞鈉,3',3''-二溴百里香酚藍(lán)鈉,3,3′-二溴百里酚磺酰酞鈉,3,3'-二溴瑞香草酚磺酞鈉,溴瑞香草酚藍(lán)鈉鹽,Bromothymol blue sodium salt ACS 5克 34722-90-2 RT
25克
考馬斯亮藍(lán)G250,考馬斯亮蘭G250,酸性藍(lán)90,考馬斯亮藍(lán)G,康美賽藍(lán)G250,酸性艷藍(lán)G,亮藍(lán),Coomassie brilliant blue G250 高純 10克 6104-58-1 RT
25克
100克
1公斤
BR 250毫升 2~8℃
考馬斯亮藍(lán)R250,考馬斯亮蘭R250,酸性藍(lán)83,酸性艷藍(lán)6B,考馬斯亮藍(lán)R,考馬斯?fàn)N爛藍(lán),康美賽藍(lán)R250,Coomassie brilliant blue R250 高純,65% 10克 6104-59-2 RT
25克
100克
1公斤
BR 250毫升
噻唑藍(lán),3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四氮唑噻唑藍(lán),噻唑蘭,溴化噻唑藍(lán)四氮唑,3-(4,5-二甲基-2-噻唑基)-2,5-二苯基-2H-四氮唑鎓溴化物,2-(4,5-二甲基-2-噻唑基)-3,5-二苯基-2H-四唑氫溴酸鹽,MTT BR,98% 1克 298-93-1 2~8℃,避光
5克
25克
超純,98% 250毫克
1克
曲利苯藍(lán),臺(tái)盼藍(lán),臺(tái)盼蘭,曲利本蘭,錐蟲(chóng)藍(lán),直接藍(lán)3B,錐藍(lán),直接藍(lán)14,曲利本藍(lán),3,3'-{[3,3'-二甲基-(1,1'-二苯基)-4,4'-二基]雙(偶氮)}-雙(5-氨基-4-羥基-2,7-萘二磺酸)四鈉鹽,錐蟲(chóng)蘭,雙(甲苯基偶氮氨基萘酚二磺酸鈉),Trypan blue AR,60% 5克 72-57-1 RT
25克
100克
500克
二甲苯青FF,酸性藍(lán)147,氰醇二甲苯,Xylene cyanole FF 高純,70% 5克 2650-17-1 RT
二甲苯藍(lán),酸性藍(lán)1,藍(lán)酸1,Xylene blue BR,95% 10克 116-95-0 RT
二甲苯藍(lán)FF,二甲苯花黃FF,二甲苯磺酸,二甲苯苯胺,Xylene cyanole FF 高純,80% 5克 4463-44-9 RT
25克
甲基百里酚藍(lán),甲基百里香酚藍(lán),甲基百里香酚蘭,甲基百里香酚蘭,甲基百里香酚藍(lán)絡(luò)合劑,甲基麝香草酚藍(lán),3,3’-雙[N,N’-二(羥甲基)氨基甲基]百里酚磺酞四鈉鹽,4,7-二苯基-1,10-菲羅啉,N,N’-[3H-2,1-苯并惡硫羥-3-亞基雙[[6-羥基-2-甲基-5-(1-甲基乙基)-3,1-亞苯基]亞甲基]]雙[(N-羧基甲基)甘氨酸]-S,S-二氧化物四鈉鹽,MTB 絡(luò)合IND 5克 1945-77-3 RT,避光
高純,60% 5克
25克
百里酚酞,百里香酚酞,麝香草酚酞,麝香草酚麩,Thymolphthalein IND 10克 125-20-2 RT
100克
百里酚酞絡(luò)合指示劑,百里香酚酞絡(luò)合指示劑,麝香草酚酞絡(luò)合指示劑,百里酚酞氨羧絡(luò)合劑,麝香草酚酞鈉絡(luò)合劑,TPC IND 100毫升 62698-55-9 RT
茜素絡(luò)合指示劑,茜素氨羧絡(luò)合劑,氟試劑,3-茜素甲基胺-N,N-二乙酸,茜素絡(luò)合劑,3-氨基甲基茜素二乙酸,茜素氟藍(lán),茜素氟蘭,3-甲基胺-茜素二乙酸,茜素氟蘭配合物指示劑,N-(羧基甲基)-N-[(9,10-二氫-3,4-二羥基-9,10-二氧代-2-蒽基)甲基]甘氨酸,3-氨基甲基茜素-N,N-二乙酸,Alizarin complexon IND 1克 3952-78-1 RT
對(duì)甲苯胺蘭鈉鹽,對(duì)甲苯胺藍(lán)鈉鹽,5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯鈉鹽,5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸鈉,5-溴-4-氯-3-吲哚氧基磷酸酯二鈉鹽,BCIP, 2Na 超純,98% 100毫克 102185-33-1 保存:-20℃
500毫克
對(duì)甲苯胺蘭,對(duì)甲苯胺藍(lán),5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸酯,5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸鹽,磷酸5-溴-4-氯-3-吲哚酯,BCIP 超純,98% 100毫克 6578-6-9 保存:-20℃
500毫克
1克
BCIP,INT Substrate solution 生物技術(shù)級(jí) 25毫升 2~8℃
100毫升
BCIP,NBT Substrate solution 生物技術(shù)級(jí) 25毫升 2~8℃
阿爾新藍(lán)8GX,阿利新藍(lán)8GX,阿利新蘭8GX,阿爾新蘭8GX,Alcian Blue 8GX 高純,50% 1克 75881-23-1 RT
5克 或33864-99-2
熒光胺,熒胺,弗路蘭,氟路蘭,4-苯基螺[呋喃-2(3H),1-二氫異苯并呋喃]-3,3'-二酮,4-苯基螺-[呋喃-2(3H),1-哌啶]-3,3′-二酮,F(xiàn)luorescamine 生物技術(shù)級(jí),99% 25毫克 38183-12-9 RT
100毫克
500毫克
燦爛甲酚藍(lán),甲酚藍(lán),亮甲苯酚藍(lán),煌焦油藍(lán),亮甲酚藍(lán),Brilliant cresyl bulue FMP 10克 81029-05-2 RT
亮綠,燦爛綠,堿性亮綠,鹽基金沙綠,煌綠,品綠,堿性綠1,鉆石綠,乙基綠,N-[4-[(4-二乙氨基)苯基]苯基亞甲基]-2,5-環(huán)己二烯-1-基亞基-N-乙基乙銨硫酸鹽,鹽基艷綠,堿性艷綠,Brilliant green BS,85% 10克 633-03-4 RT
100克
500克
高純,95% 25克
常用生化試劑作用:
1、蛋白酶K:能水解消化蛋白質(zhì),特別是與DNA結(jié)合的組蛋白,在尿素和SDS中穩(wěn)定。一般工作濃度是50—100μg/ml,推薦反應(yīng)緩沖液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。
2、SDS:十二烷基硫酸鈉,溶解細(xì)胞膜上的脂類(lèi)與蛋白質(zhì),因而溶解膜蛋白而破壞細(xì)胞膜,并解離細(xì)胞中的核蛋白,SDS 還能與蛋白質(zhì)結(jié)合而沉淀。
3、IPTG:異丙基-β-D-硫代半乳糖苷, 常用于藍(lán)白斑篩選及IPTG誘導(dǎo)的細(xì)菌內(nèi)的蛋白表達(dá)等。IPTG和乳糖的結(jié)構(gòu)相似,所以它和乳糖一樣,可以與乳糖操縱元的阻遏蛋白結(jié)合,使阻遏蛋白的空間構(gòu)像變化,四聚體解聚成單體,失去與操縱子特異性結(jié)合的能力,從而解除了阻遏蛋白的作用,使其后的基因得以轉(zhuǎn)錄合成利用乳糖的酶類(lèi)。與乳糖不同的是,IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解。常與X-GAL一起用于藍(lán)白斑篩選。作用*的誘導(dǎo)劑,不被細(xì)菌代謝而十分穩(wěn)定。
4、X-gal:5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,是IPTG的顯色試劑,在IPTG的催化下顯藍(lán)色。常跟IPTG一起用與藍(lán)白斑篩選。
5、G418:一種抗生素,對(duì)幾乎所有的細(xì)胞都有毒性,是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染zui常用的選擇試劑。當(dāng)neo基因被整合進(jìn)真核細(xì)胞基因組合適的地方后,則能啟動(dòng)neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為mRNA,從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的高效表達(dá),使細(xì)胞獲得抗性而能在含有G418的選擇性培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。G418的這一選擇特性 ,已在基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等方面得以廣泛應(yīng)用。
6、DMSO:二甲基亞砜。實(shí)驗(yàn)室常用于作液體層析溶劑,同時(shí)用作測(cè)試物質(zhì)紫外消光值上時(shí)用作參照物。能溶于所有烷烴和烯烴。
7、曲拉通X-100:TritonX-100,用的細(xì)胞裂解液成分之一,在保護(hù)蛋白活性方面有一定作用, 能力介于NP40和SDS之間,偏向于NP40。
8、NP-40:很溫和的去垢劑,1%濃度的基本可以破壞掉胞膜,而對(duì)核膜破壞的作用弱,結(jié)合特定的buffer可以獲得胞漿蛋白。
9、BSA:牛血清白蛋白, 主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營(yíng)養(yǎng)作用。在動(dòng)物細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)中,添加白蛋白可起到生理和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用。常用于蛋白定量中的內(nèi)參和抗體稀釋液。
10、甲酰胺: 甲酰胺被用作凝膠電泳中RNA的穩(wěn)定劑,也用于穩(wěn)定毛細(xì)管電泳中的變性單股DNA。
11、TEMED:四甲基乙二胺。促凝劑。在中性及堿性pH條件下,加入TEMED可加速凝膠聚合。
12、巰基乙醇:一種強(qiáng)還原劑??蛇€原蛋白二硫鍵,從而使蛋白保持溶解狀態(tài),有利于與SDS的結(jié)合。使蛋白解離成單個(gè)亞基。
13、甲叉雙丙烯酰胺:N,N'-甲叉雙丙烯酰胺,別名MBA,又叫亞甲基雙丙烯酰胺,次甲基雙丙烯酰胺,N,N'-甲撐雙丙烯酰胺。作交聯(lián)劑與丙烯酰胺聚合而制備聚丙烯酰胺凝膠。
14、過(guò)硫酸銨:過(guò)硫酸銨(APS)的作用主要是提供自由基,然后在促凝劑TEMED的作用下使丙烯酰胺及甲叉丙烯酰胺聚合。
15、B27:一種添加劑,用于神經(jīng)肝細(xì)胞培養(yǎng),被認(rèn)為具有抑制膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。
16、DTT:二硫蘇糖醇,常用還原劑,既有抗氧化作用。它能保護(hù)酶分子上的還原性基團(tuán),維持還原性環(huán)境,穩(wěn)定酶的活性。又是一種蛋白質(zhì)變性劑,破壞二硫鍵,濃度不同,起到的作用也不同。
17、弗氏不*佐劑和弗氏*佐劑:弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,含結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁成分。佐劑活性來(lái)自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,并刺激局部免疫反應(yīng)。弗氏不*佐劑用于初次免疫刺激。為了減少副作用,不含結(jié)核分枝桿菌成分的弗氏不*佐劑用于加強(qiáng)弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,能夠非常有效的誘導(dǎo)產(chǎn)生高滴度的抗體。弗氏*佐劑含結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁成分,可以加強(qiáng)對(duì)抗原的抗體反應(yīng)。佐劑活性來(lái)自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,并刺激局部免疫反應(yīng)。
18、吐溫 20:Tween-20 ,常用的非離子去垢劑。
19、吐溫 80:weenum 80 ,除作乳化劑外,也用作某些水中難溶藥物的增溶劑。
20.、十二烷基肌氨酸鈉 :脫細(xì)胞試劑,制備脫細(xì)胞組織工程支架材料。21.PVPP:PVPP對(duì)片劑具有崩解作用,能和各種不溶于水的藥物共容,能穩(wěn)定化各種懸浮劑,又具有形成絡(luò)合物的能力以及吸附作用等,因而可用作醫(yī)藥助劑。也用于除去啤酒中的多酚。22、PIPES:哌嗪-N,N'-二(2-乙磺酸),實(shí)驗(yàn)室做緩沖劑用。全名是哌嗪-N,N-二(2-乙磺酸),pKa是6.80。不參與也不干擾生物化學(xué)反應(yīng),價(jià)格比較貴。常用在免疫和細(xì)胞類(lèi)的實(shí)驗(yàn)中,PIPES有時(shí)還被用來(lái)制備大腸桿菌感受態(tài)。23、CTAB:十六烷基三乙基溴化銨,一種去污劑,可溶解細(xì)胞膜,它能與核酸形成復(fù)合物,在高鹽溶液中((0.7 mol/L NaCl)是可溶的,當(dāng)降低溶液鹽濃度到一定程度(0.3 mol/L NaCl)時(shí),從溶液中沉淀,通過(guò)離心就可將CTAB-核酸的復(fù)合物與蛋白,多糖類(lèi)物質(zhì)分開(kāi)。zui后通過(guò)乙醇或異丙醇沉淀DNA,而CTAB溶于乙醇或異丙醇而除去。CTAB法是現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室zui常用的一種提取核酸的手段。24、HEPES:羥乙基哌秦乙硫磺酸,一種弱酸緩沖劑,主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變化。在開(kāi)放式培養(yǎng)條件下,培養(yǎng)基脫離了5%CO2的環(huán)境,CO2氣體迅速逸出,pH迅速升高,若加了HEPES,此時(shí)可以維持pH7.0左右。一般在進(jìn)行克隆化培養(yǎng)時(shí)要添加HEPES。
25、MOPS:一種緩沖液,有抑制RNA酶的作用,一般和甲醛(用于變形RNA)用于RNA變性電泳。26、鹽酸胍:鹽酸胍等可使蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中的氫鍵發(fā)生斷裂,這增加了非極性分子包括氨基酸側(cè)鏈的溶解度,減少了疏水相互作用。27、PMSF:Phenylmethanesulfonyl fluoride,中文名為苯甲基磺酰氟。用于抑制蛋白酶. PMSF嚴(yán)重?fù)p害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚,吸入、吞進(jìn)或通過(guò)皮膚吸收后有致命危險(xiǎn)。一旦眼睛或皮膚接觸了PMSF,應(yīng)立即用大量水沖洗之。凡被PMSF污染的衣物應(yīng)予丟棄。PMSF在水溶液中不穩(wěn)定。應(yīng)在使用前從貯存液中現(xiàn)用現(xiàn)加于裂解緩沖液中。PMSF在水溶液中的活性喪失速率隨pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。pH值為8.0時(shí),20μmmol/l PMSF水溶液的半壽期大約為85min,這表明將PMSF溶液調(diào)節(jié)為堿性(pH>8.6)并在室溫放置數(shù)小時(shí)后,可安全地予以丟棄。
28、溴酚藍(lán):pH指示劑,pH=3.0時(shí)呈黃色,pH=4.6時(shí)呈藍(lán)紫色。酸堿指示劑;非水滴定用指示劑,蛋白電泳染色;病毒化驗(yàn)等。29、臺(tái)盼蘭:臺(tái)盼藍(lán)(Trypan Blue)或稱(chēng)臺(tái)盼蘭,是細(xì)胞活性染料,常用于檢測(cè)細(xì)胞膜的完整性。30、二甲苯青FF:用于瓊脂糖聚丙烯酰胺凝膠電泳的示蹤染料, 易溶于水和醇,可與溴芬藍(lán)按照一定比例配置loading buffer。31、吖啶橙:是一種熒光色素,與細(xì)胞中DNA和RNA結(jié)合量存在差別,可發(fā)出不同顏色的熒光,與DNA結(jié)合量少發(fā)綠色熒光,與RNA結(jié)合量多發(fā)桔黃色或桔紅色熒光。該染料具有膜通透性,能透過(guò)細(xì)胞膜,使核DNA和RNA染色。在熒光顯微鏡下觀察,吖啶橙可透過(guò)正常細(xì)胞膜,使細(xì)胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光;而在凋亡細(xì)胞中,因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷,形成凋亡小體。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光,或黃綠色碎片顆粒;而壞死細(xì)胞黃熒光減弱甚至消失。吖啶橙AO常與溴化乙啶EB合用雙染,因EB只染死細(xì)胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光,由此可區(qū)分出正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞.它還可以用作移碼突變的誘變劑,能鑲嵌于兩個(gè)相鄰的堿基對(duì)之間,這樣在DNA復(fù)制過(guò)程中,會(huì)使DNA鏈增加或缺失一個(gè)堿基,造成移碼突變。吖啶橙染液有毒,操作時(shí)要戴手套,需避光。32、EDTA和EGTA:EDTA--乙二胺四乙酸EDTA是螯合劑的代表性物質(zhì)。能和堿金屬、稀土元素和過(guò)渡金屬等形成穩(wěn)定的水溶性絡(luò)合物。此外EDTA也可用來(lái)使有害放射性金屬?gòu)娜梭w中迅速排泄起到解毒作用。也是水的處理劑。EGTA--乙二醇雙(2-氨基乙基)四乙酸在Mg2+存在下測(cè)定Ca2+時(shí),可用EGTA直接滴定,滴定誤差小于0.3% ,比用EDTA滴定提高了選擇性。此外它與金屬離子形成的配合物的穩(wěn)定性普遍比相應(yīng)的EDTA配合物差。33、TRICINE:N-[三(羥甲基)甲基]甘氨酸, 常見(jiàn)的電泳系統(tǒng)是Tris-甘氨酸系統(tǒng);Tris-Tricine電泳則用于分子量小于10kDa的多肽和蛋白的電泳,能夠獲得較好的分離效果。可以用前者代替。34、PVP40:PVP40 中的CO - N = 有很強(qiáng)的結(jié)合酚類(lèi)化合物的能力,與其形成穩(wěn)定的復(fù)合物,常用于提取RNA時(shí)除去酚類(lèi)。35、脫氧膽酸鈉:離子型去垢劑,作用有:1、裂解細(xì)胞;2、溶解蛋白,尤其是可以溶解一些難溶于水的蛋白,如膜蛋白等;3、很適合做WB,但在Co-IP中使用,需要謹(jǐn)慎。36、6-BA:細(xì)胞培養(yǎng)中用到,細(xì)胞分裂素。37、碘代乙酰胺:也叫作碘乙酰胺,2-碘乙酰胺。用于有機(jī)合成,在蛋白組學(xué)中組氨酸和半胱氨酸的烷基化試劑,用于多肽測(cè)序以及酶抑制劑等,蛋白組學(xué)級(jí)試劑。38、萘乙酸:NAA,為廣譜性植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。可促進(jìn)細(xì)胞分裂,誘導(dǎo)形成不定根,改變雌雄花比例,增加坐果率等39。番紅O與藏紅T:氧化還原指示劑、生物染色、酸堿指示劑,滴定分析亞硝酸鹽。40。TTC:2,3,5-三苯基氯化四氮唑(紅四氮唑),多用于藥物分析和瓊脂糖添加劑,在計(jì)數(shù)瓊脂中加入適量的TTC(0.5% TTC 1ML加到100ML瓊脂中),細(xì)菌菌落長(zhǎng)成紅顏色,對(duì)去除食品本底顆粒物干擾非常有意義。