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生化試劑的一些概要:尼羅紅
生化試劑又叫生化藥品,簡(jiǎn)稱試劑。它是工農(nóng)業(yè)、文教衛(wèi)生、科學(xué)研究以及國(guó)防建設(shè)等多方面進(jìn)行化驗(yàn)分析的重要藥劑。生化試劑是指具有一定純度標(biāo)準(zhǔn)的各種單質(zhì)和化合物(也可以是混合物。要進(jìn)行任何實(shí)驗(yàn)都離不了試劑,試劑不僅有各種狀態(tài),而且不同的試劑其性能差異很大。有的常溫非常安定、有的通常就很活潑,有的受高溫也不變質(zhì)、有的卻易燃易爆:有的香氣濃烈,有的則劇毒……。只有對(duì)生化試劑的有關(guān)知識(shí)深入了解,才能安全、順利進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。既可保證達(dá)到預(yù)期實(shí)驗(yàn)?zāi)康模挚上龑?duì)環(huán)境的污染。因此,首先要知道試劑的分類情況。然后掌握各類試劑的存放和使用。
下面是公司生化試劑產(chǎn)品:尼羅紅
N-乙基順丁烯二酰亞胺,1-乙基-1H-吡咯-2,5-二酮,N-乙基失水蘋果酰亞胺,N-乙基馬來酰亞胺,NEMI,NEM BR,98% 5克 128-53-0 2~8℃,避光
N-羥基-5-降冰片烯-2,3-二甲酰亞胺,N-羥基-5-降冰片稀-2,3-二酰亞胺,N-羥基5-降冰片烯-2,3-二羥基亞胺,N-羥基-5-降冰片烯-2,3-酰亞胺,N-羥基-5-降冰片烯-2,3-二羧酸酰亞胺,HONB BR,98% 5克 21715-90-2 RT
25克
N-溴代丁二酰亞胺,N-溴代琥珀酰亞胺,溴丁二酰亞胺,NBS AR,99% 100克 128-08-5 RT
磷脂酰乙醇胺,乙醇胺磷酸甘油酯,腦磷脂,L-α-磷酯酰乙醇胺,1,2-二脂酰-sn-甘油-3-磷酸-O-乙醇胺,3-Sn-磷脂酰乙醇胺,PE,Cephalin BR,98% 1克 39382-08-6 2~8℃
5克 或90989-93-8
25克
N,N,N,N-四甲基乙二胺,四甲替乙二胺,四甲基乙撐二胺,N,N,N’,N’-四甲基-1,2-乙二胺,1,2-雙(二甲氨基),1,2-雙(二甲基氨基)乙烷,四甲基-1,2-亞乙基二胺,TEMED,TMEDA BR,98% 100毫升 110-18-9 RT,避光
500毫升
BR,98% 25克 536-46-9 RT,避光
鈦酸四異丙酯,鈦酸異丙酯,四異丙基鈦酸酯,原鈦酸四異丙酯,異丙氧基鈦(IV) ,2-丙醇鈦鹽,四異丙氧基鈦,四異丙醇鈦,TPT BR,78.8% 100毫升 546-68-9 RT
500毫升
N,N,N,N-四甲基對(duì)苯二胺二鹽酸鹽,二鹽酸四甲基對(duì)苯二胺,N,N,N',N'-四甲基-1,4-苯二胺二鹽酸鹽,二鹽酸-4-氨基-N,N-二乙基苯胺,二鹽酸N,N,N',N'-四甲基-1,4-苯二胺,TMPD BR,98% 5克 637-01-4 RT,避光
對(duì)苯二胺,P-苯二胺,1,4-苯二胺,對(duì)二氨基苯,1,4-二氨基苯,烏爾絲D,C.I.氧化顯色堿10,毛皮黑D,毛皮元D,烏爾絲黑D,烏爾茲D,p-Phenylenediamine CP,98.5% 100克 106-50-3 RT,避光
對(duì)苯二胺鹽酸鹽,鹽酸對(duì)苯二胺,1,4-苯二胺鹽酸,鹽酸對(duì)二氨基苯,1,4-二氨基苯二鹽酸鹽,1,4-Phenylenediamine dihydrochloride AR,98.5% 25克 624-18-0 RT,避光
氯胺T,氯亞明T,氯氨基甲苯砜鈉,對(duì)甲苯磺酰氯胺鈉,N-氯-4-甲苯磺酰胺鈉鹽,Chloramine T trihydrate AR,99% 500克 7080-50-4 RT,避光
1-(3-二甲基胺丙基)-3-乙基碳二亞胺,1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺,1-(3-二甲基氨丙基)-3-乙基碳二胺,1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺,1-(3-二甲基氨丙基)-3-乙基碳酰亞胺,EDC,WSC 特純,98% 5克 1892-57-5 保存:-20℃
25克
1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亞胺鹽酸鹽,1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽,1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽,1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽,1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽,EDC•HC1,EDAC•HC1 特純,99% 1克 25952-53-8 2~8℃
10克
25克
100克
500克
酚酞單磷酸環(huán)己胺鹽,酚酞單磷酸二環(huán)己胺鹽,酚酞磷酸雙環(huán)己烷銨鹽,Phenolphthalein monophosphate bis(cyclohexylammonium) salt BR,90% 1克 14815-59-9 保存:-20℃
鹽酸萘乙二胺,1-萘乙二胺二鹽酸鹽,α-萘乙二胺鹽酸鹽,鹽酸-1-萘乙二胺,N-(1-萘基)乙二胺二鹽酸鹽,N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽,二鹽酸鹽-1-萘乙二胺, N-(1-Naphthyl)ethylenediamine AR,98% 10克 1465-25-4 RT,避光
聚丙烯酰胺,三號(hào)凝聚劑,雙丙酮丙烯酰胺235溶液,絮凝劑3號(hào),PAM,PHⅢ BR,MV>300萬 250克 CAS:9003-05-8 RT
BR,MV>1000萬 1公斤
苯甲酰胺,苯酰胺,Benzamide CP 25克 55-21-0 RT
聚乙烯亞胺,聚乙醇胺,氮丙啶均聚物,聚乙烯亞氨,PEI 50%,粉末 100克 9002-98-6 RT
BR,99%,分子量600,液體 25克
100克
BR,99%,分子量1800,液體 25克
100克
BR,99%,分子量10000,液體 25克
100克
BR,50%,分子量60-100萬,液體 100毫升
BR,50%,分子量70000,液體 25克
100克
BR,50%,分子量6-75萬,液體 100毫升
BR,50%,分子量1800-2000,液體 250毫升
BR,50%,分子量1200-1300,液體 100毫升
AR,99% 250克 106-49-0 RT,避光
對(duì)甲苯胺鹽酸鹽,鹽酸對(duì)甲苯胺,鹽酸-4-甲苯胺,4-甲苯胺鹽酸鹽,4-Methylaniline hydrochloride 超純,99% 25克 540-23-8 RT
100克
苯胺鹽酸鹽,阿尼林鹽,鹽酸苯胺,羥基苯胺,羥基氯苯胺,Aniline hydrochloride AR,99.5% 250克 142-04-1 RT,避光
聯(lián)苯胺,對(duì)二氨基聯(lián)苯,4,4′-二氨基聯(lián)苯, (1,1'-二苯基)-4,4'-二胺,4,4'-聯(lián)苯二胺,Benzidine AR,99.5% 25克 92-87-5 RT,避光
聯(lián)苯胺鹽酸鹽,二鹽酸聯(lián)苯胺,聯(lián)苯胺二鹽酸鹽,鹽酸聯(lián)苯胺,4,4′-二氨基聯(lián)苯鹽酸鹽,(1,1'-聯(lián)苯)-4,4'-二胺二鹽酸鹽,鹽酸-4,4'-二氨基聯(lián)苯,Benzidine dihydrochloride AR,99% 25克 531-85-1 RT,避光
聯(lián)苯胺硫酸鹽,硫酸聯(lián)苯胺,聯(lián)苯胺化硫酸,硫酸-4,4′-二氨基聯(lián)苯,Benzidine sulfate AR,99% 25克 531-86-2 RT,避光
乙二胺鹽酸鹽,鹽酸乙二胺,乙二胺二鹽酸鹽,鹽酸二氨基乙烷,乙撐二胺二鹽酸鹽,1,2-乙二胺二鹽酸鹽,二鹽酸乙二胺,Ethylenediamine dihydrochloride AR,99.5% 100克 333-18-6 RT
六亞甲基四胺,海克山明,烏洛托品,促進(jìn)劑H,胺仿,四氮六甲環(huán),促進(jìn)劑H??松?,六胺,1,3,5,7-四氮雜三環(huán)[3.3.1.13]癸烷,六甲撐四胺,四氮六甲環(huán),Hexamethylenetetramine AR,99% 500克 100-97-0 RT
鹽酸羥胺,氯化羥胺,氫氯羥胺,羥基氯化銨,鹽酸胲,羥基氯化胺,羥胺酸,羥胺鹽酸,Hydroxylammonium chloride AR,98.5% 100克 5470-11-1 RT
鹽酸三乙醇胺,三乙醇胺鹽酸鹽,2,2',2''-次氮基三乙醇鹽酸鹽,Triethanolamine hydrochloride CP,99% 100克 637-39-8 RT,避光
乙酰胺,醋酰胺,Acetamide AR,98.5% 500克 60-35-5 RT
乙?;阴1桨?,N-乙?;阴1桨罚?-氧-N-苯基丁酰胺,3-氧代-N-苯基丁酰胺,α-乙酰代乙酰苯胺,乙酰代乙酰苯胺, N-乙酰乙酰苯胺,3-氧代-N-苯基丁酰胺,AAA,Acetoacetanilide CP,98% 250克 102-01-2 RT
常用生化試劑作用:
1、蛋白酶K:能水解消化蛋白質(zhì),特別是與DNA結(jié)合的組蛋白,在尿素和SDS中穩(wěn)定。一般工作濃度是50—100μg/ml,推薦反應(yīng)緩沖液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。
2、SDS:十二烷基硫酸鈉,溶解細(xì)胞膜上的脂類與蛋白質(zhì),因而溶解膜蛋白而破壞細(xì)胞膜,并解離細(xì)胞中的核蛋白,SDS 還能與蛋白質(zhì)結(jié)合而沉淀。
3、IPTG:異丙基-β-D-硫代半乳糖苷, 常用于藍(lán)白斑篩選及IPTG誘導(dǎo)的細(xì)菌內(nèi)的蛋白表達(dá)等。IPTG和乳糖的結(jié)構(gòu)相似,所以它和乳糖一樣,可以與乳糖操縱元的阻遏蛋白結(jié)合,使阻遏蛋白的空間構(gòu)像變化,四聚體解聚成單體,失去與操縱子特異性結(jié)合的能力,從而解除了阻遏蛋白的作用,使其后的基因得以轉(zhuǎn)錄合成利用乳糖的酶類。與乳糖不同的是,IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解。常與X-GAL一起用于藍(lán)白斑篩選。作用*的誘導(dǎo)劑,不被細(xì)菌代謝而十分穩(wěn)定。
4、X-gal:5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,是IPTG的顯色試劑,在IPTG的催化下顯藍(lán)色。常跟IPTG一起用與藍(lán)白斑篩選。
5、G418:一種抗生素,對(duì)幾乎所有的細(xì)胞都有毒性,是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染zui常用的選擇試劑。當(dāng)neo基因被整合進(jìn)真核細(xì)胞基因組合適的地方后,則能啟動(dòng)neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為mRNA,從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的高效表達(dá),使細(xì)胞獲得抗性而能在含有G418的選擇性培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。G418的這一選擇特性 ,已在基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等方面得以廣泛應(yīng)用。
6、DMSO:二甲基亞砜。實(shí)驗(yàn)室常用于作液體層析溶劑,同時(shí)用作測(cè)試物質(zhì)紫外消光值上時(shí)用作參照物。能溶于所有烷烴和烯烴。
7、曲拉通X-100:TritonX-100,用的細(xì)胞裂解液成分之一,在保護(hù)蛋白活性方面有一定作用, 能力介于NP40和SDS之間,偏向于NP40。
8、NP-40:很溫和的去垢劑,1%濃度的基本可以破壞掉胞膜,而對(duì)核膜破壞的作用弱,結(jié)合特定的buffer可以獲得胞漿蛋白。
9、BSA:牛血清白蛋白, 主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營(yíng)養(yǎng)作用。在動(dòng)物細(xì)胞無血清培養(yǎng)中,添加白蛋白可起到生理和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用。常用于蛋白定量中的內(nèi)參和抗體稀釋液。
10、甲酰胺: 甲酰胺被用作凝膠電泳中RNA的穩(wěn)定劑,也用于穩(wěn)定毛細(xì)管電泳中的變性單股DNA。
11、TEMED:四甲基乙二胺。促凝劑。在中性及堿性pH條件下,加入TEMED可加速凝膠聚合。
12、巰基乙醇:一種強(qiáng)還原劑。可還原蛋白二硫鍵,從而使蛋白保持溶解狀態(tài),有利于與SDS的結(jié)合。使蛋白解離成單個(gè)亞基。
13、甲叉雙丙烯酰胺:N,N'-甲叉雙丙烯酰胺,別名MBA,又叫亞甲基雙丙烯酰胺,次甲基雙丙烯酰胺,N,N'-甲撐雙丙烯酰胺。作交聯(lián)劑與丙烯酰胺聚合而制備聚丙烯酰胺凝膠。
14、過硫酸銨:過硫酸銨(APS)的作用主要是提供自由基,然后在促凝劑TEMED的作用下使丙烯酰胺及甲叉丙烯酰胺聚合。
15、B27:一種添加劑,用于神經(jīng)肝細(xì)胞培養(yǎng),被認(rèn)為具有抑制膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。
16、DTT:二硫蘇糖醇,常用還原劑,既有抗氧化作用。它能保護(hù)酶分子上的還原性基團(tuán),維持還原性環(huán)境,穩(wěn)定酶的活性。又是一種蛋白質(zhì)變性劑,破壞二硫鍵,濃度不同,起到的作用也不同。
17、弗氏不*佐劑和弗氏*佐劑:弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,含結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁成分。佐劑活性來自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,并刺激局部免疫反應(yīng)。弗氏不*佐劑用于初次免疫刺激。為了減少副作用,不含結(jié)核分枝桿菌成分的弗氏不*佐劑用于加強(qiáng)弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,能夠非常有效的誘導(dǎo)產(chǎn)生高滴度的抗體。弗氏*佐劑含結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁成分,可以加強(qiáng)對(duì)抗原的抗體反應(yīng)。佐劑活性來自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,并刺激局部免疫反應(yīng)。
18、吐溫 20:Tween-20 ,常用的非離子去垢劑。
19、吐溫 80:weenum 80 ,除作乳化劑外,也用作某些水中難溶藥物的增溶劑。
20.、十二烷基肌氨酸鈉 :脫細(xì)胞試劑,制備脫細(xì)胞組織工程支架材料。21.PVPP:PVPP對(duì)片劑具有崩解作用,能和各種不溶于水的藥物共容,能穩(wěn)定化各種懸浮劑,又具有形成絡(luò)合物的能力以及吸附作用等,因而可用作醫(yī)藥助劑。也用于除去啤酒中的多酚。22、PIPES:哌嗪-N,N'-二(2-乙磺酸),實(shí)驗(yàn)室做緩沖劑用。全名是哌嗪-N,N-二(2-乙磺酸),pKa是6.80。不參與也不干擾生物化學(xué)反應(yīng),價(jià)格比較貴。常用在免疫和細(xì)胞類的實(shí)驗(yàn)中,PIPES有時(shí)還被用來制備大腸桿菌感受態(tài)。23、CTAB:十六烷基三乙基溴化銨,一種去污劑,可溶解細(xì)胞膜,它能與核酸形成復(fù)合物,在高鹽溶液中((0.7 mol/L NaCl)是可溶的,當(dāng)降低溶液鹽濃度到一定程度(0.3 mol/L NaCl)時(shí),從溶液中沉淀,通過離心就可將CTAB-核酸的復(fù)合物與蛋白,多糖類物質(zhì)分開。zui后通過乙醇或異丙醇沉淀DNA,而CTAB溶于乙醇或異丙醇而除去。CTAB法是現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室zui常用的一種提取核酸的手段。24、HEPES:羥乙基哌秦乙硫磺酸,一種弱酸緩沖劑,主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變化。在開放式培養(yǎng)條件下,培養(yǎng)基脫離了5%CO2的環(huán)境,CO2氣體迅速逸出,pH迅速升高,若加了HEPES,此時(shí)可以維持pH7.0左右。一般在進(jìn)行克隆化培養(yǎng)時(shí)要添加HEPES。
25、MOPS:一種緩沖液,有抑制RNA酶的作用,一般和甲醛(用于變形RNA)用于RNA變性電泳。26、鹽酸胍:鹽酸胍等可使蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中的氫鍵發(fā)生斷裂,這增加了非極性分子包括氨基酸側(cè)鏈的溶解度,減少了疏水相互作用。27、PMSF:Phenylmethanesulfonyl fluoride,中文名為苯甲基磺酰氟。用于抑制蛋白酶. PMSF嚴(yán)重?fù)p害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚,吸入、吞進(jìn)或通過皮膚吸收后有致命危險(xiǎn)。一旦眼睛或皮膚接觸了PMSF,應(yīng)立即用大量水沖洗之。凡被PMSF污染的衣物應(yīng)予丟棄。PMSF在水溶液中不穩(wěn)定。應(yīng)在使用前從貯存液中現(xiàn)用現(xiàn)加于裂解緩沖液中。PMSF在水溶液中的活性喪失速率隨pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。pH值為8.0時(shí),20μmmol/l PMSF水溶液的半壽期大約為85min,這表明將PMSF溶液調(diào)節(jié)為堿性(pH>8.6)并在室溫放置數(shù)小時(shí)后,可安全地予以丟棄。
28、溴酚藍(lán):pH指示劑,pH=3.0時(shí)呈黃色,pH=4.6時(shí)呈藍(lán)紫色。酸堿指示劑;非水滴定用指示劑,蛋白電泳染色;病毒化驗(yàn)等。29、臺(tái)盼蘭:臺(tái)盼藍(lán)(Trypan Blue)或稱臺(tái)盼蘭,是細(xì)胞活性染料,常用于檢測(cè)細(xì)胞膜的完整性。30、二甲苯青FF:用于瓊脂糖聚丙烯酰胺凝膠電泳的示蹤染料, 易溶于水和醇,可與溴芬藍(lán)按照一定比例配置loading buffer。31、吖啶橙:是一種熒光色素,與細(xì)胞中DNA和RNA結(jié)合量存在差別,可發(fā)出不同顏色的熒光,與DNA結(jié)合量少發(fā)綠色熒光,與RNA結(jié)合量多發(fā)桔黃色或桔紅色熒光。該染料具有膜通透性,能透過細(xì)胞膜,使核DNA和RNA染色。在熒光顯微鏡下觀察,吖啶橙可透過正常細(xì)胞膜,使細(xì)胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光;而在凋亡細(xì)胞中,因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷,形成凋亡小體。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光,或黃綠色碎片顆粒;而壞死細(xì)胞黃熒光減弱甚至消失。吖啶橙AO常與溴化乙啶EB合用雙染,因EB只染死細(xì)胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光,由此可區(qū)分出正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞.它還可以用作移碼突變的誘變劑,能鑲嵌于兩個(gè)相鄰的堿基對(duì)之間,這樣在DNA復(fù)制過程中,會(huì)使DNA鏈增加或缺失一個(gè)堿基,造成移碼突變。吖啶橙染液有毒,操作時(shí)要戴手套,需避光。32、EDTA和EGTA:EDTA--乙二胺四乙酸EDTA是螯合劑的代表性物質(zhì)。能和堿金屬、稀土元素和過渡金屬等形成穩(wěn)定的水溶性絡(luò)合物。此外EDTA也可用來使有害放射性金屬?gòu)娜梭w中迅速排泄起到解毒作用。也是水的處理劑。EGTA--乙二醇雙(2-氨基乙基)四乙酸在Mg2+存在下測(cè)定Ca2+時(shí),可用EGTA直接滴定,滴定誤差小于0.3% ,比用EDTA滴定提高了選擇性。此外它與金屬離子形成的配合物的穩(wěn)定性普遍比相應(yīng)的EDTA配合物差。33、TRICINE:N-[三(羥甲基)甲基]甘氨酸, 常見的電泳系統(tǒng)是Tris-甘氨酸系統(tǒng);Tris-Tricine電泳則用于分子量小于10kDa的多肽和蛋白的電泳,能夠獲得較好的分離效果??梢杂们罢叽妗?4、PVP40:PVP40 中的CO - N = 有很強(qiáng)的結(jié)合酚類化合物的能力,與其形成穩(wěn)定的復(fù)合物,常用于提取RNA時(shí)除去酚類。35、脫氧膽酸鈉:離子型去垢劑,作用有:1、裂解細(xì)胞;2、溶解蛋白,尤其是可以溶解一些難溶于水的蛋白,如膜蛋白等;3、很適合做WB,但在Co-IP中使用,需要謹(jǐn)慎。36、6-BA:細(xì)胞培養(yǎng)中用到,細(xì)胞分裂素。37、碘代乙酰胺:也叫作碘乙酰胺,2-碘乙酰胺。用于有機(jī)合成,在蛋白組學(xué)中組氨酸和半胱氨酸的烷基化試劑,用于多肽測(cè)序以及酶抑制劑等,蛋白組學(xué)級(jí)試劑。38、萘乙酸:NAA,為廣譜性植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。可促進(jìn)細(xì)胞分裂,誘導(dǎo)形成不定根,改變雌雄花比例,增加坐果率等39。番紅O與藏紅T:氧化還原指示劑、生物染色、酸堿指示劑,滴定分析亞硝酸鹽。40。TTC:2,3,5-三苯基氯化四氮唑(紅四氮唑),多用于藥物分析和瓊脂糖添加劑,在計(jì)數(shù)瓊脂中加入適量的TTC(0.5% TTC 1ML加到100ML瓊脂中),細(xì)菌菌落長(zhǎng)成紅顏色,對(duì)去除食品本底顆粒物干擾非常有意義。