α-萘酚酞指示劑

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公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

產(chǎn)品分類：指示劑

儲(chǔ)存條件：室溫,避光,12個(gè)月

用途：?jiǎn)我凰釅A指示劑,又稱3-硝基苯酚指示劑

注意事項(xiàng)：α-萘酚酞變色范圍：7.4-8.6,顏色由黃色變?yōu)樗{(lán)綠色。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

平菇三磷腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體Human LY96 ELISA Kit豬生長(zhǎng)激釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)免疫試劑盒

黃青霉載脂蛋白B抗體Human LYPLA1 ELISA Kit豬生長(zhǎng)激(GH)免疫試劑盒

殺鮭氣單胞菌花生四烯15脂氧合2抗體Human LYPLAL1 ELISA Kit豬生長(zhǎng)分化因子9(GDF9)免疫試劑盒

變幻青霉載脂蛋白C4抗體Human LYRM7 ELISA Kit豬腎(Renin)免疫試劑盒

污黑腐皮殼低密度脂蛋白受體銜接蛋白抗體Human LY6K ELISA Kit豬腎上腺(EPI)免疫試劑盒

淺金鏈霉菌原始廣泛存在蛋白1抗體Human LYAR ELISA Kit豬神經(jīng)型一氧化氮合成(nNOS)免疫試劑盒

血紅紅曲霉錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體Human LY96 ELISA Kit豬神經(jīng)特異性烯化(NSE)免疫試劑盒

黑曲霉α1,4-半乳糖基轉(zhuǎn)移1Human LYN ELISA Kit豬神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)免疫試劑盒

枝狀枝孢血管緊張Ⅱ受體相關(guān)蛋白抗體Human LYG1 ELISA Kit豬色上皮衍生因子(PEDF)免疫試劑盒

中國(guó)節(jié)叢孢膜粘連蛋白2受體抗體Human LYPLA1 ELISA Kit豬狀腺原(T3)免疫試劑盒

麥?zhǔn)辖惶鎲伟芫o張1轉(zhuǎn)換抑制劑抗體Human LYRM7 ELISA Kit豬乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)免疫試劑盒

嗜管歐文氏菌拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子抗體Human LYPLAL1 ELISA Kit豬乳脫氫(LDH)免疫試劑盒

豬丹絲菌α-1抗胰糜蛋白抗體Human LUC7L ELISA Kit豬熱休克蛋白70kDa蛋白1A(HSPA1A)免疫試劑盒

棒曲霉α-1抗抗體Human LSM5 ELISA Kit豬熱休克蛋白70(HSP-70)免疫試劑盒

變平滑假絲酵母ATP結(jié)合蛋白家族6抗體Human LUC7L2 ELISA Kit豬熱休克蛋白60,線粒體(HSPD1/Hsp-60)免疫試劑盒

黑木耳8808三磷腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗體Human LSM7 ELISA Kit豬熱休克蛋白40(HSP-40)免疫試劑盒

腸桿菌Enterobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>95% (HPLC),BC補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白1試劑盒澤蘭黃

鏈格孢霉屬Alternaria│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>95%,Tech Grade補(bǔ)體因子H試劑盒紫羅蘭

米曲霉Aspergillus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR補(bǔ)體因子B前體試劑盒支脫皂苷元
α-萘酚酞指示劑BNP(Human brain natriuretic peptide) ELISA Kit  人腦鈉su/腦鈉尿肽規(guī)格： 48T

CK20(Human cytokeratin 20) ELISA Kit  人細(xì)胞角蛋白20規(guī)格： 48T

Beta-EP(human Beta-Endorphin) ELISA Kit  人β內(nèi)啡肽規(guī)格： 48T

T-proBNP(Human N-terminal pro-brain natriuretic peptide) ELISA KIT  人N端前腦鈉su規(guī)格： 48T

Pro-ANP(Human Pro Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit  人前心鈉肽規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。