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詳細介紹
商品介紹：
測定意義 SP(EC2.4.1.7)主要存在于微生物和植物中，裂解葡萄糖苷鍵，催化葡萄糖基轉(zhuǎn)移到果糖、木糖、半乳糖和鼠李糖等，合成相應(yīng)的葡萄糖基低聚糖。此外，SP還能催化氫醌合成熊果苷，具有強的美白效果，在化妝品工業(yè)中具有重要應(yīng)用。 測定原理 SP能夠以磷酸為受體，催化蔗糖產(chǎn)生1-磷酸葡萄糖，在葡萄糖磷酸變位酶催化下變位為6-磷酸葡萄糖，在6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用下還原NADP+生成NADPH，導(dǎo)致340nm光吸收值增加。測定340nm吸光度增加速率，即可計算SP活性。 自備實驗用品及儀器 天平、低溫離心機、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計、1 mL石英比色皿和蒸餾水。 |
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 紫外分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/48樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS632125 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取：按照組織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi)，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2?！鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4?！鰽測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
胞內(nèi)離子通道蛋白1(CLIC1)英文名：CLIC1 ELISA Kit粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體包裝500g
胞漿型磷脂A2(cPLA2)英文名：cPLA2 ELISA Kit爾曼綜合癥基因1抗體包裝100mg
半乳糖凝集-3(Gal-3)英文名：Gal-3 ELISA Kit含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號抑制物盒蛋白家族7抗體包裝1g
半乳糖6硫酯(Gal-6S)英文名：Gal-6S ELISA Kit含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號抑制物盒蛋白家族17抗體包裝1g
半胱天冬蛋白(caspase-3)英文名：caspase-3 ELISA Kit含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號抑制物盒蛋白家族12抗體包裝5g
半胱蛋白抑制劑/胱抑C(Cys-C)英文名：Cys-C ELISA Kit鈉ATP通道蛋白抗體包裝1g
百白破抗體(DPT)英文名：DPT ELISA KitAGXT2L2蛋白抗體包裝25g
白血病抑制因子受體(LIFR)英文名：LIFR ELISA Kitβ淀粉樣蛋白胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白1抗體包裝5g
白血病抑制因子(LIF)英文名：LIF ELISA Kit錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體包裝1g
白細胞活化黏附因子(ALCAM)英文名：ALCAM ELISA Kit二磷腺苷核糖基轉(zhuǎn)移3抗體包裝250mg
白三烯E4(LTE4)英文名：LTE4 ELISA Kit二磷腺苷核糖基轉(zhuǎn)移5抗體包裝1g
白三烯D4(LTD4)英文名：LTD4 ELISA Kit腺苷單磷脫1抗體包裝5g
白三烯C4(LTC4)英文名：LTC4 ELISA Kit紅蛋白Ank1抗體包裝1g
白三烯B4(LTB4)英文名：LTB4 ELISA Kit腺苷琥珀裂解抗體包裝100g
白介9(IL-9)英文名：IL-9 ELISA Kitα1B糖蛋白抗體包裝25g
血管緊張原抗體骨成型蛋白2(BMP2)Reversine 是一種ATP-競爭性的 Aurora kinase 抑制劑，作用于 Aurora A，Aurora B 和 Aurora C，IC50 分別
蔗糖磷酸化酶(SP)測試盒50管/48樣土曲霉 2-溴甲基-4-甲氧基甲酯結(jié)合珠蛋白Elisa
膠孢 二氫獼猴桃內(nèi)酯結(jié)核桿IgG抗體Elisa
傳染性支氣管炎病 3,4-二氟苯-1,2-二睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子Elisa
根霉屬的 4-異喹啉解脲脲原體抗體Elisa
猴頭 2-甲基-3-甲基-4-(3-甲氧氧基)吡啶鹽酸鹽解整合樣金屬蛋白12Elisa
色褐鏈霉 鹽酸去甲苯福林解整合樣金屬蛋白33Elisa
*味牛肝 2-氟-3-基-4-吡啶解整合樣金屬蛋白9Elisa
香菇 4，5-二溴-1H-1，2，3-三氮唑金黃色葡萄球腸Elisa
魯氏毛霉 1-甲巰基環(huán)基乙酸甲酯金黃色葡萄球腸AElisa
糾纏青霉 1-羥甲基環(huán)基乙金黃色葡萄球蛋白AElisa
腐皮鐮孢 四氟酸亞鐵(II)金葡腸Elisa
阿舒多囊霉 4-甲基-2-正基苯并咪唑-6-羧酸金屬硫蛋白Elisa
淡紫紫霉 2-正基-4-甲基-6-(1-并咪唑-2-基)苯并咪唑金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白1Elisa
玫紅假裸囊 5-氨基-1,2,4-噻二唑鹽酸鹽金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白5Elisa
乳酒假絲酵母 3,4-二甲基(2,3-b)-噻吩-2,5-二羧酸二乙酯緊密連接蛋白Elisa
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
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