SOC培養(yǎng)基粉劑

SOC培養(yǎng)基粉劑公司正在銷售的產(chǎn)品：兔去氨精氨酸加壓素(dDAVP)試劑盒 Anti-CD2AP AntibodyPCID1蛋白抗體
兔葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶(GPI)試劑盒 Anti-CD30/TNFRSF8 AntibodyPDZ結(jié)構(gòu)域PDZK6蛋白抗體
兔血小板反應(yīng)蛋白1(TSP-1)試劑盒 Anti-CD33 Antibody吡哆激酶抗體
兔唾液酸結(jié)合球蛋白樣凝集素3(SIGLEC3)試劑盒

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

產(chǎn)品分類：培養(yǎng)基

儲(chǔ)存條件  4℃,12個(gè)月

用途  轉(zhuǎn)化的熱激處理后恢復(fù)培養(yǎng)

注意事項(xiàng)  在SOB培養(yǎng)基中添加葡萄糖,粉劑溶解于水后,如要求無菌,應(yīng)過濾除菌。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

血小板反應(yīng)蛋白(THBS1)THBS1 ELISA Kit色CYP3A抗體包裝25g

血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)TM ELISA Kit色cP450 CYP20A1抗體包裝5g

血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)SAA2 ELISA Kit色cP4501B1抗體包裝1g

血清淀粉樣P物質(zhì)(SAP)SAP ELISA Kit色cP450 CYP26A1抗體包裝5g

血紅氧合2(HO2)HO2 ELISA Kit磷化周期E抗體包裝100mg

血紅氧合1(HO1)HO1 ELISA Kit磷化周期E2抗體包裝5g

血紅蛋白(HB)HB ELISA Kit周期M3抗體包裝1g

血管抑(ANG)ANG ELISA Kit周期Y/X抗體包裝250mg

血管性血友病因子(vWF)vWF ELISA Kit磷化周期D3抗體包裝1g

血管細(xì)胞粘附分子1(VCAM1)VCAM1 ELISA Kit色b5還原3抗體包裝1g

血管生成樣蛋白7(ANGPTL7)ANGPTL7 ELISA KitCWC22蛋白抗體包裝250mg

血管生成樣蛋白3(ANGPTL3)ANGPTL3 ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框95抗體包裝5g

血管生成樣蛋白2(ANGPTL2)ANGPTL2 ELISA Kit19號(hào)染色體開放閱讀框67抗體包裝10MG

血管生成樣蛋白1(ANGPTL1)ANGPTL1 ELISA Kit磷化酪蛋白激1γ1+γ2+γ3抗體包裝100ml

血管生成4(ANGPT4)ANGPT4 ELISA Kit原卟啉氧化3抗體包裝25ml

ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白抗體泛交叉反應(yīng)蛋白(UCRP)N/A
SOC培養(yǎng)基粉劑Phospho-FRA1 (Ser265) /FITC  熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化FRA-1蛋白IgG3,3-二烯 98%

FSCN1/FITC  熒光標(biāo)記纖維束蛋白同源物1/肌動(dòng)蛋白集束蛋白/圓線蟲紫癜 IgG4-(二氨) 99%

FSH/FITC  熒光標(biāo)記促卵泡激IgG3-氨巴豆酯 99%

FSH-R/FITC  熒光標(biāo)記促卵泡激受體IgG3,3-二烯酯 98%

FSP/Spastin/FITC  熒光標(biāo)記抗纖維母表面抗原IgG克羅通 97%

FST/FITC  熒光標(biāo)記抗卵泡抑IgG鹽坦索羅辛 98%

F1 operon positive regulatory protein(NT)/FITC  熒光標(biāo)記鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白（N端）IgG三丁膦 95%

F1 operon positive regulatory protein(CT)/FITC  熒光標(biāo)記鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白（C端）IgG3-(異酰氧)氧硅烷 97%

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。