氨芐青霉su溶液

公司產(chǎn)品具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

產(chǎn)品分類：抗生素    
儲(chǔ)存條件：—20℃,避光,12個(gè)月    
用途：細(xì)菌培養(yǎng)常用抗生素,用于配制含氨芐的LB或LB平板等。干擾肽聚糖的交聯(lián)從而抑制細(xì)胞壁的合成。    
注意事項(xiàng)：無(wú)菌溶液。工作濃度為50-100ug/ml。    

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用xi 鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

人可溶性白細(xì)胞抗原G(sHLA-G)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

8人16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

Human Endostatin elisa kit    人ELISA試劑盒    96T/48T

human eosinophil-associated ribonuclease A family member 2 ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

Human proteinase-antineutrophil cytoplasmic antibody,PR3-ANCA ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

human UDP-glucose ceramide glucosyltransferase ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA試劑盒      人ELISA試劑盒    96T/48T

人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人B細(xì)胞κ 輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε(Nfkbie)ELISA試劑盒      人ELISA試劑盒    96T/48T

人B細(xì)胞分化因子(BCDF)ELISA試劑盒      人ELISA試劑盒    96T/48T

人B細(xì)胞活化因子受體(BAFF-R)ELISA試劑盒      人ELISA試劑盒    96T/48T

人B細(xì)胞連接蛋白(BLNK)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

APC70    轉(zhuǎn)錄激活蛋白crsp70抗體

ACTBL1    卵巢、胎盤、前列腺、睪丸蛋白22抗體

ANKRD33B    錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白33B抗體

APOC3    載脂蛋白C3抗體

Apoptosis enhancing nuclease    細(xì)胞凋亡增強(qiáng)核酸酶抗體

ATAD5    染色體脆弱性相關(guān)基因抗體

phospho-AKT (Ser473)    磷酸化蛋白激酶B抗體

ATP7B    銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)β鏈抗體

ACSF4    ?；鞍?抗體

AHNAK2    AHNAK核蛋白2抗體

ARL6    二磷酸腺苷核糖基化因子6相互作用蛋白抗體

ANO9    p53誘導(dǎo)蛋白5抗體

ANKRD5    錨蛋白重復(fù)域5抗體

ACCN2    腦鈉通道蛋白2抗體

ACCN4    腦鈉通道蛋白4抗體

ACCN5    小腸鈉通道蛋白5抗體

氨芐青霉su 溶液APXL    APXL蛋白抗體

ASIC3    酸敏感離子通道蛋白3抗體

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）     轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。