詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進(jìn)行動物免疫實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 腺苷A2b受體/神經(jīng)生長因子1受體抗體 |
英文名稱 | ADORA2B |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum短短芽胞桿菌 Brevibacillus brevis
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus
人腺細(xì)胞厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
人膀胱平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基人小氣道上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基
中國臺灣根霉 Rhizopus formosensis清酒酵母 Saccharomyces sake
蘇云金芽胞桿菌阿萊亞種 Bacillus thuringiensis subsp. alesti大鼠胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基
美味側(cè)耳 Pleurotus sapidus嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum海生嗜鹽球菌 Maricoccus halophilus
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae黃色籃狀菌
RK1(大鼠腎細(xì)胞)膠質(zhì)芽胞桿菌 Bacillus mucilagisus
泡盛曲霉 Aspergillus awamori日本根霉 Rhizopus japonicus
熱帶假絲酵母 Candida tropicalisSUP-B15(人Ph+急淋白血病細(xì)胞系)
接觸蛋白1(CNTN1)ELISA Kit for Contactin 1 (CNTN1)規(guī)格:48T/96T
S100鈣結(jié)合蛋白A8(S100A8)ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A8 (S100A8)規(guī)格:48T/96T
跨膜蛋白27(TMEM27)ELISA Kit for Transmembrane Protein 27 (TMEM27)規(guī)格:48T/96T
胞外5'-核苷酶(NT5E)ELISA Kit for 5'-Nucleotidase, Ecto (NT5E)規(guī)格:48T/96T
整合素αV(ITGαV)ELISA Kit for Integrin Alpha V (ITGaV)規(guī)格:48T/96T
圍滴蛋白4(PLIN4)ELISA Kit for Perilipin 4 (PLIN4)規(guī)格:48T/96T
再生胰島衍生蛋白3γ(REG3γ)ELISA Kit for Regenerating Islet Derived Protein 3 Gamma (REG3g)規(guī)格:48T/96T
淀粉樣前體蛋白(APP)ELISA Kit for Amyloid Precursor Protein (APP)規(guī)格:48T/96T
橋粒芯膠粘蛋白3(DSC3)ELISA Kit for Desmocollin 3 (DSC3)規(guī)格:48T/96T
免疫球蛋白A1(IgA1)ELISA Kit for Immuglobulin A1 (IgA1)規(guī)格:48T/96T
SRC/FGR/YES相關(guān)FYN癌基因(FYN)ELISA Kit for FYN Oncogene Related To SRC/FGR/YES (FYN)規(guī)格:48T/96T
DNA基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)ELISA Kit for DNA Methyltransferase 1 (DNMT1)規(guī)格:48T/96T
腺苷A2b受體/神經(jīng)生長因子1受體抗體Bacillus sp.分離基物: 泥樣提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0223生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Botryosphaeria ribis Grossenb. & Duggar分離基物: 富士蘋果枝干病?單個分生孢子分離菌株提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
Bacillus pumilus分離基物: 鉆取滇池底泥提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 滇池磷沉積的研究培養(yǎng)基: 2生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法
Saccharopolyspora hirsuta提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 生物轉(zhuǎn)化Pravastatin培養(yǎng)基: CM0038生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥
Bacillus megaterium分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 832生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Agaricus blazei Murrill分離基物: 子實體提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
Ochrobactrum intermedium分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 分類、研究,可以用來農(nóng)田土壤及環(huán)境修復(fù)微生物制劑。培養(yǎng)基: 0002生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法;礦物油法
天藍(lán)吸水鏈霉菌種屬: Streptomyces coeruleohygroscopicu提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: daunomycin 及其它蒽環(huán)類抗生素培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Streptomyces sp.分離基物: 鹽土提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 環(huán)境培養(yǎng)基: CM0237生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥