詳細(xì)介紹
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 錨定蛋白樣蛋白1抗體 |
英文名稱 | ASZ1 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
淡紫擬 Paecilomyces lilacinus檸檬串珠菌 Leucostoc citreum
雪白根霉厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia
293T(人胚腎細(xì)胞)日本根霉 Rhizopus japonicus
大麗輪枝菌 Verticillium dahliea Kleb人成纖維肉瘤細(xì)胞
根瘤菌球毛殼 Chaetomium globosum
負(fù)鼠腎細(xì)胞香菇 Lentinula edodes
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
植物桿菌 Lactobacillus plantarum喜鹽芽胞桿菌 Halobacillus sp.
黑化大家鼠肺成纖維樣細(xì)胞綠色木霉 Trichoderma viride
小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基ACCC40177 cardiopsis dassonvillei
大鼠腸上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基日本根霉 Rhizopus japonicus
NCI-H1703(人肺鱗細(xì)胞)MFC(小鼠胃細(xì)胞)
燕麥鐮刀菌 Gibberella avenacea球型芽孢桿菌 Bacillus sphaerious
尿嘧啶核苷磷化酶2(UPP2)ELISA Kit for Uridine Phosphorylase 2 (UPP2)規(guī)格:48T/96T
醇脫酶2(ADH2)ELISA Kit for Alcohol Dehydrogenase 2 (ADH2)規(guī)格:48T/96T
黑素皮質(zhì)激素4受體(MC4R)ELISA Kit for Melacortin 4 Receptor (MC4R)規(guī)格:48T/96T
Actamin 8蛋白(A8)ELISA Kit for Actamin 8 (A8)規(guī)格:48T/96T
類肪酶A(LPHA)ELISA Kit for Lipophilin A (LPHA)規(guī)格:48T/96T
甘-N-基轉(zhuǎn)移酶(GNMT)ELISA Kit for Glycine-N-Methyltransferase (GNMT)規(guī)格:48T/96T
巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶7(FUT7)ELISA Kit for Fucosyltransferase 7 (FUT7)規(guī)格:48T/96T
Cullin 4A蛋白(CUL4A)ELISA Kit for Cullin 4A (CUL4A)規(guī)格:48T/96T
Nesprin 1蛋白(Nesp1)ELISA Kit for Nesprin 1 (Nesp1)規(guī)格:48T/96T
磷核糖酰甘脒合酶(PFAS)ELISA Kit for Phosphoribosylformylglycinamidine Synthase (PFAS)規(guī)格:48T/96T
突觸囊泡蛋白Ⅲ(SYT3)ELISA Kit for Synaptotagmin III (SYT3)規(guī)格:48T/96T
網(wǎng)鈣蛋白2(RCN2)ELISA Kit for Reticulocalbin 2 (RCN2)規(guī)格:48T/96T
錨定蛋白樣蛋白1抗體Saccharomyces cerevisiae分離基物: 葡萄提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 果酒釀造培養(yǎng)基: CM0007生長條件: 35℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Geobacillus thermoleovorans分離基物: 沉積物提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 2生長條件: 70℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Valsa sordida Nitschke分離基物: 枝干部提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲(chǔ)條件: 定期移植法
Salmonla Kentucky提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
柑橘青霉種屬: Penicillium citrinum提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 311生長條件: 25-26℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
圓弧青霉種屬: Penicillium cyclopium提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0015生長條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Torulopsis globosa分離基物: 復(fù)合飼料提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 飼料。培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28-30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Brevibacterium iodinum模式菌株: 未知
諾卡氏菌種屬: Nocardia sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0038生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。