詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | 去整合素樣金屬蛋白酶2抗體 |
英文名稱 | ADAM2 |
規(guī)格 | 0.1ml |
?
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
鈧標準溶液(1000μg/ml,基體:1.0mol/L H3) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:1000μg/ml,基體:1.0mol/L H3純度:>95%
反式丁醛(standard for GC) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:standard for GC純度:>95%
十二(Standard for GC,≥99.5% (GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:Standard for GC,≥99.5% (GC)純度:>95%
正癸(Standard for GC,>99%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:Standard for GC,>99%(GC)純度:>95%
己二二(standard for GC,≥99.5%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:standard for GC,≥99.5%(GC)純度:>95%
馬來二丁(standard for GC,≥99.5%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:standard for GC,≥99.5%(GC)純度:>95%
二基亞砜(Standard for GC,≥99.95%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:Standard for GC,≥99.95%(GC)純度:>95%
正癸(Standard for GC,≥99.5%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:Standard for GC,≥99.5%(GC)純度:>95%
琥珀二乙(standard for GC,≥99.6%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:standard for GC,≥99.6%(GC)純度:>95%
癸二二乙(Standard for GC, ≥99.5% (GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:Standard for GC, ≥99.5% (GC)純度:>95%
二十二(standard for GC,≥99.0%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:standard for GC,≥99.0%(GC)純度:>95%
三十二(standard for GC,≥98.0%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:standard for GC,≥98.0%(GC)純度:>95%
正庚(Standard for GC,>99.5%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:Standard for GC,>99.5%(GC)純度:>95%
γ 丁內(nèi)(GBL)(standard for GC,≥99.9%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:standard for GC,≥99.9%(GC)純度:>95%
丙位庚內(nèi)(Standard for GC ,>98.5%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:Standard for GC ,>98.5%(GC)純度:>95%
(+)葑(standard for GC, ≥99.5% (GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:standard for GC, ≥99.5% (GC)純度:>95%
Laminin Beta 2/Laminin S 層粘連蛋白β2一抗 * 0.2ml Asulam
Plakophilin 1 橋粒斑菲素蛋白1一抗 * 0.2ml Bepotastine besilate
phosphoALK/CD246(Tyr1604) 化間變型淋巴瘤激酶一抗 * 0.1ml Sodium copper chlorophyllin
phosphoALK/CD246(Tyr1278/1282/1283) 化間變型淋巴瘤激酶一抗 * 0.1ml Neochlorogenic acid
phosphoALK/CD246(Tyr1586) 化間變型淋巴瘤激酶一抗 * 0.1ml Ivabradine HCl
SMOC2 分泌模塊化鈣結合蛋白2一抗(平滑肌相關蛋白2) * 0.2ml Xanthophyll
Sprouty 2 快速發(fā)育生長因子同源蛋白2一抗 * 0.1ml Xanthophyll
THSD1 血小板跨膜反應蛋白1一抗 * 0.2ml Xanthophyll
去整合素樣金屬蛋白酶2抗體葡糖淀粉酶抗體Trehalose中文名:海藻糖別名:分子式:C12H22O11
G蛋白γ11/Gγ11 抗體Chlorogenic acid中文名:綠原酸別名:分子式:C16H18O9
胃泌素抑制肽受體抗體Ethyl rutiside中文名:蕓香糖乙苷別名:分子式:C14H26O10
生長因子受體結合適應蛋白抗體18-Hydroxytritriacontan-16-one中文名:別名:分子式:C33H66O2
GARNL3蛋白抗體Mannitol中文名:甘露醇別名:D-Mannitol; D-甘露醇分子式:C6H14O6