詳細介紹
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
AGN水溶液 | 100ml | FS-R7156 |
產(chǎn)品分類:染色其他
儲存條件:4℃,避光,6個月
用途:組織切片染色
注意事項:玻璃器皿需要侵泡并清洗干凈、烘干。
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
葡萄座腔菌屬磷化HER2受體抗體Human IVL(Involucrin) ELISA Kit人G蛋白偶合受體44(GPR44/CRTH2/DL1R)免疫試劑盒
糙孢籃狀菌磷化HER2受體抗體Human NSMAF (Protein FAN) ELISA KIT人GTPNRas(NRAS)免疫試劑盒
綠色木霉=木木霉磷化HER3受體抗體Human NCEH1 (Neutral cholesterol ester hydrolase 1) ELISA KIT人Gremlin-1蛋白(GREM1)免疫試劑盒
堅強芽孢桿菌磷化HER4抗體Human PILRB(Paired immunoglobulin-like type 2 receptor beta) ELISA Kit人GDP解離抑制因子2(GdI2)免疫試劑盒
扣囊復膜孢酵母磷化HER4抗體Human NPTXR(Neuronal pentraxin receptor) ELISA Kit人GAD/IA2自身抗體免疫試劑盒
球形芽孢桿菌轉(zhuǎn)錄因子ERF抗體Human NCF1 (Neutrophil cytosol factor 1) ELISA KIT人G1/S特異性周期蛋白E1(CCNE1)免疫試劑盒
地中海擬無枝菌磷化轉(zhuǎn)錄因子ERF抗體Human MAP2(Microtubule-associated protein 2) ELISA Kit人F-肌動蛋白(F-actin)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母真核肽鏈釋放因子1抗體Human NPSR1 (Neuropeptide S receptor) ELISA KIT人FOS 樣抗原2(FOSL2)免疫試劑盒
出芽短梗霉真核肽鏈釋放因子3a抗體Human NPFF (Pro-FMRFamide-related neuropeptide FF) ELISA KIT人FMS樣酪激3配體(Flt-3L)免疫試劑盒
空腸彎曲桿菌表皮生長因子受體底物15抗體Human GAP43(Neuromodulin) ELISA Kit人FMS樣酪激3(Flt3)免疫試劑盒
佛雷德里克斯堡假單胞菌內(nèi)吞作用輔助蛋白EPN1抗體Human NETO1 (Neuropilin and tolloid-like protein 1) ELISA KIT人Fc受體樣蛋白3(FCRL3)免疫試劑盒
Aurantimonas coralicida內(nèi)吞作用輔助蛋白EPN2抗體Human NLK (Serine/threonine-protein kinase NLK) ELISA KIT人FAM172A蛋白(FAM172A)免疫試劑盒
疏水戈登氏菌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位蛋白ERGI3抗體Human NSF (Vesicle-fusing ATPase) ELISA KIT人E選擇(E-Selectin/CD62E)免疫試劑盒
熒光假單胞菌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氧化物蛋白Ero1-Lα抗體Human NRSN1 (Neurensin-1) ELISA KIT人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)免疫試劑盒
濟州單胞菌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白ERp19抗體Human NANP (N-acylneuraminate-9-phosphatase) ELISA KIT人ES1蛋白同系物,線粒體(C21orf33/HES1/KNPI)免疫試劑盒
黑根霉內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白ERp72抗體Human MYNN (Myoneurin) ELISA KIT人Ephrin-B2(EFNB2)免疫試劑盒
牛葡萄球菌Staphylococcus│bovis 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=6%番茄紅
漢遜德巴酵母Debaryomyces│hansenii 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99.5%丹寧/單寧
黃色短桿菌Brevibacterium│flavum 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
AGN水溶液FPB(Human fibrinopeptide B) ELISA Kit 人血纖肽/纖維蛋白肽B規(guī)格: 48T
PLGA(Human plasminogen activator) ELISA Kit 人纖溶mei原激活劑規(guī)格: 48T
SmIg(Human Surface Membrane Immunoglobulin) ELISA Kit 人細胞膜表面免疫球蛋白規(guī)格: 48T
PA(Human prealbumin) ELISA Kit 人前白蛋白規(guī)格: 48T
CG(Human Cryoglobulin) ELISA Kit 人冷球蛋白規(guī)格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。