詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 血管緊張素Ⅱ1A型受體抗體 |
英文名稱 | Angiotensin II type 1A receptor |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
基纖維素(100000mPa.s) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:粘度100000mPa.s純度:≥98%
基纖維素(4000 mPa.s) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:4000mPa.s,BR純度:≥97%
D核糖(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,標準品純度:≥97%
D核糖 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥95%
二蘇糖(DTT) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,分子生物學級純度:≥99%
D(+)松二糖 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥97%
D果糖1,6二三鈉鹽 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥97%
海帶多糖;昆布糖 (來自褐藻類) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR,日本進口分裝純度:97%
胰酶(1:250),胰酶粉 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:酶活1:250,BR純度:≥98%
木瓜蛋白酶(800u/mg) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:800u/mg純度:≥97%
木瓜蛋白酶(2000u/mg) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:2000u/mg;200萬u/g純度:97%
胰酶(1:2500) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:酶活1:2500,BR純度:≥98%
胰酶(1:4500) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:酶活1:4500,BR純度:≥98%
枸櫞奧芬君;枸芬君 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
β半乳糖苷酶 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:700u/mg,羅氏分裝純度:≥98%
脫落(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:98%,標準品純度:≥97%
ALS2CR8 肌側(cè)索硬化2染色體區(qū)域候選蛋白8一抗 * 0.2ml Tirapazamine(SR259075; Win59075; SR4233)
Corin 心臟特異性絲氨蛋白酶一抗 * 0.2ml Dextrin
GPR55 蛋白偶聯(lián)受體55一抗 * 0.2ml Benzidamine HCl
LAP3 亮氨氨基肽酶3一抗 * 0.2ml Sephadex G50
LMW Kinigen/Kinigen 1 低分子量生長促進因子一抗(激肽原1) * 0.2ml Sephadex G50
KCNMB1/Maxi Potassium channel beta 鈣激活鉀通道蛋白β1一抗 * 0.2ml (S)(+)Mandelic acid
P2RX4 三腺苷門控陽離子通道蛋白一抗 * 0.2ml (R)(−)Mandelic acid
ATP6IP2 ATP酶H+轉(zhuǎn)運溶酶體輔助蛋白2一抗 * 0.2ml 1Amihydantoin Hydrochloride
血管緊張素Ⅱ1A型受體抗體22號染色體開放閱讀框15抗體Acetylvirolin中文名:別名:分子式:C23H28O6
22號染色體開放閱讀框13抗體Epiaschantin中文名:別名:分子式:C22H24O7
22號染色體開放閱讀框26抗體Podophyllotoxin中文名:鬼臼毒素別名:分子式:C22H22O8
補體C2b鏈多肽抗體Tigloylgomisin H中文名:巴豆酰戈米辛H別名:分子式:C28H36O8
22號染色體開放閱讀框43抗體Anwulignan中文名:安五脂素別名:Macelignan分子式:C20H24O4