詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。
產品名稱 | 腫瘤抑制相關蛋白PHEMX抗體 |
英文名稱 | ART1 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
聚多曲霉(薩氏曲霉)現(xiàn)貨,ATCC菌株
鏈格孢培養(yǎng),ATCC菌株
米根霉保存,ATCC菌株
淡紫色擬售價,ATCC菌株
光孢短柄帚霉現(xiàn)貨,ATCC菌株
香蕉炭疽盤長孢菌培養(yǎng),ATCC菌株
許旺酵母保存,ATCC菌株
清酒酵母售價,ATCC菌株
電子轉移黃素蛋白α肽(ETFα)ELISA Kit for Electron Transfer Flavoprotein Alpha Polypeptide (ETFa)規(guī)格:48T/96T
賴酰氧化酶樣蛋白2(LOXL2)ELISA Kit for Lysyl Oxidase Like Protein 2 (LOXL2)規(guī)格:48T/96T
胸腺嘧啶核苷磷化酶(TP)ELISA Kit for Thymidine Phosphorylase (TP)規(guī)格:48T/96T
神經肽Y受體Y2(NPY2R)ELISA Kit for Neuropeptide Y Receptor Y2 (NPY2R)規(guī)格:48T/96T
組織金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP1)ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 1 (TIMP1)規(guī)格:48T/96T
腦多巴神經營養(yǎng)因子(CDNF)ELISA Kit for Cerebral Dopamine Neurotrophic Factor (CDNF)規(guī)格:48T/96T
血管緊張素Ⅱ(ANGⅡ)ELISA Kit for Angiotensin II (AngII)規(guī)格:48T/96T
分泌粒蛋白Ⅴ(SCG5)ELISA Kit for Secretogranin V (SCG5)規(guī)格:48T/96T
兒茶-O-基轉移酶(COMT)ELISA Kit for Catechol-O-Methyltransferase (COMT)規(guī)格:48T/96T
芳香烴受體核轉位因子(ARNT)ELISA Kit for Aryl Hydrocarbon Receptor Nuclear Translocator (ARNT)規(guī)格:48T/96T
胰島素樣蛋白3(INSL3)ELISA Kit for Insulin Like Protein 3 (INSL3)規(guī)格:48T/96T
CD200受體1(CD200R1)ELISA Kit for CD200 Receptor 1 (CD200R1)規(guī)格:48T/96T
腫瘤抑制相關蛋白PHEMX抗體Escherichia coli分離基物: 畜禽臟器提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應用領域: 用于科研培養(yǎng)基: 335生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Alternaria sp.分離基物: 植物提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 18-26℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Volvarila volvacea提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 食用培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;礦物油法;定期移植法
Colwlia aestuarii分離基物: 水樣/上層海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應用領域: 微生物/耐冷菌培養(yǎng)基: 471生長條件: 15℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
Nesterenkonia sp.分離基物: 沉積物/TVG沉積物提供形式: 凍干物模式菌株: no應用領域: 海洋放線菌培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃-30&存儲條件: 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
洛格酵母種屬: Saccharomyces loges提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 葡萄酒。培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法
Micromonospora sp.分離基物: 半天然海土提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 抗細菌;抗金黃色葡萄球菌培養(yǎng)基: CM0012生長條件: 35-37C存儲條件: 真空冷凍干燥
柱形孢鏈霉菌種屬: Streptomyces cylindrosporus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
金黃色葡萄球菌種屬: Staphylococcus aureus提供形式: 硅膠雙層管,凍干粉安全等級: 2模式菌株: no應用領域: 研究;分析檢測。檢定抗生素,《消毒技術規(guī)范》中醫(yī)療器械滅菌效果檢測用菌,《GB 4789.2-2010菌落總數測定》陽性對照菌株,2015版中國藥典質控菌株。無菌測試;新霉素、cefactor、阿米卡星、卡那霉素、頭孢西丁、頭孢唑啉、萘夫西林,新青二、萬古霉素、林可霉素、青霉素、妥布霉素、新霉素b、螺旋霉素、短桿菌肽、頭孢噻肟、頭孢氨芐、先鋒霉素、光神霉素、慶大霉素、強力霉素、甲氧西林、頭孢羥唑、頭孢菌素、氯唑西林、環(huán)絲氨酸、紅霉素、四環(huán)素、甲烯土霉素頭孢菌素、雙氯青霉素、地美環(huán)素、土霉素、土霉素羅利環(huán)素、金霉素的測定;卡那霉素、克林霉素、鏈霉素和四環(huán)素的藥敏試驗。培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁培養(yǎng)基: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 20.0g(液體培養(yǎng)基不含),蒸餾水 1.0L,pH7.0。121℃,15min滅菌。生長條件: 37℃,好氧。生長特性: G+球菌,單個、成對、不規(guī)則堆狀排列。不生芽胞。鳥氨酸脫羧酶陰性,發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖產酸不產氣,發(fā)酵甘露醇。甲基紅反應陽性,伏-普實驗弱陽性。血平板菌落周圍形成透明的溶血環(huán)。產金黃素。兼性厭氧,適pH7.0-7.5。存儲條件: -20℃避光保存;運輸條件:冰袋運輸。