1--2-萘酚指示劑

1--2-萘酚指示劑公司正在銷售的產(chǎn)品：雞白分化抗原CD4(CD4)試劑盒 Anti-ARSK Antibody色素 C（抗原）
雞絲狀血球凝集素(FHA)試劑盒 Anti-ARSI Antibody腎上腺素能受體β3
雞孕酮受體(PGR)試劑盒 Anti-ARSK Antibody巨化病(多肽)
雞趨化因子CCL4樣蛋白1(CCL4L1)試劑盒Anti-ART1 Antibody多巴脫羧酶（抗原

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

產(chǎn)品分類：指示劑

儲(chǔ)存條件：室溫,避光,12個(gè)月

用途：金屬離子指示劑，鈣離子指示劑

注意事項(xiàng)：終點(diǎn)顏色變化為：紅-黃。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

密蘇里游動(dòng)放線菌骨形態(tài)發(fā)生蛋白15抗體Human GTF2H3 ELISA Kit小鼠催乳抑制激(PIH)免疫試劑盒

粉紅單端孢霉Bcl-2樣蛋白2抗體Human GSTM4 ELISA Kit小鼠催乳釋放激(PRH)免疫試劑盒

釀酒酵母殺菌/通透性增強(qiáng)蛋白抗體Human GTF2H5 ELISA Kit小鼠催乳(PRL)免疫試劑盒

蠟狀芽孢桿菌Bcl-2抗體Human GYG2 ELISA Kit小鼠催產(chǎn)(OT)免疫試劑盒

根瘤菌腦轉(zhuǎn)錄因子4蛋白抗體Human GTF3C5 ELISA Kit小鼠促有絲分裂因子(MF/MPF)免疫試劑盒

腸沙門(mén)氏菌腸炎亞種膽鹽激活脂肪抗體Human GTPBP3 ELISA Kit小鼠促性腺激釋放激(GnRH)免疫試劑盒

面粉增白劑速測(cè)3-羥丁脫氫抗體Human GTPBP1 ELISA Kit小鼠促生長(zhǎng)激釋放激(GHRH)免疫試劑盒

桔橙鏈霉菌長(zhǎng)鏈脂肪?；饪贵wHuman GTPBP2 ELISA Kit小鼠促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子(CRF)免疫試劑盒

Pilidium concavum磷化癌易感基因1抗體Human GTPBP4 ELISA Kit小鼠促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)免疫試劑盒

藻渣梭菌磷化β分泌抗體Human GTSE1 ELISA Kit小鼠促卵泡(FSH)免疫試劑盒

煙曲霉磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體Human GUCY1A3 ELISA Kit小鼠促甲狀腺釋放激(TRH)免疫試劑盒

黑色小單孢菌磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體Human GTPBP5 ELISA Kit小鼠促甲狀腺(TSH)免疫試劑盒

莖生擬莖點(diǎn)霉磷化Bcl-2抗體Human GUCY1B3 ELISA Kit小鼠雌三(E3)免疫試劑盒

微小毛霉磷化癌易感基因1抗體Human GTF2H3 ELISA Kit小鼠雌激硫轉(zhuǎn)移(SULT1E1)免疫試劑盒

Rhizobium  multihospitium磷化癌易感基因1抗體Human GTF2H2C ELISA Kit小鼠雌激(E)免疫試劑盒

Pseudomonas eucalypticola磷化受體性蛋白酪激ETK抗體Human GTF2H5 ELISA Kit小鼠雌二受體(ER)免疫試劑盒

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BRβ試劑盒三十烷

同溫層芽孢桿菌Bacillus│stratosphericus 質(zhì)量規(guī)格：>99%，BRβ位淀粉樣前體蛋白裂解2試劑盒Ⅳ

淺白隱球酵母Cryptococcus│albidus 質(zhì)量規(guī)格：>99%，BRβ位淀粉樣前體蛋白裂解1試劑盒Ⅲ
1--2-萘酚指示劑AHA(Human Histone antibody) ELISA Kit  人抗組蛋白規(guī)格： 48T

MOG ELISA Kit (human)  抗髓鞘少樹(shù)突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白(人)規(guī)格： 96T

Cry Alpha(Human crystal proteins Alpha) ELISA Kit  人晶體蛋白α規(guī)格： 48T

Cry Beta(Human crystal proteins Beta) ELISA Kit  人晶體蛋白β規(guī)格： 48T

CLA(Human Collagen autoantibody) ELISA Kit  人抗膠原蛋白規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。