錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白42抗體

抗體的制備過程：
1. 免疫原：普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物：常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集：一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定：得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存：抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。

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1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù)：
（一）原理
當應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
（二）準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應(yīng)終止緩沖液；
2.儀器
凝膠過濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。
（三）操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行；
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程：
1.材料與試劑
  a．提取的動物 Ig
  b．弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
  c．青霉素和鏈霉素
  d．實驗動物 兔
  e．其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，殺死實驗活體，采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清（無菌采制）
絞股藍皂苷XLIX；絞股藍皂甙XLIX英文名稱：Gystemma pentaphyllum saponins gypesides XLIX XLIX;保存：20℃，避光規(guī)格：HPLC≥98% 10mg/支SNF1/AMP激酶相關(guān)激酶2一抗

藥根英文名稱：Jatrorrhizine保存：20℃，避光規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支中心體相關(guān)蛋白激酶Nek2一抗

鹽藥根；藥根鹽鹽英文名稱：Jatrorrhizine hydrochloride; jatrorrhizine hydrochloride保存：20℃，避光規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支核蛋白易位啟動子區(qū)域TPR一抗

白屈菜英文名稱：Chelidonine保存：20℃，避光規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支載脂蛋白AI調(diào)節(jié)蛋白1一抗

白屈菜紅英文名稱：Chelerythrine保存：20℃，避光規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支鼻咽上皮細胞特異性蛋白1一抗

鹽白屈菜紅、白屈菜赤英文名稱：Chelerythrine chloride hydrochloride, chelerythrine保存：20℃，避光規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支軸突生長誘向因子4一抗

氧白屈菜紅英文名稱：Ethoxychelerythrine保存：20℃，避光規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支軸突生長誘向因子G1配體一抗

湖貝素；新貝母英文名稱：Hupehenine; new alkaloids保存：20℃，避光規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支神經(jīng)外營養(yǎng)蛋白1一抗

劍麻皂苷元；劍麻皂甙元英文名稱：Sisal saponins of tigogenin yuan;保存：20℃，避光規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支利鈉肽受體A一抗

款冬；款冬素,款冬花素英文名稱：Coltsfoot Tussilago farfara Flos farfarae ketone; Su, Su保存：20℃，避光規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支N酰轉(zhuǎn)移酶8樣蛋白一抗

連翹苷英文名稱：Phillyrin保存：20℃，避光規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支xa蛋白一抗

連翹脂苷A英文名稱：Forsythia fat glycoside A保存：20℃，避光規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支P53誘導(dǎo)細胞凋亡抑制蛋白一抗

連翹苷B；連翹甙B英文名稱：Forsythiaside B; forsythiaside B保存：20℃，避光規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支型肝炎非結(jié)構(gòu)蛋白5A反式激活蛋白9一抗

金石蠶苷英文名稱：Jinshi silkworm glycoside保存：20℃，避光規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支環(huán)指蛋白107一抗

石吊蘭素；巖豆英文名稱：Nevadensin; lysiotin保存：20℃，避光規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支絲/蘇蛋白激酶NEK8一抗

金諾芬英文名稱：Jin Nuofen保存：20℃，避光規(guī)格：100mg核孔蛋白Nup37一抗

蒿英文名稱：Hao Jiami保存：20℃，避光規(guī)格：100mg核結(jié)構(gòu)蛋白5一抗
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白42抗體Bacillus subtilis提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)肌苷。培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法；定期移植法

Serratia sp.分離基物: 土壤/森林樹下土提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 近海細菌培養(yǎng)基: 471生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

蘇云金芽胞桿菌種屬: Bacillus thuringiensis分離基物: 1-5cm土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 科研研究培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法；礦物油法

Escherichia coli提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 遺傳工程培養(yǎng)基: 0033生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Tricholoma matsutake提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 與赤松、黑松、高山松等形成外生菌根，食用，共生菌培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；礦物油法；定期移植法

Penicillium sp.分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 活性物質(zhì)；抗炎培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 28C存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)

Colletotrichum orbiculare (Berk. & Mont.) Arx分離基物: 黃瓜葉片提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 26--30存儲條件: 定期移植法

德氏乳桿菌保加利亞亞種種屬: Lactobacillus dbrueckii subsp. bulgaricus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于益生菌類食品。培養(yǎng)基: CM0006生長條件: 42℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Rhizopus stolonifer var. stolonifer提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 22℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法