詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 環(huán)核苷酸門控陽離子通道蛋白CNG-1β抗體 |
英文名稱 | CNGB1 |
規(guī)格 | 0.2ml |
?
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
膠原 IA N2Phexyacetyl Guanine 質(zhì)量規(guī)格:美國進口96孔板質(zhì)粒DNAout(離心法)
膠原 IV (四型) 6OMethyld3guanine 質(zhì)量規(guī)格:美國進口96孔板質(zhì)粒DNAout(真空法)(見關聯(lián)產(chǎn)品)
膠原 V (五型) N7(2Carbamoylhydroxyethyl)guanine 質(zhì)量規(guī)格:美國進口大提無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNAout
透明質(zhì) 2Ami,8dihydroxypurine Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:美國進口大提無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNAout
化 alltrans Retiic Acid Methyl Ester 質(zhì)量規(guī)格:美國進口大提柱式Ti質(zhì)粒DNAout(見關聯(lián)產(chǎn)品)
胰蛋白抑制劑 13cis Retiic Acid Methyl Ester 質(zhì)量規(guī)格:美國進口大提柱式質(zhì)粒DNAout
蝸牛 rac 4Hydroxy9cisretiic Acid 質(zhì)量規(guī)格:美國進口革氏陽性細菌質(zhì)粒DNAout
核糖核 A Caged Retiic Acid 質(zhì)量規(guī)格:美國進口中提柱式BAC DNAout
蛋白 K 5,6Epoxy3cis Retiic Acid 質(zhì)量規(guī)格:美國進口柱式BAC DNAout
蛋白 E rac alltrans 4Hydroxy Retiic Acid 質(zhì)量規(guī)格:美國進口柱式Ti質(zhì)粒DNAout(見關聯(lián)產(chǎn)品)
辣根過化物 9cis Retiyl βDGlucuronide 質(zhì)量規(guī)格:美國進口柱式酵母質(zhì)粒DNAout
胃蛋白抑制劑 4Keto 9cis Retiic Acid Methyl Ester 質(zhì)量規(guī)格:美國進口柱式無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNAout
果膠離析 alltrans 5,6Epoxy Retiic Acid 質(zhì)量規(guī)格:美國進口柱式質(zhì)粒DNAout(50次)
木瓜蛋白 9cisRetiic acid 質(zhì)量規(guī)格:美國進口一步法質(zhì)粒DNA提?。?/span>)
還原型輔 II 4Keto 13cisRetiic Acid 質(zhì)量規(guī)格:美國進口一步法96孔板單菌落質(zhì)粒DNAout(離心法)(停產(chǎn))
還原型輔 I 4Keto 9cis Retiic Acid 質(zhì)量規(guī)格:美國進口一步法96孔板單菌落質(zhì)粒DNAout(離心法)(停產(chǎn))
化型輔 I alltrans 4Keto Retiic Acid 質(zhì)量規(guī)格:美國進口一步法96孔板單菌落質(zhì)粒DNAout(真空法)(見關聯(lián)產(chǎn)品)
環(huán)核苷酸門控陽離子通道蛋白CNG-1β抗體鰻弧菌ADCY2 腺苷酸環(huán)化酶2抗體100 ul
溫和氣單胞菌ADCY3 腺苷酸環(huán)化酶3抗體100 ul
化膿性鏈球菌(釀膿鏈球菌)ADCY4 腺苷酸環(huán)化酶4抗體100 ug
腐皮鐮孢(斜面)ADCY5 腺苷酸環(huán)化酶5抗體100 ul
費舍爾弧菌ADCY6 腺苷酸環(huán)化酶6抗體100 ul
環(huán)狀芽胞桿菌ADCY7 腺苷酸環(huán)化酶7抗體20 ul
白色食藻菌ADCY8 腺苷酸環(huán)化酶8抗體100 ul
遲緩愛德華氏菌(暫無)ADCY9 腺苷酸環(huán)化酶9抗體300 ul
皮氏羅爾斯通氏菌ADCY10 腺苷酸環(huán)化酶10抗體100 ug
馬氏鏈球菌ACE1/CD143 血管緊張素轉換酶ACE1抗體100 ul
博拉迪酵母ACA11 擬南芥ACA11抗體100 ul
融合魏斯氏菌AHA3 AHA3抗體(擬南芥)100 ul
燦爛類芽胞桿菌Angiomotin 血管抑素結合蛋白抗體100 ul
茯苓(斜面)HIP4/CBS 絲氨酸羧甲半胱氨酸合成酶抗體100 ul
植物乳桿菌(胚芽乳桿菌)ACE2 血管緊張素轉換酶2抗體20 ul
B組鏈球菌ACEI 血管緊張素1轉換酶抑制劑抗體100 ul
腸道致病性大腸埃希氏菌Acetyl CoA Carboxylase 乙酰輔酶A羧化酶抗體100 ul
法國蜜環(huán)菌(斜面)Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79) 磷酸化乙酰輔酶A羧化酶抗體100 ul