乙基紫指示劑

乙基紫指示劑公司正在銷售的產(chǎn)品：雞血清淀粉樣蛋白P(SAP)試劑盒 Anti-TIA1 AntibodyCy7標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgG
雞腺苷酸環(huán)化酶相關(guān)蛋白1(CAP1)試劑盒 Anti-TIAM1 AntibodyPE標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgG
雞胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)試劑盒Anti-TICAM1 AntibodyPE-Cy3標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgG
雞趨化因子C-X

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

產(chǎn)品分類：指示劑

儲存條件：室溫,避光,12個月

用途：單一酸堿指示劑,第一變色范圍

注意事項：乙基紫第一變色范圍：pH0.0-2.4,顏色由藍綠色變紫色；第二變色范圍：pH10.0-13.0,顏色由紅色變?yōu)闊o色。

 

 

配制與標(biāo)定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

端羧基外消旋聚乳(重均分子量6-9.5萬) TG100-115氧化固結(jié)合蛋白4抗體包裝1g

端羧基外消旋聚乳(重均分子量73-109萬) Difenidol Hydrochloride抗凋亡蛋白OLFM44抗體包裝25g

端羧基外消旋聚乳(重均分子量9.5-16萬) Urapidil Hydrochloride結(jié)腸癌過度表達蛋白1抗體包裝5g

端羧基右旋聚乳(重均分子量0.3-1.5萬) Urapidil Hydrochloride卵巢癌免疫反應(yīng)抗原抗體包裝1mg

端羧基右旋聚乳(重均分子量1.5-3萬) Flunarizine Hydrochloride卵巢癌相關(guān)基因1抗體包裝1g

端羧基右旋聚乳(重均分子量102-137萬) Flunarizine Hydrochloride氧化應(yīng)激誘導(dǎo)生長抑制因子1抗體包裝250mg

端羧基右旋聚乳(重均分子量137-170萬) Fexofenadine Hydrochloride氧化固結(jié)合蛋白8抗體包裝1g

端羧基右旋聚乳(重均分子量17-26萬) Fexofenadine Hydrochloride泛特異性蛋白OTB1抗體包裝250mg

端羧基右旋聚乳(重均分子量170-206萬) Nizatidine視神經(jīng)相關(guān)蛋白1抗體包裝100g

端羧基右旋聚乳(重均分子量206-288萬) Aceglutamide鳥脫羧抗1抗體包裝25g

端羧基右旋聚乳(重均分子量26-36萬) Montmorillonit嗅覺受體家族5亞基1抗體包裝500g

端羧基右旋聚乳(重均分子量3-5.5萬) Bergamottin胚胎干關(guān)鍵蛋白抗體包裝5g

端羧基右旋聚乳(重均分子量36-48萬) Ropivacaine hydrochloride 土霉抗體包裝25g

端羧基右旋聚乳(重均分子量48-73萬) Guaijaverin腫瘤/抗原117包裝5g

端羧基右旋聚乳(重均分子量5.5-9萬) Emtricitabine鳥脫羧抗2抗體包裝5MG

地衣芽孢桿菌Bacillus│licheniformis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,可用于培養(yǎng)基質(zhì)金屬蛋白7試劑盒; D-Alanine

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：含量測定基質(zhì)金屬蛋白5試劑盒檳榔堿;Arecoline hydrob

焦曲霉Aspergillus│ustus 質(zhì)量規(guī)格：>97%,分子生物學(xué)級基質(zhì)金屬蛋白4試劑盒巴西蘇木;Brazilin
乙基紫指示劑NGF  小鼠神經(jīng)生長因子規(guī)格： 48T

leptin  小鼠瘦su規(guī)格： 48T

Lymphotactin  小鼠淋巴細胞趨化因子規(guī)格： 48T

mouse Caspase-1  小鼠Caspase-1規(guī)格： 48T

mouse Caspase-2  小鼠Caspase-2規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。