結(jié)晶紫-檸檬酸染色液

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公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

產(chǎn)品分類：染色其他

儲存條件：室溫,6個月

用途：生物染色

注意事項：主要由結(jié)晶紫和0.1M檸檬酸組成。

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

DB (彌漫大B淋巴瘤) (通過STR鑒定）雙特異性蛋白磷26抗體（絲裂原活化蛋白激磷8）Human PPP2R4(Serine/threonine-protein phosphatase 2A activator) ELISA Kit人REST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)免疫試劑盒

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*蛹蟲草S期激活化蛋白DBF4A抗體Human PSKH1 (Serine/threonine-protein kinase H1) ELISA KIT人Q熱科克斯體2(Q fever)抗體(IgM)免疫試劑盒

離中不粘柄菌著絲粒相關(guān)蛋白DSN1抗體Human PTH1R(PaRathyroid hormone/paRathyroid hormone-related peptide receptor) ELISA Kit人Q熱科克斯體2(Q fever)抗體(IgG)免疫試劑盒

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果生鏈核盤菌對接蛋白4抗體Human PTPRCAP (Protein tyrosine phosphatase receptor type C-associated protein) ELISA KIT人P選擇(P-Selectin/CD62P)免疫試劑盒

芽胞桿菌DULLARD蛋白抗體Human PACRGL (PACRG-like protein) ELISA KIT人P物質(zhì)受體(SP-R)免疫試劑盒

生黑鏈霉菌絲/蘇蛋白激MNB抗體Human PCID2 (PCI domain-containing protein 2) ELISA KIT人p物質(zhì)(SP)免疫試劑盒

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蠟狀芽孢桿菌朊蛋白DPL抗體Human PDIK1L (Serine/threonine-protein kinase PDIK1L) ELISA KIT人Prominin 2(PROM2)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌肌強直性營養(yǎng)不良蛋白激抗體Human MYH11(Myosin-11) ELISA Kit人Podocin 免疫試劑盒

粘土壤桿菌有絲分裂控制蛋白dis3抗體Human PAM (Peptidyl-glycine alpha-amidating monooxygenase) ELISA KIT人PL7抗體/抗蘇酰tRNA合成(PL7)免疫試劑盒

解鳥柔武氏菌肝癌新基因3蛋白抗體Human SLC51A (Organic solute transporter subunit alpha) ELISA KIT人PL12抗體/抗酰tRNA合成(PL12/AlaRS)免疫試劑盒

普雷恩毛霉Dapper2蛋白抗體Human PTRHD1 (Putative peptidyl-tRNA hydrolase PTRHD1) ELISA KIT人PC4,SFRS1互動蛋白1(PSIP1)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌Dapper3蛋白抗體Human PEMT (Phosphatidylethanolamine N-methyltransferase) ELISA KIT人P53抗體免疫試劑盒

CBS228.60資源名稱: 齒孢青霉 質(zhì)量規(guī)格：1000µg/mL,基體：10%HCL囊

島生異擔子菌Heterobasidion│insulare 質(zhì)量規(guī)格：500mg/L,溶劑：山梨

肺炎克雷伯氏菌Klebsiella│pneumoniae 質(zhì)量規(guī)格：100mg/L,基體:1%HCI補骨脂查爾
結(jié)晶紫-檸檬酸染色液mIgM(Human membrane IgM) ELISA Kit  人表面膜免疫球蛋白M規(guī)格： 48T

mIgD(Human membrane IgD) ELISA Kit  人表面膜免疫球蛋白D規(guī)格： 48T

KIR(Human killer cell immnoglobulin-like receptor) ELISA Kit  人殺傷細胞免疫球蛋白樣受體規(guī)格： 48T

KLR(Human killer cell lectin-like receptor) ELISA Kit  人殺傷細胞凝集su樣受體規(guī)格： 48T

APC(Human activated protein C) ELISA Kit  人活化蛋白C規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。