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甲基綠染色液

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更新時間:2022-07-25 22:20:47瀏覽次數(shù):264

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 應用領(lǐng)域 化工
貨號 FS-R7083    
甲基綠染色液公司正在銷售的產(chǎn)品:綿羊成纖維生長因子受體底物2(FRS2)試劑盒Anti-DYRK1A Antibody鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運載體1抗原
綿羊XC趨化因子受體1(XCR1)試劑盒Anti-DYSF Antibody新朊蛋白/朊蛋白相關(guān)蛋白/沙杜(Shadoo)蛋白抗原
綿羊III型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTX-III)試劑盒 Anti-ECI2 Antibody大腸桿志賀樣素Ⅱ型突變體(O13

詳細介紹

63.jpg
產(chǎn)品分類:核酸染色

儲存條件:室溫,避光,6個月

用途:細胞核染色,可用于免疫組化的復染

注意事項:染色結(jié)果為:細胞核呈綠色。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

甲基綠染色液

100ml

FS-R7083

配制與標定的實驗原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。

13.jpg

實驗方法與判定:

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

4)  挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)  之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

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丁香鏈霉菌單克抗體Human DUSP1(Dual specificity protein phosphatase 1) ELISA Kit人顆粒H(GZMH/CGL2/CTSGL2)免疫試劑盒

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腸沙門氏菌腸炎亞種間粘附分子3抗體Human GPX3(Glutathione peroxidase 3) ELISA Kit人顆粒A(Gzms-A)免疫試劑盒

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: ATCC53010資源名稱: 大腸埃希氏菌 質(zhì)量規(guī)格:用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對試劑3氧代5α類固4脫氫2試劑盒澳茄新堿

新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質(zhì)量規(guī)格:用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對試劑3型1-磷鞘受體試劑盒7-基-4-基
甲基綠染色液GSTs(Human glutathione S-transferases) ELISA Kit  人S轉(zhuǎn)移mei規(guī)格: 48T

DUB(Human deubiquitinating enzyme) ELISA Kit  人泛su分解mei規(guī)格: 48T

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E3/UBPL(Human E3/ubiquitin-protein ligase) ELISA Kit  人泛su連接mei規(guī)格: 48T

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