詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH (7-23)抗體 |
英文名稱 | ACTH (7-23) |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
苦參英文名稱:Matrine保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支Myc基因相關(guān)X因子一抗
對傘花烴、異對;4異英文名稱:Pcymene, isopropyl toluene; 4 isopropyl toluene保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支化絲裂原活化蛋白激酶激酶3一抗
黃芩素英文名稱:Huang Qinsu保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支絲裂原活化蛋白激酶激酶5一抗
琥珀酰明膠英文名稱:Succinylated gelatin含量:HPLC≥98%保存:20℃,避光規(guī)格:700mg化絲裂原活化蛋白激酶激酶5一抗
去羥肌苷英文名稱:Didasine含量:≥98%保存:20℃,避光規(guī)格:100mg膜相關(guān)環(huán)指蛋白5一抗
N(2)L酰L谷酰英文名稱:N (2) L alanyl glutamine L含量:≥98%保存:20℃,避光規(guī)格:50mg肽水解酶一抗
甘精胰島素英文名稱:Insulin glargine含量:≥ 98%保存:20℃,避光規(guī)格:15mg/支絲/蘇蛋白激酶MARK4一抗
舍雷肽酶英文名稱:Serrapeptase含量:≥ 98%保存:20℃,避光規(guī)格:25mg基化樣蛋白11一抗(N端)
鹽半胱英文名稱:Cysteine hydrochloride含量:≥ 98%保存:20℃,避光規(guī)格:100mg大腸癌腫瘤突變蛋白一抗
腦蛋白水解物英文名稱:Brain protein hydrolysate含量:≥ 98%保存:20℃,避光規(guī)格:2ml/支促進調(diào)解蛋白家族2A一抗
L鹽組英文名稱:L histidine hydrochloride含量:≥ 98%保存:20℃,避光規(guī)格:100mg黑色素瘤抑制活性蛋白2一抗
云芝胞內(nèi)糖肽英文名稱:Polysaccharopeptide含量:≥ 98%保存:20℃,避光規(guī)格:0.2g腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白1
L門冬英文名稱:L aspartic acid含量:≥ 98%保存:20℃,避光規(guī)格:100mg血管緊張素Ⅱ2型受體相互作用蛋白一抗
L絲英文名稱:L serine含量:≥ 98%保存:20℃,避光規(guī)格:100mg巨噬細胞清道夫受體一抗
L英文名稱:L methionine含量:≥ 98%保存:20℃,避光規(guī)格:100mg化髓鞘性蛋白一抗
L異亮英文名稱:L isoleucine含量:≥ 98%保存:20℃,避光規(guī)格:100mg化肌球蛋白輕鏈6一抗
L蘇英文名稱:L threonine含量:≥ 98%保存:20℃,避光規(guī)格:100mg化p38MAPK一抗
促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH (7-23)抗體GATA結(jié)合蛋白2抗體Pregn-5-ene-3β,17α,20S-triol中文名:別名:(3β,17α,20S)-Pregn-5-ene-3,17,20-triol分子式:C21H34O3
糖蛋白C抗體Qingyangshengenin 3-O-β-D-cymaropyrasyl-(1→4)-β-D-digitoxopyraside中文名:別名:分子式:C41H58O14
γ氨基丁酸運載蛋白1抗體Periplocoside O中文名:北五加皮苷O別名:分子式:C36H56O10
生長休止特定蛋白7抗體Otophylloside T中文名:別名:分子式:C48H70O18
G蛋白偶聯(lián)受體LOC51210蛋白抗體Periplocoside M中文名:北五加皮苷M別名:分子式:C34H52O9