詳細(xì)介紹
商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義: 海藻糖是由兩個(gè)葡萄糖分子以α,α-1-1 糖苷鍵連接而成的一種非還原雙糖,廣泛存 在于細(xì)菌、酵母菌、霉菌、食用菌、低等植物、昆蟲、無脊椎動(dòng)物和高等植物等多種有機(jī)體中。海藻糖的非還原性決定了它對(duì)酸、堿、高溫等的穩(wěn)定性。另外,它本身具有很強(qiáng)的吸水性,使它在生物體內(nèi)具有抗脫水作用,在逆境條件下可通過識(shí)別外界刺激、產(chǎn)生和傳遞信號(hào)、基因表達(dá)和代謝調(diào)節(jié)來保護(hù)植物免受不良環(huán)境的傷害。 植物體內(nèi)主要以葡萄糖為底物合成海藻糖,該反應(yīng)首先在海藻糖-6-磷酸合成酶(trehalose-6-phosphate synthase,TPS)的作用下,催化尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG)和 6-磷酸葡萄糖反應(yīng)生成中間產(chǎn)物6-磷酸海藻糖,再在海藻糖-6-磷酸磷酸酶 (trehalose 6-phosphate phosphatase,TPP)的作用下去磷酸化,生成海藻糖。因此,測(cè)定TPS活性對(duì)于研究植物逆境具有重要意義。 測(cè)定原理: TPS催化UDPG與G6P生成海藻糖-6-磷酸,同時(shí)產(chǎn)生UDP;UDP在丙酮酸激酶與乳酸脫氫酶作用下,氧化NADH為NAD+,NADH的下降速率與UDP含量成正比,通過340nm吸光度下降速率反映TPS活性。 需自備的儀器和用品: 分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
紫外分光光度法 | 50管/48樣 | AS6321229 |
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:雙試劑,直接操作,快速、簡便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
杠柳苷元;杠柳苷元;無杠柳苷苷元英文名: N-(Ethoxycarbonylmethyl)-6-methoxyquinolinium bromide磷化KLF5抗體包裝1g
杠柳寡糖B英文名: A771726 (Teriflunomide)特異性離子通道蛋白抗體包裝5g
杠柳寡糖C英文名: Angeloylgomisin H沉默驅(qū)動(dòng)蛋白KIF4A抗體包裝1g
高車前苷英文名: MethyltrienoloneATP敏感離子通道蛋白抗體包裝25g
高車前英文名: Crotamiton KIAA1462蛋白抗體包裝5g
高麗紅參(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: ChlorosulfuronKIAA1549蛋白抗體包裝25MG
高麗槐(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: L-Sepiapterin基爾曼氏細(xì)小病VP1/VP2抗體(大鼠潛在病KRV)C端包裝100g
高良姜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: MotesanibKelch樣蛋白20抗體包裝25g
高良姜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Sciadopitysin激肽釋放抑制劑抗體包裝500g
高三尖杉酯堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 10-Hydroxy-2-decenoic acidkelch樣蛋白7抗體包裝5g
高山紅景天(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: AST-1306 mesylateTWIK相關(guān)敏感離子通道蛋白9抗體包裝1g
高烏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Laropiprant,MK-0524激肽釋放6抗體包裝250mg
高香草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Ceftiofur hydrochloride激肽釋放8抗體包裝50mg
膏桐(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Ceftiofur hydrochloride血漿激肽釋放抗體包裝25g
藁本(遼藁本)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: zafirlukast磷化抑癌蛋白EZH2抗體包裝5g
南海海棲菌Oceanicola│nanhaiensis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BP,BR抗血小板抗體IgM試劑盒甘松新;Nardosinone
玫瑰色鮮艷菌Roseivivax│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR抗血小板抗體IgG試劑盒光翠雀堿; denudatine
地衣芽孢桿菌Bacillus│licheniformis 質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BR抗血小板抗體IgA試劑盒甘油三油酯;Triolein
海藻糖6磷酸合成酶(TPS)測(cè)試盒50管/48樣枯草芽孢桿 2-芐基烯酸E3泛連接Elisa
漢遜德巴酵母 5-氨基-2-嘧啶香豆酸-3-羥化Elisa
芽孢桿 芐氧羰基-羥基甘5-氨基酮戊酸脫水Elisa
毛栓孔 4--2-氟芐5-氨基酮戊酸Elisa
貝倫格葡萄座腔梨生專化型 2,4-二氟芐尿卟啉原Elisa
滑菇 4,4'-(1,2-二乙基亞乙基)二尿卟啉原合Elisa
產(chǎn)黃青霉 1-(4-羥丁基)-4-甲基哌單氧化BElisa
蠟樣芽孢桿 2-(叔-丁基)苯基異酸酯腐N-甲基轉(zhuǎn)移Elisa
彎孢 2-哌酮20S蛋白體Elisa
云芝 1-芐基-4-基-4-苯基鹽酸鹽α-L-巖藻糖苷Elisa
短桿 順式-4-氨基環(huán)己鹽酸鹽抗壞血酸過氧化物Elisa
Cystofilobasidium 二鹽基性硬脂酸鉛β-1,3-葡聚糖Elisa
致病擬桿 頭孢西酮色P4503A4Elisa
糞腸球 2,4-二氨基-6-羥基嘧啶羥甲基戊二酸單酰Elisa
枯草芽孢桿 5,6-二甲酯葡萄糖苷酸Elisa